Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Лекция_4_ГИ_М_2014

.pdf
Скачиваний:
40
Добавлен:
24.03.2015
Размер:
6.63 Mб
Скачать

Культивирование HR

Одной из важных проблем, замедляющих широкое внедрение культур HR в практику биотехнологического производства, является сложность их культивирования. Существует 2 основных проблемы:

1.Активно растущие HR имеют очень высокую потребность в кислороде и питательных веществах, которые должны подаваться в питательную среду и равномерно распределяться по ней; в то же время, простое механическое перемешивание HR невозможно, т.к. это приведет к механическим повреждениям корней и образованию каллуса

2.Очень трудно напрямую измерить темпы роста культуры HR из-за ее гетерогенной природы; для этой цели используются различные методы, такие как измерение проводимости или осмолярности среды, однако все они являются косвенными

Основные типы биореакторов

1. Реактор с механическим перемешиванием 2. Реактор с пузырьковой колонной

3. Реактор с волновым перемешиванием

4. Реактор с орошаемым слоем

Основные проблемы использования растений для получения рекомбинантных белков

Сложность/

Уровень

время получения

экспрессии

продуцента

 

Умеренное Низкий

Подходы для производства биоматериалов и фармацевтических препаратов в растениях:

-экспрессия гетерологичных генов в трансгенных растениях (гетерологичный ген вводится в геном растения)

-транзиентная (временная) экспрессия гетерологичных генов в трансгенных растениях:

-агроинфильтрация

-инфекция модифицированным вирусными векторами

Транзиентная экспрессия

Транзиентная экспрессия – это временная экспрессия интересующего гена в том или ином объекте (растения, животные), не сопровождающаяся интеграцией трансгена в геномную ДНК.

Достоинства: Недостатки:

высокий уровень наработки интересующего белка;

не требует системы регенерации тканей;

экспрессия гена ограничена определенной растительной тканью;

применима для широкого круга растений.

временная экспрессия внесенного гена → отсутствие передачи трансгена последующим поколениям;

сложности при использовании в промышленных масштабах.

Системы для транзиентной экспрессии

Растительные

Agrobacterium

вирусы

tumefaciens

 

ядро

трансформация

Т-ДНК

вирусный

вектор

инфицирование

репликация

цитоплазма

Вирусная

Агробактериальная

трансформация

трансформация

ВИРУСНЫЕ ВЕКТОРЫ

И ТРАНЗИЕНТНАЯ СИСТЕМА ЭКСПРЕССИИ

ЦЕЛЕВЫХ БЕЛКОВ В РАСТЕНИЯХ