1.3.1.2 Оформление результатов опыта

Полученные результаты записывают в таблицу 1.

Таблица 1

№ пробирки	Окраска	Вывод

1.3.2 Опыт 2. Выделение глобулинов из гороховой и соевой муки

Приборы и реактивы: штатив с пробирками; стеклянные палочки; бумажные фильтры; 10 % раствор хлорида натрия; 10 % раствор гидроксида натрия; 0,5 % раствор сульфата меди; гороховая мука и соевая мука.

1.3.2.1 методика выполнения работы

В 2 пробирки поместить по 1 г гороховой и соевой муки, прилить 10 мл 10 % раствора хлорида натрия и тщательно перемешать. Извлечение глобулинов проводится при температуре 35⁰С в течение 30 минут в термостате. Через 30 минут жидкость отфильтровывают и с частью раствора проводят биуретовую реакцию.

1.3.2.2 Оформление результатов опыта

Полученные результаты записывают в таблицу 2.

Таблица 2

Образец	Окраска	Вывод

1.3.3 Опыт 3. Выделение казеина из молока

В молоке общее содержание белков находится , как правило, в пределах 2,9-4,0%. Белки молока делят на две группы: казеиновые и сывороточные. Среди белков молока рассматривают : основных белков: казеины (α_s1-, α_s2-, β-), сывороточные белки (β-лактоглобулин, α-лактоальбумин), альбумин сыворотки крови, иммуноглобулины, β₂-микроглобулин, лактоферрин, церулоплазмин и компонент 3 протеозопептонов.

Основной белок коровьего молока – казеин – является фосфопротеидом. На его долю приходится около 80% белкового азота молока. Казеины – это группа гетерогенных фосфопротеидов, самоассоциирующихся в мицеллы в присутствии кальция, цитратов и фосфатов. Основная часть казеина (около 95%) в молоке содержится в виде казеиновых мицелл. Мицеллы соединены между собой с помощью кальция и мицелярного фосфата.

Казеин можно выделить из молока добавлением уксусной кислоты до изоэлектрической точки (рН 4,6). Белок выделяется в виде мягкого, медленно оседающего осадка.

Приборы и реактивы: химический стакан на 100 мл; мерный цилиндр на 100 мл; стеклянные палочки; пробирки; воронки; бумажные фильтры; пипетки; 10% раствор уксусной кислоты; универсальная индикаторная бумага; 10 % раствор гидроксида натрия; молоко; азотная кислота концентрированная; гидроксид аммония концентрированный; спиртовка.

1.3.3.1 Методика выполнения работы

В стакан емкостью 100 мл налить 20 мл молока и прилить равный объем дистиллированной воды. К этой смесим осторожно, по стеклянной палочке прилить 10% раствор уксусной кислоты до рН 4,6 (2-3 мл уксусной кислоты), рН раствора определить с помощью универсального индикатора. Для этого стеклянной палочкой наносят каплю на универсальную индикаторную бумагу и по шкале определить рН. При рН 4,6 казеин выпадает в осадок. Ему дают отстояться 10 минут. Слить без взбалтывания надосадочную жидкость. В оставшийся осадок добавить по каплям 10% раствор гидроксида натрия до растворения осадка. Полученный раствор отфильтровать через влажный фильтр. С фильтратом провести цветные реакции (биуретовую и ксантопротеиновую).

Подавляющее большинство белков и пептидов при нагревании с крепкой азотной кислотой дает желтое окрашивание, переходящее в оранжевое при добавлении щелочи или аммиака. Эта реакция характерна для бензольного ядра циклических аминокислот. При действии крепкой азотной кислоты на эти аминокислоты происходит нитрование бензольного кольца с образованием нитросоединений желтого цвета.

В пробирку с фильтратом прилить 5-6 капель концентрированной азотной кислоты. Появляется осадок свернувшегося белка, который при осторожном нагревании окрашивается в желтый цвет. Дать пробирке охладиться и осторожно прибавить концентрированный аммиак.