Mikrobiologia (2)
.docТоксинообразование. Из культур гриба выделены микотоксины — дендродохины, наиболее токсичные из всех известных микотоксинов, относящихся к трихотеценам. Токсины образуются как на естественных субстратах (сене, соломе, полове, ячмене, овсе), так и на искусственных средах. Максимальное накопление микотоксинов в субстратах происходит от 10 до 15 дней. Однократная доза в 350—400 г пораженной соломы приводит лошадей к гибели в течение нескольких часов после скармливания.
Устойчивость. Споры гриба малоустойчивы к воздействию различных химических веществ: гидроокись натрия 2 %-ной концентрации убивает споры гриба в течение 10 мин, 2 %-ный раствор формалина — через 1 мин задерживает прорастание конидий, а через 2 мин убивает их.
Фунгицидным действием обладают 2 -иый раствор однохлористого йода, некоторые гербициды, например трефлан, метафен и др.
Патогенность. Болезнь описана у лошадей, овец, собак, кошек, кур, кроликов. В экспериментальных условиях восприимчивы овцы, куры, кролики, морские свинки, мыши.
Причиной отравления животных и человека являются токсины дендродохины, образующиеся на кормах. Дендродохины — цитоплазматические яды и характеризуются высокой токсичностью не только для животного, но и растительного организма, а также обладают антимикробным действием (С. Н. Харченко, 1968).
Лабораторная диагностика. В лаборатории проводят комплексный анализ: микроскопию, выделение чистой культуры, биопробу с целью установления токсичности гриба. Учитывают клинические признаки и патологоанатомические изменения.
Биопрепараты. Специфические средства терапии и профилактики не разработаны.
ВОЗБУДИТЕЛИ АСПЕРГИЛЛОТОКСИКОЗОВ
Аспергиллотоксикозы (Aspergillotoxicosis) — алиментарные микотоксикозы сельскохозяйственных животных, возникающие при скармливании им кормов, пораженных аспергиллами. Грибы из рода Aspergillus распространены повсеместно.
Широко встречаются и более детально изучены аспергиллотоксикозы, вызываемые токсинами грибов Aspergillus fumigams — аспергиллофумигатотоксикоз и Aspergillus flavus — аспергилло-флавитоксикоз (афлатоксикоз).
Морфология и культивирование грибов описаны в разделе «Возбудители аспергиллеза».
Токсинообразование. Грибы из рода Aspergillus, продуцируя токсины, кроме микозных энзоотий вызывают аспергиллотоксикозы, которые приобрели международное значение.
Asp. fumigatus — возбудитель аспергиллофумагатотоксикоза — типичный представитель микрофлоры почв, зерна, грубых кормов, продуцирует более десятка антибиотиков токсинов: фумигалин. фумигатин, фумигации, мигалин, глиотоксин, спинулозин, коевую и гельволевую кислоты, трипадицин.
Установлено, что токсинообразование обычно совпадает с процессом спорообразования, накопление токсических веществ идет параллельно росту и развитию гриба как на пораженных кормах (особенно на сене), так и на искусственных средах Чапека, сусло-агаре, глюкозопептонной среде.
Dendrodothiotoxicosis — остропротекающий микотоксикоз сельскохозяйственных животных, возникающий после скармливания грубых кормов, пораженных грибом Dendrodochium toxicum. Впервые этиологию этой болезни установили Н. М. Пидопличко и В. И. Билай в 1939 г. Гриб — сапрофит, развивается на кормах, содержащих целлюлозу, наиболее часто поражает солому, полову, мякину. Возбудитель входит в группу несовершенных грибов (Fungi imperfecti, порядок Acervulales.
сильным канцерогеном, в дозе 1,56 мг у утят вызывает атрофию печени.
Микотоксины аспергиолов обладают местным и общим действиями. Местный процесс характеризуется воспалением кожи, слизистых оболочек. Общее действие проявляется поражением центральной нервной системы нарушением процессов иммуногенеза.
Лабораторная диагностика. Для исследования в лабораторию направляют паренхиматозные органы погибших животных, соскобы с некротических участков, а также пробы подозрительных кормов. Проводят микроскопию и микологическое исследование кормов и проверку их токсичности для лабораторных животных.
Для установления афлатоксинов используют экспресс-методы, в частности метод тонкослойной хроматографии.
Биопрепараты. Специфические средства лечения и профилактики не разработаны.
ВОЗБУДИТЕЛИ ФУЗАРИОТОКСИКОЗА
Фузариотоксикозы (Fusarioloxicoses) — элементарные микотоксикозы, вызываемые грибами рода Fusarium или их токсическими метаболитами, содержащимися в кормах. Отравление животных наблюдают при пастьбе по стерне осенью или на лугах с молодой травой ранней весной после заморозков. Грибы рода Fusarium относятся к порядку гифомицетов (Hypbomycetales), несовершенных грибов (Fungi imperfect!), семейству Tuberculariaceae.
В настоящее время выделено три типа фузариотоксикозов: спортрихиеллотоксикозы, фузариограминеаротоксикозы и фузарионивалетоксикозы. возбудителями которых являются соответственно F. sporotrichiella. F. graminerum, F. nivalе.
Морфлогия. У грибов рода Fusarium мицелий несетированный, хорошо развит, белого, розового или красного цвета. Микроконидии одноклеточные, с одной или тремя перегородками, овальные, яйцевидные, грушевидные или лимоноподобные, иногда шаровидные или веретенообразные. Образуются на воздушном мицелии и располагаются на конидиеносцах в виде головок или цепочек, длиной 3—6 мкм.
Макроконидии многоклеточные (3—9 клеток), веретеновидно- серповидные, часто с ножкой у основания, с верхушечной клеткой, большей частью сильно согнутой или постепенно утолщающейся, заостренной или притуплённой. В воздушном мицелии они образуются на конидиеносцах или в спородохиях.
Хламидоспоры шаровидные, грушевидные, яйцевидные, одно- двухклеточные, располагаются цепочкой или клубочком на концах гиф (терминальные) или по ходу мицелия (интеркалярные). Образуются в гифах мицелия, в строме, конидиях, конидиеносцах. Цвет их коричневый. Строма окрашена в желтый, розовый, красный, коричневый цвета.
Некоторые представители этого рода имеют и сумчатые стадии.
Культивирование. Фузарии выращивают на среде Чапека, для чего используют подозрительное зерно светло-серого или розового цвета, и помещают на среду. Инкубируют при температуре 22—25 С. В течение 3—5 дней на среде вырастают пышные желтоватые колонии, которые пересевают на сусло- агар или картофельный агар с целью получения чистой культуры, которую исследуют под микроскопом. Используя морфлогические особенности макро- конидий, наличие микроконидий, их формы, образование хламидоспор, пигментацию, определяют вид фузариев.
Токсинообразование. Из грибов рода Fusarium выделяют различные токсины. Из F. Sporolrichiella var. роае получены кристаллические вещества: поин, липотоксол, спорофузарин, поэфузарин, спорофузариногенин и поэфузариногенин. Эти же грибы продуцируют токсические метаболиты, которые относятся к группе трихотеценов: токсин Т-2 и диацетокснскирпенол. В природных условиях токсин Т-2 образуется при поражении грибом зерна, особенно кукурузы, грубых кормов. Наличие токсина Т-2 определяют с помощью ТСХ-хлороформенных и ацетоновых экстрактов, полученных из мицелия гриба и пораженных фузарием субстратов. Токсины гриба F. sporotrichiella и его разновидностей устойчивы к действию физических и химических факторов.
Из F. gramineaarum получен комплекс токсических метаболитов в том числе зеараленон (F-2), обладающий слабой токсичностью, но способный вызывать аборты, а также бесплодие у крупного рогатого скота и свиноматок.
Из F. nivale (штамм Fn2B) получено два токсина, вызывающих явления тошноты, сонливости и геморрагии, поражение клеток мозговой ткани мышей и кроликов: фузаренон X и ниваленон, которые относятся к группе трихотеценов типа Б. 1оксичсжкт метаболиты из культуры фузария и пораженных им субстратов экстрагируют метанолом.
Патогенность. К фузариотоксикозам восприимчивы сельскохозяйственные животные всех видов. Токсины грибов, поступая с кормом в пищеварительныи тракт, проникают в кровеносную систему и разносятся по всему организму. В первую очередь поражается центральная нервная система, затем желудочно-кишечный тракт, паренхиматозные органы, костный мозг. Развиваются экссудативные дерматиты, атрофия тимуса и другие явления.
Диагностика. Проводят ее на основании комплексного исследования с учетом анамнеза, клинических, патологоанатомических данных и токсикомикологического анализа кормов. Токсичность корма, пораженного грибами, проверяют на кроликах кожной реакцией или путем подкожного заражения белых мышей. Животные погибают.
Некоторые исследователи для этих целей рекомендуют использовать аквариумных рыбок, 1,5—2-месячных цыплят, 9-дневные куриные эмбрионы, введение экстракта в дозе 0,1—0,2 мл в бородку курам.