Частная бактериология

552

14.4антитоксический

14.5стерильный

15.Минимальное количество микобактерий туберкулеза в 1 мл мокроты,

выявляемое прямой микроскопией (один правильный ответ): 15.1 более 109 15.2 не менее 105

15.3 5000-10000

15.4 20-100

15.5 1-10

16.Методы специфической профилактики туберкулеза (один правильный ответ): 16.1 экстренная профилактика антибиотиками 16.2 вакцинация 16.3 введение сыворотки

16.4 использование иммуноглобулина

16.5 флюорография

17.Для профилактики туберкулеза используют вакцину (один правильный ответ): 17.1 ТАВТе 17.2 СТИ 17.3 Гайского 17.4 БЦЖ 17.5 ВА№19

18.Вакцина БЦЖ была получена (один правильный ответ):

18.1Пирке

18.2Кальметтом и Гереном

18.3Манту

18.4Пастером

18.5Кохом

19.Вакцина БЦЖ представляет собой (один правильный ответ): 19.1 инактивированную вакцину 19.2 синтетическую вакцину 19.3 генно-инженерную вакцину

19.4 живую аттенуированную вакцину

19.5 химическую вакцину

20.Вакцина БЦЖ включает (один правильный ответ):

20.1инактивированные клетки

20.2живые клетки микобактерий бычьего типа

20.3живые клетки микобактерий человеческого типа

20.4продукты жизнедеятельности микобактерий

20.5живые микобактерии птичьего типа

21. Проба Манту используется для (один правильный ответ):

553

21.1определения эффективности терапии

21.2определения необходимости ревакцинации

21.3определения чувствительности к антибиотикам

21.4идентификации микобактерий

21.5определения титра специфических антител

22.PPD содержит (один правильный ответ): 22.1 убитые микобактерии бычьего типа 22.2 живые микобактерии бычьего типа

22.3 смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий человеческого и бычьего типов 22.4 лиофилизированные микобактерии человеческого типа

22.5 убитые микобактерии человеческого типа

23.Терапия туберкулеза предусматривает (несколько правильных ответов):

23.1проведение кратковременных курсов монотерапии

23.2длительное применение одного препарата

23.3одновременное применение нескольких препаратов

23.4длительное применение препаратов

23.5периодическое определение чувствительности выделяемых культур к антибиотикам.

Правильные ответы: 1.3; 2.1; 3.2; 4.3; 5.1, 5.4; 6.2, 6.3, 6.4; 7.4; 8.5; 9.3; 10.3; 11.2,

11.3; 12.1, 12.2, 12.4; 13.3; 14.3; 15.2; 16.2; 17.4; 18.2; 19.4; 20.2; 21.2; 22.3; 23.3, 23.4, 23.5.

554

8. Спирохеты

Спирохеты представляют собой извитые (штопороподобные) тонкие микроорганизмы (греч. spira - спираль, виток, chaite - волос). Спирохеты относятся к типу (филуму) Spirochaetes, классу Spirochaetia, порядку Spirochaetales. В состав этого порядка входят семейства Spirochaetaceae (рода Treponema и Spirochaeta), семейство Borreliaceae (род Borrelia) и семейство Leptospiraceae (род Leptospira). К

роду Treponema относится возбудитель сифилиса, к роду Borrelia – возбудители клещевых боррелиозов, к роду Leptospira - возбудитель лептоспироза.

Спирохеты по морфологическим и физиологическим признакам сильно отличаются от других микробов. Тело спирохет представлено цитоплазматическим (протоплазматическим) цилиндром, покрытым цитоплазматической мембраной и плотно прилегающей к ней клеточной стенкой, состоящей из пептидогликана (рисунок 8.1).

Фибриллы Внешняя Протоплазматический мембрана цилиндр

Внешняя мембрана

Фибрилла

Периплазматическое

пространство

Пептидогликан Цитоплазматическая мембрана

Рисунок 8.1 – Строение спирохет. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Цитоплазматический цилиндр штопорообразно навит на осевую (аксиальную) нить, состоящую из отдельных фибрилл. У разных видов спирохет разное количество фибрилл. Фибриллы состоят из белка флагеллина и являются двигательным аппаратом спирохет. Однако фибриллы спирохет имеют особенность. Они не выходят за пределы клетки. Один конец каждой фибриллы прикреплен к специальным тельцам (блефаропластам), расположенным на полюсах цилиндра, а другой конец фибрилл остается свободным. Из обоих концов клетки выходит одинаковое количество фибрилл. Общее число фибрилл на клетку варьирует от 2 до 100 и более в зависимости от вида спирохет. Фибриллы обеспечивают спирохетам 3 типа движения:

-поступательное движение (волнообразное или змеевидное перемещение);

-вращательной движение (вращение вокруг продольной оси);

-сгибательное движение (маятникообразное).

555

Снаружи цитоплазматический цилиндр и фибриллы покрыты тонкой и эластичной внешней мембраной, которая напоминает внешнюю мембрану грамотрицательных бактерий, но не содержит ЛПС.

По Граму спирохеты окрашиваются отрицательно, но плохо воспринимают анилиновые красители. Дифференциальным методом окраски является метод Романовского-Гимзы: при этом спирохеты окрашиваются в фиолетово-красный цвет.

Спирохеты малоустойчивы во внешней среде.

8.1. Трепонемы

Род трепонем включает несколько видов. Среди трепонем имеются непатогенные представители нормального микробиоценоза ротовой полости

(T.denticola, T. macrodenticum), условно-патогенные виды (T. vincentii – возбудитель язвенно-плёнчатой некротической ангины Симановского-Плаута-Венсана в ассоциации с фузобактериями) и патогенные виды (T. pallidum – возбудитель сифилиса).

Сифилис (syphilis, lues, французская болезнь, итальянская болезнь, немецкая болезнь, любовная чума) - хроническое инфекционное заболевание человека, характеризующееся первичным аффектом с поражением слизистых оболочек и кожи в месте входных ворот инфекции, с последующими полиорганными поражениями (вовлечением в процесс внутренних органов, костей, нервной системы) и прогредиентным течением (периоды активных проявлений чередуются с периодами латентности).

В России заболеваемость сифилисом остается на высоком уровне. Так, в 1991 г. заболеваемость сифилисом составляла 7,1 случая на 100 тысяч населения, в 1998 г. – 277,2 случая на 100 тысяч населения, в 2009 г. – 53,3 случая на 100 тысяч населения, в 2010 г. – 49,9 случая на 100 тысяч населения, в 2011 г. – 37,9 случая на 100 тысяч населения.

Историческая справка. Первое описание сифилиса представлено в поэме Д.

Фракасторо “Сифилис, или о галльской болезни”, вышедшей в 1530 г. (рисунок 8.2).

Джироламо Фракасторо

Рисунок 8.2 – Джироламо Фракасторо (Girolamo Fracastoro, 1478–1553 гг.) и его поэма о сифилисе. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

556

Он описал в стихотворной форме заболевание у пастуха по имени Сифилус, который разгневал богов Олимпа и был наказан ужасной болезнью. Все тело Сифилуса было поражено сыпью, бубонами и язвами.

Существует 3 основных гипотезы происхождения сифилиса: американская, европейская и африканская. Согласно американской гипотезе, в Европу сифилис занесли матросы с кораблей Колумба от аборигенов острова Гаити. К 1500 г. сифилис распространился уже по всей Европе, Северной Африке, Турции, Китаю и Индии. Доказательством этой гипотезы является установление родственной генетической связи возбудителя сифилиса с южноамериканскими трепонемами.

Согласно европейской гипотезе, описания клинических симптомов, напоминающих поражения при сифилисе, встречаются в работах Гиппократа, Галена, Авиценны и других ученых. В подтверждение этой гипотезы приводятся характерные для сифилиса поражений костей древних людей, проживавших в Европе.

Согласно африканской гипотезе, возбудители сифилиса, фрамбезии, пинты и беджеля (эндемического сифилиса) произошли от единого предка в период раннего неолита. Из Африки сифилис в последующем распространился в результате войн, вывоза рабов, торговых связей.

В России первые случаи сифилиса были отмечены в 1499 г. В 1763 г. в Санкт-Петербурге была открыта специализированная больница, первым заведующим которой был Д.С. Самойлович. В 1869 г. при Медико-хирургической академии в Санкт-Петербурге впервые открылись кафедры дерматологии и сифилидологии, что позволило повысить качество медицинской помощи населению.

Возбудитель сифилиса был открыт 3 марта 1905 г. немецкими учеными Ф.

Шаудинном и Э. ХоффманномШаудин(рису ок 8.3).

Фритц , Эрих Хоффманн, 1905 г.

А Б

Рисунок 8.3 – А - Фритц Шаудинн (Fritz Schaudinn, 1871–1906 гг.); Б – Эрих Хоффманн (Erich Hoffmann, 1868-1959 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Известно, что протозоолог Ф. Шаудин обнаружил возбудителя в поле зрения микроскопа в неокрашенных мазках, приготовленных венерологом Э. Хоффманном из папулы больной сифилисом женщины.

В 1906 г. немецкий ученый А. Вассерманн (рисунок 8.4) совместно с А. Нейссером и К. Бруком предложил серологическую реакцию для диагностики сифилиса (реакцию Вассерманна).

557

Рисунок 8.4 – Август Пауль фон Вассерманн (August Paul von Wassermann, 18661925 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

В1949 г. американские иммунологи Р.А. Нельсон (R.A. Nelson) и М.М. Майер (M.M. Mayer) предложили серологическую реакцию иммобилизации трепонем (РИБТ – реакция иммобилизации бледных трепонем, Nelson-Mayer test, TPI – Treponema pallidum immobilization test). В основе реакции лежит способность сыворотки крови больных сифилисом обездвиживать бледные трепонемы (сыворотка крови здоровых людей этой способностью не обладает). Эта реакция дает положительные результаты при всех трепанематозах, поэтому непригодна для дифференциальной диагностики заболеваний, вызванных разными трепонемами.

В1909 г. немецкий врач основатель химиотерапии П. Эрлих (рисунок 8.5) предложил для лечения сифилиса первый противосифилитический препарат сальварсан (препарат “606”, “спасительный мышьяк”), а в 1912 г. – неосальварсан (препарат “914”).

Рисунок 8.5 – Пауль Эрлих (Paul Ehrlich, 1854-1915 гг.). Заимствовано из Интернетресурсов.

После открытия антибиотиков началась новая эра в лечении сифилиса. До настоящего времени антибиотикотерапия является наиболее эффективным методом лечения сифилиса.

Таксономическое положение. Возбудитель сифилиса (Treponema pallidum)

относится к роду Treponema, семейству Spirochaetaceae, порядку Spirochaetales,

558

классу Spirochaetia, типу (филуму) Spirochaetes. Род Treponema включает патогенный для человека вид T. pallidum с 4 подвидами: T. pallidum pallidum – возбудитель сифилиса, T. pallidum endemicum – возбудитель беджеля (эндемического сифилиса, невенерического сифилиса детского возраста), T. pallidum pertenue – возбудитель фрамбезии (тропической гранулемы, невенерического сифилиса) и T. carateum – возбудитель пинты (карате).

Морфологические и тинкториальные свойства. Трепонемы (греч. trepo –

вращаться, nema – нить) представляют собой тонкие спиралевидные длинные микроорганизмы, имеющие 8-12 завитков. Длина клеток составляет 8-20 мкм, диаметр 0,25-0,35 мкм. Завитки расположены на равном расстоянии друг от друга (рисунок 8.6).

Рисунок 8.6 – Трепонема, сканирующая электронная микроскопия. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Трепонемы подвижны, их движения плавные, что является важным дифференциально-диагностическим признаком.

Геном T. pallidum представлен кольцевой двухцепочечной молекулой ДНК. Тело трепонем имеет характерную для спирохет форму и представляет собой

цитоплазматический цилиндр, покрытый цитоплазматической мембраной и плотно прилегающим к ней слоем пептидогликана. Цитоплазматический цилиндр содержит цитоплазму, нуклеоид, рибосомы и мезосомы. Цилиндр штопорообразно навит на осевую (аксиальную) нить, состоящую из сплетения фибрилл. Один конец каждой фибриллы прикреплен к блефаропластам, расположенным на полюсах цилиндра и укрепленным в цитоплазматической мембране (рисунок 8.7).

ч

б

ф

б – блефаропласт

Рисунок 8.7 – Электроннаяч – чехолфотография T. pallidum: б – блефаропласт; ф –

ф - фибриллы

фибриллы; ч – чехол (Мотавкина Н.С., Артемкин В.Д., 1976).

559

Другой конец фибрилл остается свободным и заканчивается на противоположном конце цилиндра. Из обоих концов клетки выходит одинаковое количество фибрилл. У разных видов трепонем имеется по 3-10 фибрилл с каждой стороны, у T. pallidum с каждого конца отходит по 3 фибриллы. Таким образом, жгутики спирохет располагаются внутриклеточно. Схема строения трепонем представлена на рисунке 8.8.

Внешняя мембрана

Фибриллы

Периплазматическое

пространство

Пептидогликан

Нуклеоид

Цитоплазматическая

мембрана

Рисунок 8.8 – Схема строения трепонем (поперечный разрез).

Бледная трепонема не образует спор и капсул. Однако в организме человека и некоторых экспериментальных животных возбудитель может синтезировать бесструктурное слизеобразное (капсулоподобное) вещество (чехол) мукополисахаридной природы.

Цикл развития бледной трепонемы составляет 30-33 часа. Размножение трепонем происходит путем поперечного деления (рисунок 8.9).

ч

ф

ф

Рисунок 8.9 – Поперечное деление трепонем: ч – капсулоподобный чехол; ф –

Делящиеся трепонемы

фибриллы. Видна поперечная перетяжка (Мотавкина Н.С., Артемкин В.Д., 1976).

ч - чехол ф - фибриллы

Фибриллы обеспечивают спирохетам различные виды движения. В отличие от сапрофитных трепонем для возбудителя сифилиса характерны следующие виды движений:

-поступательное движение;

-вращательное движение (вращение вокруг продольной оси);

560

-сгибательное движение (маятникообразное);

-волнообразное (контрактильное).

По Граму трепонемы окрашиваются в розовый цвет (грамотрицательные), но очень слабо. Дифференциальным методом окраски является метод РомановскогоГимзы, при котором трепонемы окрашиваются в бледно-розовый цвет, в результате чего трепонемы называют “бледной спирохетой или бледной трепонемой” (рисунок

8.10).

Рисунок 8.10 – Возбудитель сифилиса, окраска по методу Романовского-Гимзы. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Для окраски трепонем применяют также метод протравливания, метод импрегнации серебром по Морозову, метод флюоресцирующих антител (РИФ). Для визуализации трепонем в неокрашенном живом состоянии применяют метод

А Б В

Рисунок 8.11 – Микроскопическая картина T. pallidum: А – серебрение по Морозову (Мотавкина Н.С., Артемкин В.Д., 1976); Б – РИФ; В – темнопольная микроскопия.

Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При неблагоприятных условиях спирохеты способны формировать цисты покоя и L-формы. Образование цист происходит путем сворачивания нескольких трепонем в клубок, который покрывается общей муциноподобной оболочкой, защищающей бактерии от действия неблагоприятных факторов, в том числе лекарственных средств. В виде цист трепонемы могут существовать длительное время, не оказывая на организм патогенного влияния. Формирование цист обусловливает резистентность некоторых больных к противосифилитической