Практическое значение

Реакции химической денатурации используют для осаждения белка в биологическом материале с целью дальнейшего определения в фильтрате низкомолекулярных веществ, для выявления присутствия белка в различных физиологических жидкостях и количественного анализа.

В лечебной деятельности их используют при лечении и для профилактики отравлений солями тяжелых металлов в быту и на производстве; для обезвреживания отходов в санитарной практике; для дезинфекции кожи и слизистых.

Оформление работы

Отмечают принцип метода, ход работы, регистрируют механизм осаждения и результаты анализа в таблице. Делают вывод о наиболее эффективном способе осаждения белков.

Исследование денатурации белков при нагревании в условиях различной рН Проведение анализа

В 5 пронумерованных пробирок наливают по 10 капель раствора яичного белка.

Нагревают 1-ю пробу и наблюдают помутнение раствора вследствие термической денатурации.

Во 2-ю пробу добавляют 2 капли 1% раствора СН₃СООН (слабокислая среда). Нагревают, наблюдают сначала помутнение (белок теряет заряд и приближение к изоэлектрическому состоянию), а при дальнейшем нагревании – белый хлопьевидный осадок.

В 3-ю пробу добавляют 2 капли 10% раствора СН₃СООН (сильнокислая среда) и нагревают. Обычно осадок не образуется, так как частицы белка перезаряжаются и приобретают положительный заряд.

В 4-ю пробу добавляют 2 капли 10% раствора СН₃СООН и 1 каплю насыщенного раствора NaCl (сильнокислая среда + электролит) и нагревают. Осадок белка выпадает, так как происходит нейтрализация заряда на частицах белка.

В 5-ю пробу добавляют 2 капли 10% раствора NaOH (щелочная среда) и нагревают. Осадок не образуется, так как отрицательный заряд на частицах белка усиливается.

Оформление работы

Отмечают принцип метода, ход работы, регистрируют в таблице результаты и делают вывод о механизмах осаждения белка.

N пробы	Реактивы	pH	Результаты	Вывод о механизме осаждения

Тема 1.3. Классификация белков. Строение и функции белков в организме. Сложные белки Актуальность

Пептиды и белки выполняют разнообразные специфические функции в организме: структурная, транспортная, гормональная, ферментативная и др.

Изменение в строении белков может лежать в основе развития патологических процессов (серповидно-клеточная анемия, талассемии). В то же время многие заболевания влекут за собой сдвиги содержания и соотношения белков, в частности в плазме крови, что позволяет использовать их для диагностики.

Реакции открытия белка и простетической группы позволяют понять состав и строение сложных белков, а также использовать эти данные для количественного определения белков.

Цель

Изучить структуру сложных белков: фосфопротеинов, нуклеопротеинов, гликопротеинов, хромопротеинов (гемо- и флавопротеинов), металлопротеинов, липопротеинов.

Научиться выделять сложные белки из различных объектов и проводить качественные реакции на компоненты сложных белков.

Вопросы для самоподготовки

1. Структурные формулы протеиногенных аминокислот.

2. Классификация белков по функциональным признакам (защитные, структурные, транспортные, сократительные, гормональные, ферментативные). Примеры белков каждого класса.

3. Классы белков в зависимости от их строения: простые и сложные, мономеры и полимеры, глобулярные и фибриллярные. Примеры белков каждого класса.

4. Характеристика простых белков (альбумины, глобулины, гистоны, протамины). Отметьте особенности их строения и функции.

5. Характеристика и особенности строения классов сложных белков:

• Нуклеопротеины. Общая структура и свойства ДНК и РНК. Каковы отличия ДНК и РНК? Строение нуклеотидов на примере АМФ, АДФ, АТФ, цАМФ. Типы гистонов, их роль в образовании нуклеосом и укладке ДНК.

• Хромопротеины(гемопротеины, флавопротеины, ретинальпротеины). Понятие о химической структуре, их основные представители и функции. Представление о строении молекулы гемоглобина. Структура гема.

• Гликопротеины, структура, функции в организме. Представление о строении углеводной части. Протеогликаны, структура, функции в организме. Химическая структура гиалуроновой кислоты и хондроитинсульфатов.

• Липопротеины. Структура липопротеиновой частицы. Основные транспортные формы липидов плазмы – хиломикроны, липопротеины очень низкой плотности (ЛПОНП), липопротеины низкой плотности (ЛПНП), липопротеины высокой плотности (ЛПВП). Их функции.

• Металлопротеины, представление о строении. Основные представители. Что такое металлоферменты? Их примеры.

• Фосфопротеины. Каким образом присоединяется фосфатная группа к белку? Основные представители.

6. Анализ химического состава сложных белков – гликопротеинов и фосфопротеинов. Принцип методов.