Содержание
Введение……………………………………………………………………………..3
Глава 1. Устойчивость микроорганизмов к дезинфицирующим средствам
и её мониторинг……………………………………………………………………..7
1.1 Устойчивость микроорганизмов к антибактериальным
средствам: распространенность, механизмы формирования, классификации….7
1.2 Факторы, влияющие на эффективность дезинфекции и проявления устойчивости микроорганизмов к дезинфицирующим средствам……………...16
1.3 Мониторинг устойчивости микроорганизмов к
дезинфицирующим средствам…………………………………………………….20
Глава 2. Организация, материалы и методы исследований чувствительности микроорганизмов к дезинфицирующим средствам……………………………...31
2.1 Общая характеристика методов и основные этапы проведения исследований……………………………………………………………………….31
2.2 Анализ методов определения чувствительности микроорганизмов к АБП..35
2.2.1 Методы серийных разведений………………………………………………35
2.2.2 Диско-диффузионный метод (ДДМ)………………………………………..45
2.2.3 Методы оценки чувствительности микроорганизмов, циркулирующих в лечебно-профилактических учреждениях, к дезинфицирующим средствам….48
2.3 Контроль качества определения чувствительности………………………….57
Заключение………………………………………………………………………….63
Список литературы…………………………………………………………………66
Приложение…………………………………………………………………………70
Введение
данной темы определяется тем, последние годы проблема к антибактериальным , антибиотики, антисептики , находится в внимания ученых и здравоохранения. микроорганизмов к дезинфицирующим ДС) на протяжении ряда Пхакадзе Т., Walsh S.., J.., A.D В.., О.В Г.., Е.И Е.. др.). Установлено к различным , у различных микроорганизмов J.., T. E A..). о механизмах устойчивости выявления генетического формирования к ЧАС дезсредствам до представлений и только устойчивости ( ., Hiyama K., .-Y., .И., Anderson .., O'Toole G.). Еще меньше информации встречаемости устойчивости распространенности и влиянии на формирование Chapman J.., В.., О.В
В устойчивости возбудителей к , назрела необходимость изучения проблемы устойчивости её мониторинга изучения и динамического устойчивостью микроорганизмов и антисептикам обусловлена факторов: инфекциями, связанными медицинской помощи ), широким распространением госпитальных , арсеналом адаптационных условно-патогенных , спектра применяемых , единой стратегии применения практическом здравоохранении . причинами. Чувствительность применяемым ДС время может рассматриваться из основных , на качество дезинфекционных лечебно- (ЛПО). микроорганизмов к может варьировать в типа ЛПО санитарно-противоэпидемического , применения ДС микроорганизмов адаптироваться к факторов, числе применяемых в средств, формирования устойчивых штаммов многолетних исследованиях кафедрой эпидемиологии и медицины НижГМА показана необходимость динамической чувствительности микрофлоры ДС (Шкарин .., Ковалишена О., 2004 – 2012
Одним борьбы с ИСМП дезинфекционных и как за счет ДС и , и за счет и проведения мероприятий. Рациональная проведение эффективных играют важную роль мер по инфекциями. Стратегию ИСМП в утвержденная в 2011г Национальная концепция , связанных с оказанием », одним из является систематическое проведение , на сдерживание микроорганизмов, устойчивых и антисептикам счет качества проведения , дезинфекционных мероприятий результатов мониторинга устойчивости дезинфектантам. или иных ДС , режимов их типом медицинского учреждения ситуацией. ротации дезинфицирующих средств обоснования которой механизмов формирования резистентности дезинфектантам, мониторинг резистентности в ДС в Шкарин В.., ; Селькова Е.). Требования к проведению микроорганизмов к мониторингу устойчивости в надзора за ВБИ) закреплены документах ( .1.3-10 «- требования к организациям медицинскую деятельность
Однако остаются организационно- проведения мониторинга устойчивости различного профиля решение затруднено в несовершенством методического . внедрению мониторинга устойчивости препятствует отсутствие чувствительности микроорганизмов к , на федеральном . полное и всестороннее вопросов, возникновения устойчивости к , ее формирования , влияющие на развитие ДС; ситуации в ЛПО и формирование микрофлоры.
, имеется множество теоретического, методического плана, широкому внедрению мониторинга к ДС разработки научно- к его медицинских учреждениях разного , различной эпидемиологической , территориальном уровне.
Объект : дезинфицирующих средств на .
Предмет : исследования устойчивости микроорганизмов средствам.
: провести анализ основных устойчивости микроорганизмов средствам.
:
- устойчивости микроорганизмов к : распространенность, , классификации;
факторы, эффективность дезинфекции и микроорганизмов к .
- провести микроорганизмов к ;
- проанализировать науке методы микроорганизмов к дезинфицирующим ;
- качества определения чувствительности дезинфицирующим средствам
Структура работы , решаемыми в .
Глава . микроорганизмов к и её мониторинг
. Устойчивость микроорганизмов к : распространенность, , классификации
проникновения бактерий или слизистые барьеры бактериальное инфекционное . всего иммунная система с возбудителем заболевание не развивается микроорганизмы, , тонкую стратегию «» лекарством. попадают в клетки результате фагоцитоза
Дальнейшее слияние лизосом предотвращается , следовательно, невозможен клеток. вакуоле, стенка для необходимых веществ (аминокислоты ), микроорганизмы размножаются клетка не погибнет из клетки в другую клетку хозяина.
применяют хламидии, , Legionella pneumophila gondii, представители и Leishmania одним препаратом в малоэффективна, лекарство сначала должно клетку хозяина затем через мембрану , находятся бактерии бактерии размножаются быстро силы организма с инфекцией, заболевание проявляется воспаления, например инфекция или путей. Для вещества, или препятствующие их при этом собственные клетки организма
Специфическое бактерий возможно в , если лекарственное в обменные процессы только для . действие оказывают вещества синтез клеточной , так как клетки имеют клеточной .
К антибактериальным относят антибиотики препараты, синтетические различного химического , и противотуберкулёзные средства
Структуры , служащие мишенями для химиотерапевтических препаратов на рис. .
. . Мишени основных химиотерапевтических бактериальной клетке в тексте).
, реализуя антагонистические взаимодействия , выделяют БАВ , бактериоцины), подавляющие конкурентов. от греч. - , + biosis ] — химические вещества , избирательно тормозящие размножение или убивающие .
Антибиотики результату воздействия на , строению и .
Основой классификации (АБП их химическое строение антибиотиков в их химическим строением табл. .
термином «» только те вещества вырабатываются микробами , такие антибактериальные или , как сульфаниламиды и триметоприм, , не антибиотики
Если исходить понятий бактерицидности , то эти понятия , как обе нарушают синтез белка структурах клетки лишь в том бактерицидная активность величины концентрации препарата жидкостях, — не зависит зависит от . результату воздействия на бактерицидные антибиотики микробную клетку, — подавляющие и размножение. используются при инфекционных процессах Острый обусловливается интенсивным . Действие на делящиеся нарушение синтеза процесс не длительный препараты бактерицидного недлительного применения, до получения .
Бактериостатические препараты длительного использования хронического течения или стадии утихания . Однако к макролидам , линкомицину, развивается устойчивость, рекомендуют применять до 5 дней механизму действия , правило, делят группы:
— антибиотики, микробной стенки митоза: пенициллины (ЦС , монобактамы (азтреонам , фосфомицин, (ванкомицин, ). фармакологическому эффекту группы являются бактерицидными .
II антибиотики, нарушающие мембраны: , препараты (нистатин , амфотерицин В ).
По фармакологическому также являются .
III группа , нарушающие синтез нуклеиновых кислот: , , линкозамиды (, ), макролиды (эритромицин , азитромицин и .), , фузидин, гризеофульвин (АГ канамицин, гентамицин и др
По фармакологическому являются бактериостатическими составляет амикацин, бактерицидно независимо .
В последнее разделение антибиотиков действия на 5 (табл ).
— подавить . Для этого ему в бактериальную , вступить во взаимодействие .
Мишени антибиотиков у микроорганизмов . Лекарства могут клеточной стенки (, , циклосерин, ), РНК на уровне - (рифампицины белка на уровне стрептомицин, , , аминогликозиды, тетрациклины , антибиотики могут организацию и функции (полимиксины ). Ингибиторами синтеза ДНК ДНК- блеомицин).
, в том бактерии, быстро неблагоприятным условиям . Выработка устойчивости к — один ярких примеров такого . утверждать, или поздно любой станет нечувствительным антибактериальному препарату. отношении каждого идет тем быстрее в большем данное вещество.
По , как бактерии вырабатывают антибиотикам, изобретать все новые . можно предположить если сегодня мы назначать антибактериальные детям, то нам лечить нечем. Появление антибиотиков оказало на микроорганизмы. смысле, дополнительным фактором отбора обитания микробов , как и следовало , научились к . Этот феномен получил (сопротивляемости по отношению антибиотикам
В проблема антибиотикорезистентности является области применения . оказалось, использование к образованию нечувствительных по отношению и потому и опасных, предшественники. различны: в микробы меняют , в других случаях вещества связывающие . , вызываемые микробами с , тяжелее и лечению.
лечении таких быть использованы только сильные антибиотики препараты, которые известны микробам причиной возникновения антибиотикорезистентности распространенное или антибиотиков в лечении . Основной движущей антибиотикорезистентности является естественный клонов микроорганизмов возможны и другие . субштаммы, антибиотикам, уничтожаются после себя , обладающие устойчивостью к условиях отсутствия - конкуренции за пищу . Эти клоны освободившиеся биологические ниши их доминирование , не постоянно давление .
Ряд научных данных поддерживает том, применением антибиотиков и существует определенная : ) изменения в применении (хотя всегда) сопровождаются в резистентности ) резистентность более характерна штаммов, микроорганизмов, циркулирующих стационаров, ) многих случаях предшествующее позволяет с предсказать заражение резистентным , ) отделения ( отделения реанимации) высоким уровнем имеют и наиболее резистентности, ) дольше пациент получает , более вероятно он будет колонизирован .
Учитывая многообразия, для , резистентные клоны распространенными, чем , селективное давление и происходит в целым рядом :
-интенсивное (например отделениях интенсивной терапии
- профилактических целях неоправданно ;
- антибиотиков (способ , , низкое качество );
-несоответствующее пациентов (, , принимающих самостоятельно);
- человеческой популяции ( хозяйствах, хозяйствах, в ).
Известно резистентность микроорганизмов к быть природной . Природная резистентность является признаком микроорганизмов природная устойчивость характеризуется микроорганизмов мишени либо недоступностью мишени низкой проницаемости инактивации . При бактерий природной клинически неэффективны. устойчивостью понимают штаммов бактерий сохранять тех концентрациях , подавляют основную часть . Встречаются ситуации большая часть микробной приобретенную устойчивость этом приобретенная резистентность сопровождается снижением антибиотика. Формирование всех случаях , за счет приобретения информации или экспрессии собственных генов
Известны механизмы устойчивости бактерий :
Модификация .
Инактивация антибиотика
Активное из микробной клетки ).
Нарушение структур микробной клетки
Защита .
1. действия антибиотика мишеней действия антибиотика в результате кодирующих их генах таких изменений к снижению ( ) способности мишени антибиотиком.
. антибиотика. (ферментативного разрушения у бактерий начала использования этих качестве антибактериальных . всего, они защиты от . В последующем детерминанты среди возбудителей .
3. антибиотика из (эффлюкс). , минимум, семейства транспортных систем активное выведение (в том антибиотика) клетки. «» этих систем определяет уровень природной к антибиотику активации выведения отмечают резистентности.
. проницаемости оболочки микробной . механизм распространен основном, среди , обладающих внешней является наименее специфичным антибиотиков разных . гидрофильных антибиотиков внутрь осуществляется через . При нарушении структуры или их транспорта антибиотика резко , проявляется в к нескольким классам .
5 мишени. Защита к наименее антибиотикорезистентности. Установлено бактерии способны , предотвращающие связывание антибиотика , причем известно указанные белки связываются антибиотиком, мишенью действия и - образом модифицируют . этот механизм был для тетрациклинов сравнительно недавно он и для .
Мутации приводят структурных белков , в структуре 30 рибосом, пенициллин-связывающих стенки) (например, - РНК- ДНК-гираз возможны мутации гена, кодирующего ЛС.
, наблюдаемые с частотой ~7 до ", играют очень незначительную формировании резистентности
Селекция штаммов фоне применения часто происходит селекция , выживанию и в популяции бактерий к ЛС путём ряд штаммов вырабатывает устойчивость . Эти штаммы известны [от . resistant S. ].
. Факторы, влияющие дезинфекции и микроорганизмов к дезинфицирующим
(дезинфекционное средство микроорганизмы определяется , связанных как со микроорганизмов, с особенностями окружающей т.. этих факторов позволит проводимой дезинфекции литературе приводятся данные при прочих чем больше микробных на том объекте, тем требуется для микроорганизмов дезинфектантом [, , 11].
была проиллюстрирована Spaulding показал, идентичных условиях опыта 10 спор потребовалось 30 минут для уничтожения спор Bacillus subtilis часа [].
Снижение микробной обеззараживаемых объектов время экспозиции, уничтожения всей флоры [11 , 17]. , необходимо учитывать локализацию . , имеющие сложное , , соединения и каналы , эндоскопы), , поскольку в этих возникать сложности с проникновением дезинфектанта части оборудования дезинфекции подвергаются только , которые имеют с дезинфектантом [, , 19].
, микроорганизмы разных групп , родов, даже разные штаммы обладают неодинаковой существенно различающейся чувствительностью или иным [9, , ]. Это свойство проявляется в отношении химическим дезинфицирующим . , известно, что растворов хлорактивных чувствительны грамотрицательные и [16
В настоящее случаи возникновения дезинфектантам у широкого и грамотрицательных 6, 16 ]. О более грамположительных микроорганизмов в грамотрицательными сообщают [5, ]. ряде работ к ЧАС у . и коагулазоотрицательных ; к ЧАС, , и некоторым у P. 8, ]. данным выборочных исследований стафилококков удельный к хлорамину штаммов 30 до %, фенолу – до %, – от 20%. Эти указывают, были устойчивы к 25 – % , к хлоргексидину - %; энтеробактерии характеризовались к хлорамину - % хлоргексидину - %; отмечается низкий уровень йодопирону [].
Необходимо констатировать популяции микроорганизмов спектру чувствительности к , создает предпосылки штаммов. Среди стафилококков и выявлены штаммы, 5- . Энтеробактерии чаще устойчивы препарату []. авторы отмечают вариабельность ДС энтеробактерий от мест обитания . Популяции бактерий от больных, устойчивость к , фенолу, ниртану сравнению со , из пищевых продуктов ].
Многие изучают вопрос формирования ДС на у микроорганизмов разных 11, , ]. По некоторым данным 50% Staphylococcus aureus, , Proteus vulgaris АС и ДС [12 , 22]. Кроме , мнение о устойчивости к ЧАС характерна для , микобактерий, бактериальных 7].
грамотрицательных бактерий наибольшей P. 13]. У штаммов стафилококков отмечают наличие естественной соединениям из [23]. , резистентные к микроорганизмов имеют атипичные , , культуральные и . Последнее вызывает определенные диагностике инфекционной этапе выделения и [8 ].
Что касается , в литературе данные о наличии природных популяциях [7].
Существуют , в природных популяциях устойчивые к . Чаще встречаются варианты по сравнению чувствительностью, но варианты, после воздействия концентраций , и выше практике дезинфекции [].
Природная многим антибактериальным препаратам не только ., но и других грамотрицательных бактерий spp., B и др 18]. Интересно то, устойчивости к дезинфектантам источника / бактерий. Так сведения, отделениях хирургического профиля . проявляла резистентность с частотой 15±1, 100 исследованных культур ]. В целом , у больничных популяций и частота вариантов выше, устойчивости шире ].
Существует мнение очевидной зависимости к ДС возбудителей тяжестью вызываемых нет [6 , высокоустойчивые риновирусы , правило, клинически , в то низкоустойчивые вирусы гепатитов С, , ВИЧ, а формы целого являются возбудителями тяжелых смертельных болезней образом, возбудители болезней легко ДС и наоборот ].
Физические факторы Некоторые физические факторы влияют применения ДС, числе температура , относительная влажность воздуха воды. , большинства дезинфектантов возрастает повышения температуры некоторыми исключениями, , натра. хлорактивных соединений, температуры ускоряется диссоциации в воде антимикробная активность ]. Однако температура не определенной точки которой происходит разложение [11 того, присутствие может влиять обеззараживания.
активности различных присутствии органических веществ АДВ с субстрата, в на микроорганизмы низкая концентрация [, ]. Например, в среде органических , эффективности хлорактивных температуры проявляется менее , .к. активность снижается вследствие хлора с [16]. исследованиях было добавления в питательную или галактозы устойчивость иерсиний к род бактерий энтеробактерий; грамотрицательные микрометров длиной микрометра в диаметре анаэробы) ].