Определение различных форм азота по методу Конвея

Предварительно чашки Конвея смазываем по краю вазелином. В центр чашки вносят 2см³ 0,01нH₂SO₄ и добавляют 2-3 капли смешенного индикатора. По краю чашки вносят 2 см³ минерализата и 2 см³ 33% щелочи (NaOH). Быстро закрывают стеклом и ставят в термостат на 30мин при 40⁰С. После этого избыток кислоты в центре оттитровывают 0,02н щелочью.

Расчетная формула:

, где

V₁ – количество 0,02н щелочи, пошедшей на титрование контрольной колбы, см³

V₂ – количество 0,02н щелочи, пошедшей на титрование рабочей колбы, см³

V₃ – объем разведения, см³

V₄ – объем, взятый на определение, см³

К – поправочный коэффициент для щелочи;

В – эквивалентное количество вещества, взятое на конкретное определение навески в 100гр., мг/см³;

m – масса навески, гр.;

100 – пересчет на 100гр., %

Определение всех форм азота по методу Селекзона

В колбу на 100 см³ с притертой пробкой и стеклянным шариком вносят 1 см³ минерализата и 2 см³ Na₂CO₃ (сода). Шарик пробки обмакивают в 1н H₂SO₄, закрывают пробку колбой и ставят в термостат на 30мин при 40⁰С. По истечение времени колбу вынимают, пробку и шарик ополаскивают в мерную колбу на 50 см³, добавляют 0,5 см³ сегнетовой соли и 1 см³ реактива Несслера. Доводят до метки дистиллированной безаммиачной водой. Колориметрируют при 400нм.

Расчетная формула:

, где

С – концентрация по шкале, мг/см³

V1 – объем разведения, см³

V2 – объем вытяжки, взятой на титрование, см³

m – масса навески, гр.

100 – пересчет на 100гр. рыбы.

Определение тирозина

Определение количества тирозина основано на цветной реакции с фенольным реактивом (реактивом Фолина).

Техника работы:

Навеску исследуемого материала в количестве 25гр. количественно переносят в мерную колбу на 250см³, доливают ¾ объема водой, прогревают до кипения, охлаждают, доливают до метки и дают немного настояться. Полученный раствор профильтровывают через бумажный фильтр. Из полученного раствора берут 20см³ вытяжки и добавляют 20см³ 5% трихлоруксусной кислоты (ТХУ). Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр.

В мерную колбу на 50см³ вносят 2см³ фильтрата, добавляют 10см³ 0,5н раствора едкого натра и 3см³ рабочего реактива Фолина. Раствор настаивают 15-20минут, затем доливают до метки дистиллированной безаммиачной водой и оставляют на 5минут для развития окраски. Колориметрирование проводят на любом спектрофотометре при длине волны 680нм.

Стандартная шкала:

В мерные колбы на 50см³ вносят соответственно 1, 2, 3, …8см³ стандартного раствора тирозина (в 1см³ которого содержится 0,032мг тирозина), затем добавляют 10см³ 0,5н раствора едкого натра и по 3см³ реактива Фолина. Растворы настаивают 15-20минут, затем доливают до метки дистиллированной безаммиачной водой и оставляют на 5минут для развития окраски. Колориметрируют при длине волны 680нм.

Расчетная формула:

, где:

С – концентрация тирозина в образце (мг/ см³);

V₁ – общий объем вытяжки, см³ ;

V₂ – объем фильтрата, взятого на определение, см³;

G – масса навески, гр.;

2 – коэффициент, учитывающий разведение вытяжки ТХУ

100 – пересчет на 100гр фарша.

, где:

Х – содержание тирозина (мг/100гр);

0,0773 – доля тирозина в молекуле тирозина

Определение солености аргентометрическим методом

Навеску исследуемого материала в количестве 25гр. количественно переносят в мерную колбу на 250см³, доливают ¾ объема водой и настаивают в течение 30-35 минут, затем доливают дистиллированной аммиачной водой до метки. Полученный раствор фильтруют через ватно-марлевый фильтр. В коническую колбу помещают 50см³ полученного фильтрата, прибавляем 3-5капель 1% спиртового раствора фенолфталеина (индикатор) и оттитровываем 0,1н щелочью до появления бледно-розовой окраски. В другую колбу отбирают 50см³ нового фильтрата, прибавляют объем щелочи, пошедшей на титрование в предыдущей колбе, 1см³ 10% раствора хромовокислого калия и оттитровывают 0,1н раствором азотнокислого серебра до появления неисчезающей в течение 1минуты оранжево-красной окраски.

Расчетная формула:

, где:

V – количество 0,1н раствора азотнокислого серебра, пошедшее на титрование испытываемого раствора, см³ ;

V₁ – объем мерной колбы, в котором разведена навеска, см³ ;

V₂ – объем вытяжки, взятой на титрование, см³ ;

0,00585 – эквивалентное количество вещества, взятое на конкретное определение навески;

К – поправочный коэффициент для 0,1н раствора азотнокислого серебра

М – навеска пробы, гр.;

100 – пересчет на 100 гр. фарша