- •Санмед теория
- •1. Предмет, цели и задачи санитарной микробиологии. История развития санитарной и медицинской микробиологии
- •2. Значение проведения мониторинга состояния окружающей среды для предотвращения распространения инфекционных заболеваний
- •3. Методы оценки микробиологического загрязнения среды патогенами
- •4. Понятие о санитарно-показательных микроорганизмах
- •5. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы кишечной палочки)
- •6. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (анаэробные споровые сульфатредуцирующие бактерии)
- •7. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы протея)
- •8. Группы санитарно-показательных микроорганизмов (стрептококки и стафилококки)
- •9. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы кишечной палочки)
- •10. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (анаэробные споровые сульфатредуцирующие бактерии)
- •11. Методы выявления санитарно-показательных микроорганизмов (бактерии группы протея)
- •12.Методы определения санитарно-показательных микроорганизмов (стрептококки и стафилококки)
- •13. Количественные показатели санитарного состояния среды: микробное число, титр, индекс
- •14. Микрофлора воздуха
- •15. Особенности санитарно-микробиологических исследований воздуха в закрытых помещениях, в больших городах, на предприятиях пищевой и микробиологической промышленности
- •16. Методы отбора проб воздуха и используемые для этого приборы
- •17. Методы определения микробного загрязнения воздуха
- •18. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха
- •19. Определение общей численности сапрофитных микроорганизмов
- •20. Обнаружение стафилококков в воздухе закрытых помещений. Определение стрептококков и способы их идентификации
- •21. Определение патогенных микроорганизмов в воздухе
- •22. Значение санитарного состояния воздушной среды помещений в передаче инфекций
- •23. Вода как источник инфекционных заболеваний
- •24. Цели и задачи санитарно-микробиологического исследования воды
- •25. Биологические и микробиологические методы обследования микрофлоры воды
- •26. Контроль качества питьевой воды
- •27. Методы отбора проб воды для бактериологического исследования
- •28. Санитарно-показательные микроорганизмы воды
- •29. Методы индикации патогенных микроорганизмов
- •30. Определение числа сапрофитной микрофлоры воды
- •31. Определение числа бактерий группы кишечных палочек, бактериофагов в воде
- •32. Комплексная санитарно-микробиологическая оценка качества воды с учетом органолептических, гельминтологических и химических данных
- •33. Регламентирующая документация для комплексной санитарно-микробиологической оценки качества воды (госТы, санитарные правила и методические указания и др.)
- •34. Критерии безусловного показателя загрязненности воды и ее непригодности для любых целей
- •35. Биологическое загрязнение почв
- •36. Микрофлора почвы
- •37. Причины загрязнения почв
- •38. Распределение микроорганизмов в почве
- •39. Санитарно-микробиологический контроль почв, его цель, задачи
- •40. Методы санитарно-микробиологического контроля почв
- •41. Методы отбора проб почвы для микробиологического анализа, способы их транспортировки и хранения
- •42. Подготовка проб почвы для микробиологического анализа
- •43. Определение бгкп – титрационный метод, метод мембранных фильтров
- •44. Использование сред накопления при санитарно-микробиологическом исследовании почв
- •45. Посев на плотные питательные среды
- •46. Метод прямой микроскопии, подсчет микроорганизмов
- •47. Определение общего числа сапрофитных бактерий в образце исследуемой почвы
- •48. Определение термофильных, нитрифицирующих бактерий и их значение при оценке состояния почв
- •51. Характеристика спорообразующих патогенных микроорганизмов, постоянно обитающих в почве
- •52. Характеристика групп патогенных микроорганизмов, попадающих в почву с выделениями человека и животных
- •53. Способы обнаружения в почве сальмонелл
- •54. Способы обнаружения в почве шигелл
- •55. Способы обнаружения в почве клостридий столбняка и ботулизма
- •56. Перфрингенс-титр как важнейший критерий для санитарной оценки почвы и ее самоочищения
- •57. Методы определения перфрингенс-титра
- •58. Особенности микробной обсемененности пищевых продуктов
- •59. Специфическая микрофлора пищевых продуктов как обязательное звено в технологии их приготовления (Lactococcus lactis, Lactococcus bulgaricus, Lactococcus acidophilus)
- •60. Неспецифическая микрофлора пищевых продуктов – микробы сапрофиты, условно-патогенные
- •61. Неспецифическая микрофлора пищевых продуктов – патогенные микроорганизмы
- •62. Микроорганизмы, вызывающие порчу пищевых продуктов
- •63. Заболевания передающиеся через пищевые продукты: пищевые инфекции
- •64. Заболевания передающиеся через пищевые продукты: пищевые отравления
- •65. Лабораторная диагностика пищевых бактериальных отравлений
- •66. Значение микробиологического анализа для выяснения причин пищевых токсикоинфекций
- •67. Соблюдение санитарно-гигиенических норм и правил на всех стадиях производства
- •68. Санитарно-гигиенический контроль за производством как неотъемлемая составляющая в предотвращении пищевых инфекций и отравлений
54. Способы обнаружения в почве шигелл
Ответ. Загрязнение почвы сальмонеллами происходит в результате непосредственного попадания фекалий, преимущественно животных, в меньшей степени — человека. Практически у всех домашних и многих диких животных сальмонеллы обнаружены как комменсалы и как возбудители острых сальмонеллезов. Шигеллы попадают в почву с испражнениями человека. Для определения сальмонелл в почве могут быть использованы два метода: посев в среду накопления и метод коагуляции с последующим высевом на дифференциально-диагностические среды. Первый метод более простой: для обнаружения сальмонелл в подготовленную почвенную суспензию вносят ингредиенты магниевой среды «М» (из расчета объема суспензии), инкубируют при температуре 37°С в течение 18-20ч. Затем делают высев на висмут-сульфитную среду (обычно 3-5 чашек). Идентификация выросших колоний проводится по методике определения сальмонелл. Шигеллы обнаруживают параллельно — посевом в селенитовую среду. При выделении сальмонелл из почвы методом коагуляции и центрифугирования по Фикеру к 500 мл почвенной суспензии добавляют 1,7 мл 10%-ного стерильного раствора сульфата железа и 2 мл 10%-ного стерильного раствора бикарбоната натрия (для подщелачивания, которое способствует коагуляции). Суспензию тщательно взбалтывают и ставят в холодильник на 1 ч для образования хлопьев, прозрачную жидкость сливают, а осадок и надосадочную жидкость с хлопьями переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования жидкость над осадком сливают, а осадок обрабатывают 1 мл 25%-ного раствора виннокислого калия (добавляя по каплям до полного растворения осадка) и делают высев на чашки с висмут- сульфитным агаром и средой Плоскирева. Параллельно оставшийся осадок заливают желчным бульоном. Посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Для выявления сальмонелл из желчного бульона через 5 и 20 ч делают высев на дифференциально-диагностические среды. Дальнейшая идентификация сальмонелл и шигелл ведется по обычной схеме. Для обнаружения сальмонелл и шигелл можно непосредственно исходную почвенную суспензию фильтровать через мембранные фильтры, затем их переносят на дифференциально-диагностические среды для подращивания.
55. Способы обнаружения в почве клостридий столбняка и ботулизма
Ответ. Cl. tetani. Исследуемый материал растирают в ступке со стерильным песком. Из подготовленного материала готовят мазки, красят по Граму. Обнаружение тонких, длинных грамположительных палочек позволяет поставить ориентировочный диагноз и проводить бактериологическое исследование. Часть исследуемого материала засевают в жидкие среды и на чашки с кровяным агаром. Посевы проводят в двойное число пробирок, один набор прогревают при 80 градусах 20 минут. Посевы инкубируют в анаэростате при 37 °. Через 2, 4, 6 и 10 дней пробирки просматривают, из культуры готовят мазки. При обнаружении типичных микробов делают высев на чашки с кровяным агаром для выделения чистой культуры. На поверхности кровяного агара столбнячные палочки образуют нежные прозрачные колонии, похожие на капельки росы, с зоной гемолиза. Колонии быстро разрастаются и образуют нежную сетчатую пленку, покрывающую всю чашку и плохо видимую невооруженным глазом. Культуру и колонии микроскопируют. При обнаружении бактерий, морфологически похожих на столбнячные, часть колонии пересевают на жидкую среду, изучая способность ее вырабатывать экзотоксин. Присутствие токсина в культуральной жидкости определяют в реакции нейтрализации на мышах или в РНГА. Cl. Botulinum. В поле зрения видны крупные полиморфные грамположительные палочки с овальными спорами, расположенными субтерминально. Диаметр спор превышает диаметр палочек, поэтому палочка со спорой имеет вид теннисной ракетки. Для выделения чистой культуры палочек ботулизма часть материала засевают в пробирки или флаконы в большой объем жидкой питательной среды (чтобы хватило на все исследования): бульон Хоттингера с 0,5% глюкозой или казеиново-грибную среду. Для регенерации кислорода среды перед посевом кипятят. После посева часть пробирок или флаконов прогревают при 60 и 80 градусах для уничтожения аэробной флоры. После этого все флаконы помещают в анаэростат: непрогретый и прогретый при 60 градусах инкубируют при 28 градусах для обнаружения Cl.botulinum типа E, F, непрогретый и прогретый при 80 градусах инкубируют при 35 градусах для обнаружения Cl.botulinum типов А, В и С. Через 48 часов посевы исследуют на наличие возбудителей ботулизма. Обращают внимание на интенсивность газообразования. Из культур готовят мазки, красят их по Граму и микроскопируют. При обнаружении микробов, сходных по морфологии с Cl.botulinum, в культуральной жидкости определяют наличие токсина в реакции нейтрализации, сначала с поливалентной сывороткой. При положительном результате реакцию повторяют с каждой сывороткой в отдельности. Для выделения чистой культуры из исследуемого материала его засевают или в высокий столбик сахарного агара, или на чашки с кровяно-сахарным агаром. Инкубируют в анаэростате при 35–37 градусах в полном вакууме. Через сутки на кровяном агаре вырастают прозрачные, в виде росинок, дымчатые колонии, окруженные зоной гемолиза. В столбике агара вырастают колонии в виде комочков ваты, пушинок или правильных дисков. Подозрительные колонии отсевают на сахарный бульон, выросшие культуры изучают в мазках, окрашенных по Граму, на способность ферментировать углеводы и белки, определяют токсигенность в реакции нейтрализации.