Лекция_4_ГИ_М_2014
.pdf
•Синдром «махрового корня» (hairy roots, HR) - это широко распространенное заболевание двудольных растений, которое заключается в образовании разросшихся, чрезмерно ветвящихся корней.
•Данное заболевание вызывается почвенной бактерией Agrobacterium rhizogenes, которая трансформирует клетки корня, после чего использует образовавшиеся HR как местообитание и в качестве источника необходимых бактерии питательных веществ
Процесс образования HR в природе
ОСНОВНЫЕ ЭТАПЫ ПОЛУЧЕНИЯ КУЛЬТУРЫ HR
кокультивация
Эксплант
Обработка
антибиотиками
Образование HR
Суспензия A.rhizogenes
Стерильная культура HR
Подтверждение трансформации HR
Перевод культуры |
Фрагмент Т-ДНК |
|
HR в реактор |
||
|
Основные области использования культуры HR:
Культура HR
Получение вторичных метаболитов
|
|
Изучение физиологических |
Получение фармацевтических |
|
процессов и путей |
Фиторемедиация |
биосинтеза |
|
белков |
|
|
|
|
Использование культур HR для получения вторичных метаболитов
Увеличение выхода готового продукта
Подбор условий культивирования, |
Использование методов генной инженерии |
использование элиситоров |
|
Перенос в клетки гетерологичных генов
Использование «сильных» промоторов
«слабый» промотор – |
«сильный» промотор – |
низкая экспрессия |
высокая экспрессия |
Блокировка конкурирующих путей биосинтеза
Основной
путь
Субстрат 3-1
Субстрат 1 |
Субстрат 2 |
|
Побочный путь |
Субстрат 3-2
Основной
путь
Субстрат 3-1
Субстрат 1 |
Субстрат 2 |
|
Побочный путь |
Небольшой выход целевого продукта
Нецелевой продукт
Большой выход целевого продукта
Повышение экспрессии транскрипционных факторов
Мало транскрипционного |
TF |
TF |
TF |
TF |
Много транскрипционного |
|
фактора |
фактора |
|||||
|
|
|
|
Получение фармацевтических белков
Преимущества культуры HR для наработки рекомбинантных белков
Относительно низкая стоимость |
Имеются все механизмы |
|
модификации белков |
||
|
Нет риска заражения вирусами |
Условия выращивания строго |
|
контролируются |
||
|
Генетическая и фенотипическая стабильность