Praktikum_gistologia
.pdfЗадания для самостоятельной работы
1.Нарисовать схемы форм гибели ядра клетки.
2.Схематично нарисовать варианты обратимых и необратимых изменений митохондрий.
Литература
1.Данилов Р.К. Гистология. Эмбриология. Цитология. Учебник для студентов медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. – С.69-72.
2.Гистология, эмбриология, цитология: учебник / Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др.; под ред. Ю.И.Афанасьева, Н.А.Юриной. – 6-е изд. перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.
– С.100-104.
– 31 –
ДИАГНОСТИКА ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ И ЭЛЕКТРОННЫХ МИКРОФОТОГРАФИЙ ПО МОДУЛЮ «ЦИТОЛОГИЯ. УЧЕНИЕ О СТВОЛОВЫХ КЛЕТКАХ»
Цель занятия
Обобщить и систематизировать теоретические знания по цитологии. Отработать навыки микроскопирования и анализа (диагностики) гистологических препаратов, «чтения» электронных микрофотографий.
Ориентировочная основа действий Задание 1. Уметь ответить на теоретические вопросы, контрольные тесты
иучебно-исследовательские задачи по пройденным темам, содержащиеся в данном практикуме (см. материалы для самоконтроля к каждому занятию
икомплекты материалов для самоподготовки, разработанные на кафедре).
Теоретические вопросы:
1.Гистология как наука и учебная дисциплина.
2.Вклад гистологов Военно-медицинской академии в развитие учения о тканях.
3.Современные методы гистологических исследований.
4.Основные этапы приготовления гистологического препарата. Понятие
огистологических красителях.
5.Структурные уровни организации живого.
6.Структурная организация клетки по данным световой и электронной микроскопии.
7.Ультраструктура и функции интерфазного клеточного ядра.
8.Ультраструктура и функции клеточной мембраны. Клеточные рецепторы. Межклеточные соединения.
9.Классификация, ультраструктура и функции клеточных органелл.
10.Опорно-двигательные структуры клетки (цитоскелет).
11.Клеточные включения.
12.Воспроизведение клеток.
13.Понятие о жизненном цикле клетки. Митотический цикл.
14.Взаимосвязь структуры и функции на клеточном и субклеточном уровнях.
15.Регенерация обновляющихся, растущих, стационарных тканей (клеточных популяций).
16.Дифференцировка клеток.
17.Реактивные изменения клеток и их ультраструктур.
Задание 2. Решить тестовые задания по цитологии (см. комплект материалов для самоподготовки, разработанный на кафедре; «Тесты по цитологии, эмбриологии и общей гистологии»/ Под ред. Р.К. Данилова. - СПб.: ВМедА, 1998. – С. 3 - 16).
– 32 –
Задание 3. Уметь диагностировать следующие гистологические препараты.
1.Нервные клетки чувствительного (спинномозгового) узла. Окраска - гематоксилин и эозин.
2.Митоз в растительных клетках корешка лука. Окраскажелезный гематоксилин.
3.Комплекс Гольджи в нервных клетках. Окраска - импрегнация тетраоксидом осмия.
4.Жировые включения в клетках печени. Окраска - сафранин и тетраоксид осмия.
5.Жировые клетки сальника (окраска судан III и гематоксилин).
6.Включения гликогена в клетках печени. Окраска - кармин по Бесту и гематоксилин.
7.Пигментные включения в клетках. Препарат не окрашен.
8.Секреторные гранулы в клетках эпителия. Окраска - гематоксилин и эозин.
9.Однослойный плоский эпителий брюшины - мезотелий (плоскостной препарат). Окраска - импрегнация нитратом серебра с докраской ядер гематоксилином.
10.Клетки и межклеточное вещество рыхлой соединительной ткани. Окраска - гематоксилин.
11.Симпласты поперечнополосатой мышечной ткани. Окраска - железный гематоксилин.
12.Нервные клетки спинного мозга. Окраска – импрегнация нитратом серебра.
Задание 4. Уметь определять на электронных микрофотографиях различные ультраструктурные компоненты клеток организма, в том числе реактивно измененные (см. комплект материалов для самоподготовки, разработанный на кафедре).
Задание 5. Уметь составить протоколы описания препаратов, перечисленных в задании 3 (см. приложение 3).
Задание 6. Представить преподавателю для контроля конспекты лекций по пройденному материалу, тетради для самостоятельных работ, альбомы для зарисовки гистологических препаратов.
Цель занятия достигнута, если Вы правильно решили не менее 50% предложенных тестовых задач; в процессе индивидуального собеседования с преподавателем продемонстрировали умение правильно диагностировать гистологические препараты, узнали все структуры на электронных микрофотографиях, показали знание теоретического материала по пройденным темам.
Заключение
В результате изучения раздела «Цитология. Учение о стволовых клетках» Вы знаете: устройство микроскопа, правила микроскопирования и методы микроскопии; терминологию, основные принципы структурной организации
– 33 –
клетки и ее компартментов в связи с выполняемой функцией; морфологические проявления дифференцировки и реактивных изменений клеток, формы деления клеток. Вы ознакомлены с этапами приготовления и окраски препаратов, методами гистохимического анализа клеток; имеете представления о клеточной теории и ее значении для развития цитологии и гистологии.
Основная литература
1.Данилов Р.К. Гистология. Эмбриология. Цитология. Учебник для студентов медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. – С. 12-72.
2.Гистология, эмбриология, цитология: учебник / Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др.; под ред. Ю.И.Афанасьева, Н.А.Юриной. – 6-е изд. перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.
– С. 17-104.
3.Елисеев В.Г., Афанасьев Ю.И., Котовский Е.Ф., Яцковский А.Н. Атлас микроскопического строения клеток, тканей и органов. – М.: Медицина, 2004.
4.Данилов Р.К., Клишов А.А., Боровая Т.Г. Гистология человека в мультимедиа. Учебник для студентов медицинских вузов. – СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2004. – 362 с.
5.Тесты по цитологии, эмбриологии и общей гистологии /Под ред. Р.К.Данилова. – СПб.: ВМедА, 1998. – С. 3 – 16.
6.Конспекты лекций.
Дополнительная литература
1.Руководство по гистологии (в двух томах) / Под ред. Р.К. Данилова.
– 2-е изд. испр. и доп. - СПб.: СпецЛит, 2011.
2.Жункейра Л.К., Карнейро Ж. Гистология: атлас: учебное пособие: пер. с англ. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 576 с.
3.Международные термины по цитологии и гистологии человека с официальным списком русских эквивалентов. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009.
4.Клетки / под ред. Б. Льюина и др., пер с анг. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011. – 951с.
– 34 –
РАЗДЕЛ (МОДУЛЬ): ОБЩАЯ ГИСТОЛОГИЯ (УЧЕНИЕ О ТКАНЯХ)
Необходимый исходный уровень знаний
•Клеточная теория и учение о клетке.
•Понятие о стволовых клетках.
•Закономерности пролиферации и дифференциации клеток.
•Реактивные изменения клеток и их ультраструктур.
Граф логической структуры раздела
1.Введение в учение о тканях. Эмбриональный гистогенез. Эмбриональные и тканевые стволовые клетки
Эмбриональное развитие низших позвоночных. Эмбриональные и
тканевые стволовые клетки Эмбриональное развитие высших позвоночных
2. Общая гистология Эпителиальные ткани
Эпителии кожного типа Эпителии кишечного, почечного и целомического типов Эпителии нейроглиального типа Железистый эпителий
Кровь и лимфа как ткани Кроветворение Рыхлая соединительная ткань
Соединительные ткани со специальными свойствами Ткани с опорно-механической функцией
Плотные соединительные ткани Хрящевые ткани Костные ткани Мышечные ткани
Нервная ткань и нейроглия
– 35 –
ВВЕДЕНИЕ В УЧЕНИЕ О ТКАНЯХ. ЭМБРИОНАЛЬНОЕ РАЗВИТИЕ НИЗШИХ ПОЗВОНОЧНЫХ.ЭМБРИОНАЛЬНЫЕ И ТКАНЕВЫЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ
Цель занятия
На примере развития некоторых низших позвоночных изучить основные этапы эмбриогенеза. Знать механизмы образования зародышевых листков и эмбриональных зачатков тканей. Иметь представление о локализации стволовых клеток в составе эмбриональных зачатков тканей.
Работа с учебными таблицами и препаратами. Ориентировочная основа действий
Задание 1. Учебная таблица «Яйцеклетка ланцетника».
Рассмотреть таблицу, уяснить строение изолецитальной яйцеклетки.
Задание 2. Учебная таблица «Полное равномерное дробление зиготы».
Рассмотреть дробящуюся зиготу ланцетника. Обратить внимание на равные по величине клетки - бластомеры, образовавшиеся в результате митоза, и на первую борозду дробления, проходящую в зиготе меридионально - от анимального полюса к вегетативному.
Задание 3. Учебная таблица «Бластула ланцетника».
Рассмотреть однослойную бластулу ланцетника. Обратить внимание на практически одинаковый размер бластомеров в бластуле. Зарисовать и обозначить: бластомеры, бластодерма, бластоцель, анимальный и вегетативный полюсы, краевая зона, презумптивные эмбриональные зачатки (кожной эктодермы, кишечной энтодермы, нервной пластинки, хорды, мезодермы).
Задание 4. Учебная таблица «Гаструла ланцетника (поперечный срез)».
Рассмотреть поперечныйсрезгаструлы,найтиследующиеструктуры: эктодерма,энтодерма, мезодерма, нервнаяпластинка, хорда, полостьпервичнойкишки.
Задание 5. Учебная таблица «Гаструла ланцетника (сагиттальный срез)».
Рассмотреть двухслойную гаструлу ланцетника и найти на таблице следующие структуры: эктодерму, энтодерму, мезодерму, нервную пластинку, хорду, бластопор, гастроцель. Обратить внимание на формирование осевого комплекса зачатков.
Задание 6. Препарат “Полное неравномерное дробление зиготы лягушки” (окраска - пикрофуксин).
При малом увеличении рассмотреть дробящуюся зиготу лягушки. Найти борозды дробления. Изучить строение бластомеров, образовавшихся в результате митоза.
Задание 7. Препарат “ Бластула лягушки” (окраска - пикрофуксин). При малом увеличении рассмотреть многослойную бластулу лягушки. Обратить
– 36 –
внимание на разную величину бластомеров в бластуле. Мелкие и пигментированные клетки-бластомеры с желточными включениями расположены на анимальном полюсе и образуют крышу бластулы. Крупные светлые клеткибластомеры с крупными желточными включениями образуют толстое дно бластулы. В месте смыкания тонкой крыши бластулы с утолщенным дном выделяются клетки-бластомеры краевой зоны. В центральной части имеется полость, несколько смещенная к анимальному полюсу.
Задание 8. Препарат “Гаструла лягушки” (окраска - пикрофуксин). При малом увеличении рассмотреть препарат и определить в гаструле лягушки бластомеры детерминированных эмбриональных зачатков. В эктодерме это мелкие, темные клетки; в энтодерме - крупные, светлые клетки; в хорде и мезодерме - мелкие клетки. Найти указанные зачатки, гастроцель, бластопор, переднюю и заднюю губы бластопора, желточную пробку.
Задание 9. Препарат «Нейрула лягушки» (окраска - пикрофуксин). При малом увеличении найти на поперечном срезе зародыша лягушки осевой комплекс эмбриональных зачатков. Рассмотреть поверхностный слой клеток эктодермы и расположенные под ней удлиненные клетки, образующие нервную трубку с полостью - невроцелем. Обратить внимание на округлое образование под нервной трубкой - хорду. Отметить расположенные по бокам от хорды и нервной трубки массивные скопления клеток зачатка мезодермы. Уметь выделять в зачатке мезодермы сомиты, сегментные ножки, висцеральный и париетальный листки спланхнотома и полость между ними - целом. Рассмотреть зачаток кишечной энтодермы, образовавший первичную кишку. Зарисовать, обозначить на рисунке: эктодерму, энтодерму, нервную трубку, хорду, сомиты.
ДЕМОНСТРАЦИОННЫЙ ПРЕПАРАТ
Препарат «Зародыш форели с желточным мешком” (окраска - пикрофуксин).
При малом увеличении рассмотреть поперечный срез зародыша форели. Найти кожный эпителий, клетки нервной трубки, расположенные под нервной трубкой клетки хорды, мезенхиму по бокам от хорды и нервной трубки. В брюшной полости тела зародыша рассмотреть поперечные срезы участка нефрогенной ткани и первичной кишки. В теле зародыша определить кожный эпителий, тканевые элементы нервной трубки и хорды, мезенхиму, нефрогенную ткань, кишечный эпителий. В стенке желточного мешка изучить: жел-
– 37 –
точный эпителий, развивающийся из внезародышевой кишечной энтодермы, и мезенхиму с кровеносными сосудами, развивающуюся из внезародышевой мезодермы. Рассмотреть полость желточного мешка, заполненную желтком.
Материалы для самоконтроля
1.Задачи и методы современной медицинской эмбриологии.
2.Периоды эмбриогенеза низших позвоночных.
3.Оплодотворение, дробление, гаструляция, гисто- и органогенез. В чем заключается сущность каждого периода?
4.Что такое зародышевые листки и эмбриональные зачатки?
5.В составе какого эмбрионального зачатка находятся стволовые клетки для нервных тканей? А для эпителиев?
Контрольные тесты
Вопрос 1. Тотипотентность характерна для:
1.Бластулы.
2.Гаструлы.
3.Женской половой клетки.
4.Зиготы.
Вопрос 2. Зародышевые листки:
1.Эктодерма, мезодерма, энтодерма.
2.Кожная эктодерма, кишечная энтодерма.
3.Образуются в ходе гаструляции.
4.Формируются в процессе нейруляции.
Вопрос 3. Провизорные органы у рыб:
1.Амнион.
2.Желточный мешок.
3.Аллантоис.
4.Хорион.
Вопрос 4. Нервная трубка образуется в процессе:
1.Бластуляции.
2.Дробления.
3.Нейруляции.
4.Гистогенеза.
Вопрос 5. Мезенхима - это:
1.Полипотентный эмбриональный зачаток.
2.Средний зародышевый листок.
3.Провизорный орган.
4.Место локализации стволовых кроветворных клеток.
Вопрос 6. Зигота обладает свойством:
1.Тотипотентности.
2.Мультипотентности.
– 38 –
3.Унипотентности.
4.Полиплоидии.
Вопрос 7. Бластомеры образуются в ходе:
1.Оплодотворения.
2.Дробления.
3.Гистогенеза.
4.Органогенеза.
Вопрос 8. Внутренний зародышевый листок называется:
1.Мезодерма.
2.Кишечная энтодерма.
3.Мезенхима.
4.Энтодерма.
Вопрос 9.Стволовые клетки могут локализовываться в гаструле везде, кроме :
1.Хорды.
2.Нервной пластинки.
3.Кишечной энтодермы.
4.Гастроцеля.
Учебно-исследовательские задачи
1.Произойдет ли нарушение эмбриогенеза ланцетника, если в эксперименте на стадии двух бластомеров уничтожить одну из клеток? Обоснуйте свой ответ.
2.Возможно ли клонирование зародыша из клеток кишечной трубки? Если да, то каким образом?
Задание для самостоятельной работы
Укажите на схеме развития ланцетника (рис. 8) элементы, составляющие осевой комплекс эмбриональных зачатков.
Рис.8. Нейрула ланцетника (схема).
– 39 –
Литература
1.Данилов Р.К., Боровая Т.Г. Общая и медицинская эмбриология. - СПб: СпецЛит, 2003. - С. 73 – 86.
2.Данилов Р.К. Гистология. Эмбриология. Цитология. Учебник для студентов медицинских вузов. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. - С. 81 – 87.
3.Гистология, эмбриология, цитология: учебник / Ю.И.Афанасьев, Н.А.Юрина, Е.Ф.Котовский и др.; под ред. Ю.И.Афанасьева, Н.А.Юриной. – 6-е изд. перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013.
– С. 107-113.
– 40 –