- •Для студентов лечебного и педиатрического факультетов
- •Оглавление
- •Раздел 1. Строение, свойства и функции белков
- •Лабораторная работа 1
- •Лабораторная работа 2
- •Оформление работы
- •Практическое значение
- •Тема 1.2. Структура и физико-химические свойства белков Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико-диагностическое значение
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Исследование денатурации белков при нагревании в условиях различной рН Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Тема 1.3. Классификация белков. Строение и функции белков в организме. Сложные белки Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Анализ химического состава гликопротеинов Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 2. Строение, классификация и роль витаминов Тема 2.1. Жирорастворимые витамины Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Тема 2.2. Водорастворимые витамины Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Качественные реакции на аскорбиновую кислоту
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 3. Энзимология Тема 3.1. Строение и свойства ферментов. Регуляция активности ферментов Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Проведение реакции.
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Обнаружение специфичности действия амилазы слюны Принцип
- •Проведение реакции
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 4 Влияние активаторов и инактиваторов на активность амилазы Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение реакции
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Вопросы для самоподготовки
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 5. Обмен аминокислот и белков Тема 5.1. Внешний обмен белков Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 3
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1 Определение активности аминотрансфераз сыворотки крови Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1 Определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 6. Строение и обмен пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов Тема 6.1. Строение и метаболизм пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Титрометрическое определение мочевой кислоты в моче
- •Ситуационные задачи
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 8. Строение и обмен углеводов Тема 8.1. Строение и внешний обмен углеводов. Обмен гликогена Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •ТЕмы для реферативных сообщений
- •Нормальные значения
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тема 8.2. Окисление глюкозы в анаэробных условиях. Глюконеогенез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 8.3. Аэробное окисление глюкозы. Пентозофосфатный путь Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Материал исследования
- •Реактивы
- •Определение концентрации глюкозы
- •Нормальные величины
- •Оценка гликемической кривой
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 9. Строение и обмен липидов
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 2 Определение концентрации триацилглицеролов в сыворотке крови Принцип
- •Материал исследования
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Качественная проба Либена на ацетон Принцип
- •Проведение анализа
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 9.3. Внутриклеточный обмен фосфолипидов и холестерола. Транспорт липидов в крови Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 10. Гормональная регуляция обмена веществ и функций организма Тема 10.1. Механизмы передачи гормонального сигнала. Классификация гормонов. Гормоны гипофиза. (семинар) Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Тема 10.2. Гормоны гипоталамуса, гипофиза, щитовидной поджелудочной и паращитовидной желез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Оформление работы
- •Тема 10.3. Гормоны гипофиза, надпочечников и половых желез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 11. Биохимия крови
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 4 (теоретически) Электрофорез белков на бумаге и ацетатцеллюлозных пленках Принцип
- •Материал исследования
- •Оборудование
- •Проведение анализа (основные положения)
- •Клинико-диагностическое значение
- •Тема 11.2. Обмен железа. Гемопротеины. Синтез и распад гема Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 11.3. Неорганические вещества крови. Кислотно-основное состояние Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Виды нарушений кислотно-основного состояния
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 12. Биохимия почек и печени Тема 12.1. Водно-солевой обмен. Нормальные и патологические компоненты мочи Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Лабораторная работа 2
- •Определение кетоновых тел тест-полосками "Кетофан"
- •Определение билирубина и уробилиногена тест-полосками "Иктофан" Принцип
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Определение гемоглобина и эритроцитов тест-полосками "Гемофан"
- •Принцип
- •Нормальные величины
- •Нормальные величины
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 3 (теоретически) Проба Реберга – определение клиренса креатинина Материал исследования
- •Принцип
- •Проведение анализа
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Приложение 1 Классификация и номенклатура ферментов
- •I класс. Оксидоредуктазы
- •II класс. Трансферазы
- •III класс. Гидролазы
- •IV класс. Лиазы
- •V класс. Изомеразы
- •VI класс. Лигазы
- •Приложение 2 Индивидуальные белки плазмы крови
- •Характеристика некоторых белков плазмы крови
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Нормальные величины
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Церулоплазмин
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •‑Глобулины
- •Желудочный сок
- •Клиренс эндогенного креатинина
- •Приложение 4
- •Строение, классификация и роль витаминов
- •Энзимология
- •Биологическое окисление
- •Обмен аминокислот и белков
- •Строение и обмен пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов
- •Матричные биосинтезы
- •Строение и обмен углеводов
- •Строение и обмен липидов
- •Гормональная регуляция обмена веществ и функций организма
- •Биохимия крови
- •Биохимия почек и печени
Темы для реферативных сообщений
Применение ферментов и их ингибиторов в качестве лекарственных средств.
Использование ферментов в промышленности, в биохимических и иммунологических исследованиях.
Лабораторная работа 1
Количественное определение активности амилазы в сыворотке крови и моче
Принцип
‑Амилаза (диастаза, 1,4‑‑D‑глюкангидролаза, КФ 3.2.1.1.) катализирует гидролиз‑1,4‑гликозидных связей крахмала и гликогена до мальтозы и декстринов.
Крахмал + Н2ОМальтоза + Декстрины
Количество оставшегося крахмала, пропорциональное каталитической активности фермента, определяют по цветной реакции с йодом.
Реактивы
1) Субстрат, 0,04% р-р крахмала в дистиллированной воде, 2) 0,01 М рабочий раствор йода.
Материал исследования
Сыворотка крови. Моча.
Проведение анализа
|
Опыт 1, мл |
Опыт 2, мл |
Контроль, мл |
Раствор крахмала |
1,0 |
1,0 |
1,0 |
|
Инкубируют при 37°С в течение 5 минут | ||
Сыворотка крови |
0,02 |
–– |
–– |
Моча |
–– |
0,02 |
–– |
|
Инкубируют при 37°С точно 5 минут | ||
0,01 М рабочий р-р йода Холодная дистил. вода |
1,0 8,0 |
1,0 8,0 |
1,0 8,0 |
|
Перемешивают. Измеряют оптическую плотность опытных и контрольного растворов против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр) |
Расчет
Активность амилазы, г/л·ч = , где
Еконтри Еопыт– соответственно оптическая плотность контрольной и опытных проб, 240 – коэффициент пересчета.
Нормальные величины
Сыворотка крови Моча |
16-30 г/л·ч 28-160 г/л·ч |
Клинико-диагностическое значение
У здорового человека в крови содержится амилаза 2 изоферментных типов: панкреатическая – P‑тип (около 30%) и слюнная – S‑тип (около 70%), которые попадают в кровь в результате естественного старения и отмирания клеток слюнных желез и поджелудочной железы. Фермент имеет относительно низкую молекулярную массу (около 48000 Д), фильтруется в почечных клубочках и присутствует в моче. Соотношение изоферментов в моче иное, чем в крови: Р‑тип – 70%, S‑тип – до 30%.
Сыворотка крови и моча
Повышение активности фермента в сыворотке крови и в моче происходит главным образом при заболеваниях поджелудочной железы. При остром панкреатите активность фермента в крови достигает максимума через 12‑24 часа от начала заболевания (повышение в 10‑30 раз) и при правильной терапии нормализуется на 2‑6-е сутки. При хронических панкреатитах повышение активности фермента умеренное. Возрастание активности фермента выявляется также при поражении слюнных желез, холецистите, заболеваниях желчных путей, беременности, почечной недостаточности, кишечной непроходимости, диабетическом кетоацидозе, некоторых опухолях легких и яичников.
Снижение активности в клинической практике выявляется редко, обычно диагностического значения не имеет. Иногда отмечается у больных с заболеваниями печени (цирроз), злокачественными опухолями, гипотиреозом, кахексией, при токсикозе беременных.