Лекция_4_ГИ_М_2014
.pdf
ВИРУСОПОДОБНЫЕ ЧАСТИЦЫ –
макромолекулярные структуры,
состоящие из одного или нескольких
самособирающихся
вирусных белков
1
2
- геномная РНК |
- собранная |
3 |
|
- белок оболочки |
частица |
Структура генома вируса Репликаза ТБ |
БО |
Замена гена
Инсерция гена Замена участка гена
Репликаза – участвует в размножении вируса
БО – белок оболочки (закрывает РНК вируса)
ТБ – транспортный белок (транспорт вируса по растению)
Возможный дизайн частиц вируса табачной мозаики с экспонированными эпитопами
Молекула вирусной РНК
Субъединица белка оболочки
Антигенные ЭПИТОПЫ
ДВА ВИРУСНЫХ ВЕКТОРА В ОДНОЙ КЛЕТКЕ: НА ОСНОВЕ ВТМ И ХВК
Промотор |
РЕПЛИКАЗА крВТМ |
ТБ крВТМ |
терм. |
Act2 |
|
||
|
|
|
РНК
Промотор |
РЕПЛИКАЗА ХВК |
25K 8K |
БО ВТМ |
линкер эпитоп |
терм. |
35S |
|
12K |
|
|
|
Белок БО
СБОРКА ВИРУСНЫХ ЧАСТИЦ
Рекомбинантный БО ВТМ
Р Н К
Antigenic peptide
|
P |
F |
|
|
|
C |
|
K |
P |
|
D |
G |
|
A |
T |
|
I |
R |
|
L |
S |
|
Y |
M |
|
S |
Coat protein
Вакцинные эпитопы, экспонированные на поверхности вирионов
Пр е и м у щ е с т в а
üЭффективность за счет адъювантных свойств вирусных частиц
üНевысокая цена
üПростота получения
üКороткие сроки
1.Экспрессия в растениях – лучше чем в бактериях
2.Транзиентная система экспрессии – альтернатива трансгенным растениям
3.Вирусные векторы – мощный инструмент транзиентной экспрессии
4.Agrobacterium tumefaciens – без нее никуда
5.Получение моноклональных антител и вирусоподобных частиц в растениях – это очень
Системы для транзиентной экспрессии: растительные вирусы
Рекомбинантные вирусные частицы с антигенными эпитопами на поверхности вириона
Пациент-специфические одноцепочечные вариабельные фрагменты (scFv) Ig (Geneware TM, LSB
Corp. USA).
Недостатки:
•не все вирусы удачно экспрессируют большие белки;
•потеря трансгена при распространении вируса по растению