Полезные материалы за все 6 курсов / Ответы к занятиям, экзаменам / 8. Клиническая вирусология

Источник инфекции: больной человек.

Пути передачи: алиментарный, реже – воздушно-капельный.

Материал на исследование: фекалии.

Микробиологическая диагностика: ПЦР.

Норо-, астро- и парэховирусы широко распространены в человеческой популяции. Более 90% людей инфицируются этими вирусами и болеют в детском возрасте (от 2 до 5 лет).

5.Характеристика вирусов – возбудителей гепатитов А и Е, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика гепатита А

Вирус гепатита А (HAV): РНК-содержащий, не имеет суперкапсидной оболочки.

Источник инфекции: больной человек.

Путь передачи: алиментарный (через инфицированные пищевые продукты и воду).

Патогенез: из кишечника вирус попадает в кровоток и переносится в печень. Инфицируя гепатоциты, вирус не вызывает цитотоксического эффекта. Повреждение зараженных гепатоцитов возникает в результате атаки на них ЦТЛ. Клетки, содержащие вирус, уничтожаются, повреждения восстанавливаются.

Инкубационный период: в среднем 30 дней.

Клиника: заболевание имеет острое начало, наблюдается повышение температуры, тошнота, рвота. На 5-7 день болезни возможно появление желтухи. Встречаются варианты бессимптомного течения заболевания. Хронические формы гепатита и вирусоносительство не развиваются.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА:

▪определение в сыворотке крови IgM к вирусу гепатита А на ранних стадиях болезни (основной метод);

▪определение IgG в парных пробах сыворотки крови к HAV. Диагностическим является 4-кратное нарастание тира антител.

21

▪обнаружение HAV в фекалиях больного.

2.ПЦР: обнаружение РНК вируса в фекалиях.

Специфическая профилактика гепатита А.

Активная: инактивированная культуральная вакцина; Пассивная (экстренная): иммуноглобулин нормальный человеческий. Прово-

дится лицам, контактировавшим с больными.

Вирус гепатита Е (HEV): РНК-содержащий, не имеет суперкапсидной оболочки.

Источник инфекции: больной человек.

Вирус может поражать диких и домашних животных (свиней, крупный рогатый скот, птиц и т.д.) и передаваться от них к человеку.

Путь передачи: алиментарный, в основном через инфицированную воду. Патогенез: репродукция вируса происходит в гепатоцитах и сопровожда-

ется гибелью клеток.

Инкубационный период: от 2 до 6 недель.

Клиника: заболевание сопровождается умеренным поражением печени, интоксикацией, реже – желтухой.

Наибольшую опасность гепатит Е представляет для беременных во II и III триместрах. Заболевание у них может приобретать злокачественное течение с быстрым развитием острой печеночной и почечной недостаточности. Летальность до 20%. При трансплацентарной передаче вируса могут происходить выкидыши.

Материал на исследование: фекалии, сыворотка крови больного.

Микробиологическая диагностика.

1. ИФА: определение IgM и IgG к вирусу гепатита Е в сыворотке крови больного.

2. ПЦР: обнаружение РНК вируса в фекалиях и крови больного.

22

6. Возбудители парентеральных вирусных гепатитов (B, D, C, G), микробиологическая диагностика, специфическая профилактика гепатита В

Вирус гепатита В (HBV): сложноорганизованный ДНК-содержащий вирус. Он состоит из сердцевины – капсида, являющегося его НВс-антигеном и суперкапсидной оболочки, содержащей поверхностный НВs-антиген. Суперкапсидная оболочка двухслойная, что определяет чрезвычайно высокую устойчивость вируса во внешней среде. Для его уничтожения требуется автоклавирование при давлении 1,5 атм в течение 40 минут.

Антигены вируса гепатита В:

HBsAg: поверхностный, или австралийский (впервые обнаружен в сыворотке крови австралийских аборигенов), находится в суперкапсидной оболочке вируса. Обнаруживается в крови не только в составе вирионов, но и в виде самостоятельных фрагментов, которые неинфекционны, но высокоиммуногенны, т.е. стимулируют образование анти-НВs-нейтрализующих антител. HBsAg также обнаруживают в слюне, моче, сперме, влагалищном секрете;

HBcAg: «сердцевинный антиген», никогда не определяется в свободном состоянии в крови. Его обнаруживают только в зараженных вирусом гепатоцитах;

HBeAg: является производным HBcAg. Появление HBeAg в крови связано с репликацией вируса в гепатоцитах;

HBxAg: появляется при развитии первичного рака печени.

Источник инфекции: вирусоноситель или больной человек. Главными источниками заболевания являются вирусоносители, количество которых в мире превышает 400 миллионов человек.

Пути передачи:

▪парентеральный (основной) – при переливании крови и ее препаратов, при инъекциях, зубоврачебных манипуляциях и т.д.;

▪половой (через сперму и влагалищный секрет);

▪интранатальный;

▪трансплацентарный;

▪трансплантационный.

23

Патогенез: вирус гепатита В размножается в гепатоцитах без цитопатогенного действия на них. Для HBV характерно взаимодействие с гепатоцитами как по типу интегративной, так и по типу продуктивной инфекции. Интегративная инфекция сопровождается встраиванием вирусной ДНК в хромосому гепатоцита. При этом наблюдается синтез HBsAg. В процессе продуктивной инфекции происходит формирование новых вирусных частиц. Репликация вируса протекает в цитоплазме гепатоцита. Маркером репликации является появление в крови HBеAg. Сам вирус не разрушает клетки. Повреждение и лизис гепатоцитов вызывают CD8+ Т-лимфоциты, что провоцирует клеточное воспаление и развитие острого гепатита.

Инкубационный период: от 30 до 90 дней.

Клинические формы:

▪острая: может протекать как с клиническими проявлениями (желтушный и безжелтушный варианты), так и без них (инаппарантная форма);

▪хроническая (у 10-15% больных): формируется в результате интегративной вирусной инфекции и проявляется рецидивирующей симптоматикой с

нарушениями функции печени в периоды репликации вируса. Осложнения: острая печеночная энцефалопатия (печеночная кома), цир-

роз печени, первичный рак печени.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА:

▪определение HBs- и HBeAg в крови больного. Показателем активной репликации вируса (при острой инфекции и рецидиве хронической формы) является одновременное присутствие в крови HBs- и HВeAg. При хронической форме в стадии ремиссии в крови длительно и стабильно обнаруживается только HBs-антиген.

▪определение IgM к HBcAg, что свидетельствует об острой форме заболевания.

2.ПЦР: определение ДНК вируса гепатита В в крови, что свидетельствует об

остром течении гепатита.

24

Активная (плановая) специфическая профилактика гепатита В: ре-

комбинантная генно-инженерная вакцина (Россия) – содержит HBsAg (входит в календарь прививок). Длительность поствакцинального иммунитета не менее 7 лет.

Вирус гепатита D (дельта вирус): дефектный РНК-содержащий вирус (не имеет суперкапсидной оболочки), является сателлитом (спутником) вируса гепатита В, т.к. способен к репродукции только в HBV-инфицированных клетках. Дельта-вирус использует HBsAg в качестве своего оболочечного белка для защиты собственного генома.

Источник инфекции: больной или вирусоноситель. Пути передачи: аналогичные гепатиту В.

Клиническая картина аналогична проявлениям гепатита В, но с преобладанием более тяжелого течения.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к вирусу гепатита D.

2.ПЦР: обнаружение РНК вируса в крови больного.

Вирус гепатита С (HCV): РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку. Нуклеиновая кислота вируса обладает высокой генетической изменчивостью вследствие частых мутаций.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Пути передачи: парентеральный (основной) – при инъекциях и гемотрансфузиях, реже – трансплацентарный и половой.

Каждый второй пациент с HCV-инфекцией относится к лицам, вводившим внутривенно наркотики (гепатит наркоманов). В мире более 1/3 населения инфицированы HCV.

Инкубационный период: от 6 до 120 недель.

Клиническое течение: В связи с высоким уровнем генетической изменчивости в течение заболевания, HCV «ускользает» от иммунного надзора организма. Эта особенность определяет значительное количество (до 85%) хрониче-

25

ских форм заболевания. Острое заболевание протекает, как правило, в виде стертой или бессимптомной (инаппарантной) форм, но в 50% случаев переходит в хроническую форму.

Осложнения: цирроз печени, первичный рак печени.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к HCV в сыворотке крови больного.

2.ИФА: определение corAgHCV

3.ПЦР: определение РНК вируса гепатита С в крови больного.

Вирус гепатита G: РНК-содержащий, имеет суперкапсидную оболочку. Гепатит G в большинстве случаев протекает как микст-инфекция с гепати-

том C.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Основной путь передачи: парентеральный.

Репродукция вируса происходит по типу продуктивной инфекции. Клиническое течение: заболевание протекает в острой (как правило, бес-

симптомно) или в хронической форме.

Микробиологическая диагностика.

1.ИФА: определение IgM и IgG к вирусу гепатита G в сыворотке больного.

2.ПЦР: выявление вирусной РНК в крови больного.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Изучение схемы вирусологического исследования фекалий больного энтеровирусной инфекцией.

Учет реакции нейтрализации в культуре клеток с типоспецифическими диагностическими сыворотками к вирусам Коксаки В

Заключение о типе вируса сделать самостоятельно.

26

Занятие № 3

Тема. Герпетическая инфекция. ВИЧ-инфекция. Характеристика вируса бешенства. Характеристика арбовирусов, вирусов клещевого энцефалита, геморрагических лихорадок. Вирусы папилломы человека. Вирусы группы оспы.

Цель занятия. Изучить характеристику герпетических вирусов, возбудителей ВИЧ-инфекции, вирусов бешенства, арбовирусов, клещевого энцефалита, геморрагических лихорадок, папилломавирусов, вирусов группы оспы. Изучить микробиологическую диагностику, специфическую профилактику и специфическое лечение вызываемых заболеваний.

I.Теоретические знания:

1.Общая характеристика представителей семейства Herpesviridae.

2.Характеристика вирусов простого герпеса, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

3.Характеристика Herpesvirus varicella-zoster, вызываемые заболевания.

4.Характеристика Herpesvirus cytomegalus, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика.

5.Характеристика вируса Эпштейна-Барр, вызываемые заболевания, диагностика.

6.Характеристика вируса иммунодефицита человека, пути заражения и контингенты риска.

7.Методы диагностики ВИЧ-инфекции. СПИД-ассоциированные заболевания.

8.Характеристика вируса бешенства, микробиологическая диагностика, ле- чебно-профилактическая иммунизация.

9.Общая характеристика арбовирусов. Роль отечественных исследователей в их изучении.

10.Вирусы весенне-летнего клещевого энцефалита, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика и специфическое лечение.

11.Геморрагические лихорадки, характеристика возбудителей, микробиологическая диагностика.

12.Характеристика вирусов папилломы человека, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика.

13.Вирусы группы оспы.

II.Практические навыки:

1.Световая микроскопия срезов слюнных желез в окраске гематоксилинэозином с целью обнаружения типичных гигантских клеток («совиный глаз») для посмертной диагностики цитомегаловирусной инфекции.

2.Световая микроскопия мазков-отпечатков из области гиппокампа человека в окраске по Селлерсу для посмертной диагностики бешенства.

27

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЗАНЯТИЮ

1. Общая характеристика представителей семейства Herpesviridae

Семейство Herpesviridae разделено на 3 подсемейства ( , и -virinae), которые включают 8 типов герпесвирусов человека (табл.3).

Герпесвирусы (греч. herpes – ползучий): ДНК-содержащие, имеют суперкапсидную оболочку.

Таблица 3

Герпес-вирусы человека, вызываемые заболевания

28

2. Характеристика вирусов простого герпеса, вызываемые заболевания, микробиологическая диагностика, специфическая профилактика

Вирусы простого герпеса (HSV) подразделяют на 2 антигенных типа:

HSV-1 и HSV-2.

Источник инфекции: больной человек или вирусоноситель.

Заражение HSV-1 происходит обычно в раннем возрасте (от 6 месяцев до 3 лет) контактным (через инфицированную слюну при поцелуях или попадании на кожу) и воздушно-капельным путями. Около 90% населения земного шара инфицированы HSV-1.

Патогенез: после проникновения в организм вирус размножается в клетках эпителия зон первичного инфицирования (слизистые оболочки ротовой полости и кожи), а затем через нервные окончания проникает в паравертебральные ганглии и ганглии тройничного нерва, где длительно (чаще пожизненно) персистирует в нейронах и находится в латентном состоянии.

Под действием активирующих факторов (УФ-излучение, лихорадка, переохлаждение, эмоциональный стресс, иммуносупрессия и др.) геном вируса мигрирует по аксону в эпителиальные клетки, латентная инфекция переходит в острую и сопровождается различными клиническими симптомами.

Клинические формы:

▪герпес кожи: пузырьковые высыпания на губах, крыльях носа, щеках, ягодицах и др.;

▪герпетический стоматит;

▪офтальмогерпес (кератит): при этой форме заболевания возможна необратимая потеря зрения вследствие развития язв роговицы с последующим рубцеванием;

▪энцефалит (редкая форма заболевания) с высокой летальностью.

Заражение HSV-2 происходит преимущественно половым путем.

Патогенез: HSV-2 из первичного очага поражения (слизистые половых путей) мигрирует в поясничные и крестцовые ганглии, где, подобно HSV-1, длительно персистирует и формирует латентную инфекцию. HSV-2 нередко ак-

29

тивируется под действием тех же факторов, что и HSV-1, а также при менструации, что приводит к манифестации инфекции.

Клинические формы:

▪генитальный герпес при половом пути заражения. Заболевание характеризуется пузырьково-язвенными высыпаниями на коже и слизистой оболочке половых органов, сильным зудом и болевым синдромом;

▪герпес новорожденных: тяжелая генерализованная инфекция, которая чаще проявляется в форме герпетической экземы или менингоэнцефалита. Инфицирование происходит во время родов (интранатально);

▪HSV-2 причастен к возникновению рака шейки матки и карциномы простаты.

Микробиологическая диагностика.

1.Экспресс-методы: РИФ и ИФА для определения вирусных антигенов в содержимом везикул, слюне и соскобах из области поражений.

2.ПЦР.

3.Серологический: ИФА, РИФ, РСК – для диагностики первичной инфекции.

4.Вирусологический: заражение культуры клеток или куриных эмбрионов исследуемым материалом;

Ввиду значительной инфицированности населения, обнаружение сывороточных антител не имеет существенной диагностической ценности.

Специфическая профилактика рецидивирующего герпеса осуществляется в период ремиссии многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины, содержащей HSV-1 и HSV-2.

3. Характеристика Herpesvirus varicella-zoster, вызываемые заболевания

Herpesvirus varicella-zoster (HVZV): ДНК-содержащий, имеет суперкап-

сидную оболочку.

30