Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

otvety_na_bilety_po_ekz

.pdf
Скачиваний:
15
Добавлен:
12.02.2015
Размер:
216.31 Кб
Скачать

Билет 1

Билет 2

Антибиотики. Определение. Классификация по спектру и

Антитела— спецефические глобулиновые фракции образующиеся в

антимикробному действию. Примеры антибиотиков

ответ на введение в организм Аг и обладающие способностью

 

спецефически взаимодействовать с ними.

Антибиотики — это химиотерапевтические средства био.

IgG — самые многочисленные (75%). Легко проникают в ткани,

происхождения, их полусинтетические и синтетические производные поэтому могут нах-ся как в сосудистом русле, так и в тк. Могут

и аналоги, избирательно подавляющие жизнеспособность м/орг или

проходить через плаценту. Основные ф-ции: активация фагоцитоза,

рост злокачественных опухолей.

комплемента, NK-клеток; нейтрализация патогенов; ктивирует

Уникальное св-во антибиотика — мишень рецептор нах-ся не в

комплемент по классическому пути. IgG является основным Ig

организме, а в самой кл-ке м/орг. Существенный недостаток —

вторичного иммуного ответа.

непостоянство их эффективности, у м/орг со временем формируется

IgM — практически не проникает в ткани, содержится в кров русле.

резистентность к препаратам.

Функции: нейтрализация патогенов в сосуд русле и активация

Продуцируют а/б некоторые истинные бактерии (Bacillus), грибы

системы комплемента. Может служить антигенраспознающим

(Penicillinum), но чаще всего актиномицеты (Actinomyces,

рецептором В-лимф. Главный Ig первичного иммунного ответа.

Streptomyces, Micromonosporum).

IgА — существует в 2 формах: мономер в сыв крови и димер в

По типу действия на клеточные мишени м/орг. различают

секрете слизистых. Синтезируется плазматическими клетками

микробостатические и микробоцидные антибиотики.

слизистых оболочек. IgА в слизистых оболочках выполнает

Микробостатические ингибируют рост и размножение клеток, но при защитную функцию — местный иммунитет.

удалении а/б жизнидеятельность микробных клеток

IgЕ — фиксирован на поверхности тучных клеток, обнаружен в

восстанавливается. При лечении такими а/б защ силы организма

сыворотке крови и в слизистых обллочках. Функция — развитие

должны сами справиться с ослабленными м/орг.

аллергической реакции.

Микробоцидные а/б необратимо связ с клет мишенями, вызывая

 

гибель чувств к ним м/орг.

Микрофлора человека. Ее роль в норме и патологии

По молекулярному мех действия на м/орг: 1)ингибиторы синтеза

 

клеточной стенки (в-лактамные а/б, пенницилины, цефалоспорины)

Нормальная м/флора — это совокупность м/орг на коже и слизистых,

связ с активным центром фермента транспептидазы, осущ процесс

которые сообщаются с внешней средой. М\флора разделяется на

образования пептидных мостиков между гликановыми цепями

индигенную и транзиторную. Облигатные представители индигенной

пептидогликана, что ведет к нарушению синтеза клет стенки.

м/флоры постоянно присутствуют в орг-ме в большом кол-ве.

2)Нарушающие молекул стурктуру и ф-ц ЦПМ — а/б, связываются с

Облигатная м/флора играет первостепенную роль в метаболизме и

фосфолипидами ЦПМ и вызывают ее повреждение и гибуль клетки.

защите от инфекции организма хозяина. Факультативные

3) Ингибиторы синтеза белка: аминогликозиды(связ с 30S рибосомой, представители индигенной м/флоры достаточно часто встречаются,

что приводит к нарушению связ тРНК с рибосомой),

но их количественный состав непостоянен и меняется. Транзиторная

тетрациклины( связ с 30S и блокир начал этапы синтез белка),

м/флора постоянно попадает из внешней среды или из другого

макролиды(связ с 50S рибосомой и необратимо ингибируют проц

биотопа, но в норме сравнительно быстро элиминируется. Условно-

элонгации), линезолид (необрат связ с 30S и 50S рибосом, что

патогенные м/орг попав в несвойственный ему биотоп могут вызвать

приводит к нарушению образования 70S рибосомы и формир

эндогенную оппортунистическую инфекцию. Микрофлора играет

полипептидных цепей) 4)ингибиторы синтеза НК (разделяются на а/б очень важную роль в поддержании его здоровья на оптимальном

нарушающие синтез РНК(рифампицин) и ДНК(хинолоны)).

уровне. Функции: 1)регуляция газового состава 2)продукция

Существуют а/ с антибактериальной, антигрибковой и

ферментов, участвующих в метаболизме белков, углеводов, липидов,

антипротозойной активностью, которые в настоящее время

что способствует пищеварению 3)участвуют в водно-солевом обмене,

подразделяют по спектору антимикробного действия на:

поддержании рН и редокс-потенциала 4) участие в рециркуляции

1)действующие на Грам+ бактерии и Грам+ и Грампатогенные кокки желчных кислот, стероидов 5)детоксикация эндогенных и экзогенных (н-р бензилпенницилин, цефалоспорин 1 поколения) 2)а/б с субстратов и метаболитов, преимущественно за счет гибролитических преимущественной активностью по отношению к Грампалочкам (н- и восстановительных реаций 6) продукция биол актив соединений 6)

р цефалоспорины 3 поколения); 3)а/б широкого спектора действия,

иммуногенная роль 7) синтез вещ с антимикробной активностью 8)

активные по отношению к Грам+ и Грамбактериям (н-р

морфокинетическое действие — оказывает влияние на структуру

полусинтетические пенницилины с широким спектором действия,

слизистых оболочек, поддерживает морфологическое состояние

цефалоспорины 2 пооколения) 4)противотуберкулезные а/б

эпителиальных клеток и желез 8)мутагенная и антимутагенная

(стрептомицин, флоримицин) 5) противогрибковые а/б (нистатин,

активность 9)создание колонизационной резистентности

леворин и др)

 

Серологическая р-ц, применяемая в инфекционных исследования

 

РИФ. Ингредиенты и мех-мы. Применение. Значение экспресс-

 

диагностики инфекционных заболеваний.

 

РИФ — р-ц иммунофлуоресценции. Основана на использовании иммунных сывороток, меченных флюорохромными красителями. Обрабатывают мазки, в которых Аг и изучают в микроскоп в УФ свете. Аг(мазок) + Ат сыворотка) + свечение (краситель).

РИФ дает возможность быстро сочетать морфологические и серологические исследования и обнаружить Аг в зараженных клетках и тканях. Люминисцирующие сыворотки содержат глобулиновую фракцию — Ат (обычно получаемых от сывороток кроликов), которая конъюгирована с флюорохромных красителем (чаще всего это ФИТЦ дающее ярко-зеленое свечение).

Применяют как прямую так и непрямую РИФ. При прямом методе Аг + фиксатор+ спец люминистцирующая сыворотка (для каждого возб своя) + инкубация +микроскопия — ярко зеленое свечение говорит о образовании имунных комплексов При непрямом методе Аг + спецефическая иммунная сыворотка

кролика + инкубация + люминисцирующая антиглобулиновая сыворотка (меченная флюорохромным красителем) против глобулинов кролика (против Ат) + инкубация + микроскопия — зеленое свечение указывает на наличие Ат соответствующего Аг

Билет 5

Билет 6

Свойства вирусов. Репродукция. Особенности репродукции РНК+ и

Плазмиды.

РНКвирусов

Плазмиды — это внехромосомные наследственные элементы. Это

 

Вирусы — неклеточные формы жизни, обладающие собственным

небольшие молекулы ДНК кольцевидной, реже линейной формы. Они

геномом, способностью к воспроизведению в клетках орг-в или

свободно располагаются в цитоплазме и реплицируются автономно,

клеточных культурах, адаптационными св-ми и изменчивостью

некоторые способны интегрировать в бактериальную хромосому и

Вирусы значительно отличаются от всех других м/орг и их выделяют

реплицироваться вместе с ней. Они представляют собой двунитевую

в отдельное царство Vira. У них отсутствует клеточная организация,

суперспиралезированную молекулу ДНК. Не являются

содержат только одну из двух нуклеиновых кислот (ДНК/РНК), не

жизнеспособными структурами, инициируют появление у бактерий

имеют собственных белок синтезирующих и генерирующих энергию

новых свойств, способствующих их выживанию в условиях внешней

систем и являются абсолютными внутриклеточными паразитами на

среды, повышают вирулентвность. Плазмиды имеют собственный

генетическом уровне, репродукируются в чувств клетке согласно

геном, содержащий следующие гены: 1) гены, контролирующие само

генетичнской прогармме заложенной в геноме используя

репликацию, число копий в одной клетке и явление несовместимости

биосинтетические системы и ресурсы клетки. Различают две формы

(близкородственные плазмиды не могут сосуществовать в одной

сущ-ния вируса: внеклеточный вирион, которая не проявляет

бактериальной клетке и одна из них удаляется) 2) гены,

жизнидеятельность и внутриклеточный вегетативный вирус, который

контролирующие само перенос или мобилизацию на перенос 3) гены,

репродуцируется в инфицированной клетке, вызывая продуктивную

наделяющие клеткухозяин многими дополнительными свойствами.

инфекцию. Вирусы бываю простые и сложные. Простые содержат

Обладают 2 функциями: регуляторной (восстанавливают утраченные

только НК и белки, в составе сложных могут быть липиды и

клеточным геномом функции, н-р в рез-те мутации) и кодирующая,

углеводы. Этапы репродукции вирусов: адсорбция вирионов на

которая заключается в том, что бактериальная клетка после

клетке, проникновение вируса внутрь клетки, депротеинизация

проникновения в нее плазмиды получает дополнительную

вириона и освобождение его НК, экспрессия вирусного генома и

инфлормацию, в зависимости от которой плазмиды подразделяются

синтез компонентов вириона (транскрипция, трансляция,

на: F-плазмиды (половые), придающие бактериальным клеткам

репликация), формирование вирионов, выход нового поколения из

дополнительные ф-ции, и R-плазмиды, обеспечивающие бактерии

клетки. Особенности репродукции +РНК: +РНК выполняет функцию

множественной лекарственной резистентности, Col-плазмиды

иРНК, поступает на полирибосомы и полностью транслируется с

кодируют синтез бактериоцинов (спец белки подавляющие

образование гиганского полипептида-предшественника, который

жизнидеятельность других штаммов того же вида или родственных

нарезается протеазами на отдельные белки — структурные и

видов), плазмиды патогенности, скрытые плазмиды, которые

неструктурные. Особенности репродукции -РНК: Транскрипция

фенотипически не проявляются.

осуществляется собственными транскриптазами вирусов, при этом

Распространяются плазмиды и по вертикали и по горизонтали.

возможно образование как коротких, так и длинных иРНК(+РНК) с

Классификация плазмид основана на их несовместимости. По

последующей трансляцией индивидуальных зрелых белков или

совместимости плазмиды объединяются в Inc-группы, группы

полипептида-предшественника,а также дочерних -РНК.

обладают общ свойствами.

 

Транспозоны — это участки ДНК, содержащие как гены,

Бактериальные токсины. Классификация, основные свойства.

обеспечивающие их перемещение, так и дополнительные

 

структурные гены, кодирующие антибиотикорезистентность,

Токсины — продукты метаболизма бактерий или структуры их

устойчивость к тяжелым металлам и др признаки.

клеточной стенки, которые в очень малых дозах повреждают клетки и

 

ткани макроорганизма. Являются наиболее важным фактором

Инфекционные процессы. Стадии. Условия возникновения.

патогенности. Подразделяются на белковые токсины и эндотокисны.

 

Белковые токсины: 1) по степени связи с бактериальной клеткой

Инфекционный процесс — это историчсеки сложившееся

разделяют на класс А( секретируемые во внешную среду, н-р

взаимодействие восприимчивого макроорганизма (человека) и

дифтерийный токсин) класс В (частично секретируемые во внеш ср,

патогенного (или условно-патогенного) микроорганизма в

н-р ботулинический токсин и столбнячный тетаноспазмин) класс С

определенных условиях внешней и социальной среды.

(несекретируемый, освобождается только в случае гибели клетки н-р

Взаимодействие инфекционного агента и макроорганизма не всегда

шига-токсин, шигаподобные токисны)

приводит к инфекционному процессу. Инфекционная болезнь

2) в зависимости от молекулярного строения различают простые

является крайней степенью развития инфекционного процесса.

токсины( вырабатываются в виде неактивных протоксинов,

Условия возникновения инфекционного процесса: 1) микроорганизм

активируются в рез-те мягкого протеолиза, образуется

должен обладать способностью проникать через входные ворота

бифункциональная АВ система, где фрагмент А обладает

инфекции, адгезировать и колонизировать чувствительные клетки и,

токсическим действием, а фрагмент В осуществляет транспорт

как правило, проникать во внутреннюю среду. Размножившись в

фрагмента А) и сложные токсины( состоят из фрагмента А, который в

достаточном кол-ве вызывать патологические реакции своими

свою очередь состоит из А1 (токсическое действие) и

продуктами метаболизма, особенно токсинами. Попавшие в организм

А2(способствует проникновению А1 внутри клетки), и фрагмента В,

м/орг должны быть не ниже инфицированной дозы.

осуществляющий транспорт, фрагмента А). 3) по мех-му действия

2)восприимчивость макроорганизма, которое зависит от защитных

разделяются на токсины, ингибирующие синтез белка —

мех-в организма — факторов врожденного и адаптивного

цитотоксины, повреждающие КС — мембранотоксины, нарушающие

иммунитета. Если иммунитет хороший, то инф процесс может не

передачу сигналов — функциональные блокаторы, токсины-протеазы

развиться или ограничиться бессимптомным микробоносительством

— функциональные блокаторы, токсины-суперантигены.

ии абортивной инфекцией. 3) условия окружающей среды (вкл

Эндотоксины — сложный липополисахаридный комплекс наружной

социальные) влияют на развитие инф проц опосредованно, оказывая

мембраны КС Gramбактерий. Выделяются в случае гибели клетки.

различные воздействия на макро- и микроорганизм, тем самым

ЛПС состоит из 3 частей: липид А (гликозамин, фосф к-та и жирн к-

способствуя или препятствуя возникновению, развитию и

та) — это область биологичсекой активности ЛПС, сердцевина

распространению инфекции. Фазы инфекционного процесса: адгезия,

(олигосахар), О-Аг (повторяющиеся олигосахаридные звенья) —

колонизация, инвазия, агрессия. Периоды инф заболевания:

представляет антигенную специфичность и могут значительно

инкубационный, продромальный, разгар заболевания, период

отличаться у различных видов и сероваров. Эндотоксин способствует выздоравливания. нарушению ССС, развитию энцефалопатии и поражению ПНС, изменению ф-ц эндокринной системы, токсическому поражению печени, почек и др органов.

Билет 4

Билет 34

Основные методы исследования морфологии м/орг

Ферменты патогенности: 1)Гиалуронидаза (деполимеризирует

1)микроскопический: а)микроскопия в затемненном поле зрения

гиалуроновую кислоту, которая является основным компонентом соед

(изображение недостаточно контрастно, метод заключается в

тк, содержится в клеточных мембранах и межклеточном вещ.

уменьшении интенсивности освещения препарата, методо позволяет

Гиалуронидаза повышает проницаемость этих структур для м/орг)

увидеть движение бактерий, микроскопировать грибы и простейших)

2)Нейроминидаза (гидролизирует гликозидные св в олигосахаридах,

б) темнопольная микроскопия (сонвоана на освещении препарата

гликопротеидах, ганглиозида, отщепляя от этих молекул остатки

лучами, идущими в косом направлении и не попадающими в

сиаловых к-т, которые входят в состав муцина и поверх мембранах к-

объектив, что делает поле зрения темным; в объектив попадают

к. М\орг разрушают муциновый слой,повреждают поверхностные

только те лучи, которые отражаются от микробных клеток; этот метод мембраны эпит клеток — способствую преодолеванию слизистого

используют при изучении спирохет и их подвижность, контуры

барьера) 3)лецитиназа (гидролизует лецитин, явл главным липидным

изучаемых объектов видны, но внутренние структуры неразличимы)

компонентом мембран — вызывает быстрое разрушение липидов

в) фазово-контрастная микроскопия (универсальные метод изучения

клеточных мембран) 4) ДНК-зы (вызывают гидролиз ДНК —

живых неокрашенных м/орг, обладает хорошей разрешающей

способствует жизнедеятельности м/орг) 5) плазмокоагулаза (вызывает

способность, дает возможность различить некоторые анатомические

свертываемость плазмы крови, в образовавшемся фибрине м/орг

структуры м/орг, подвижность, явл основным методом изучения

прячуться от действия комплемента, Ат, лизоцима фагоцитов) 6)

микоплазм и L форм бактерий, метод основан на превращении

уреаза (катализирует распад мочевины до CO2 и NH3, что приводит к

отическими стредставми фазовых колебаний в амплитудные, это дает

защелачиванию внутр среды) 7)протеазы (разрушают Ig, компоненты

возможность получить контрастное изображение живых

комплемента, лизоцим и др)

неокрашенных объектов, которые по своей природе являются

Протеолитические ферменты: 1)фибринолизин (расстворяет сгустки

малоконтрастными (фазовыми), т. е. Вызывают сдвиг по фазе

фибрина, способствуя распространению возб скрывшихся в них) 2)

проходящей через них световой волны, не меняя ее амплитуду;

коллагеназа (гидролизует коллаген сухожилий и мышц, способствуя

человечечский глаз не улавливает фазовых изменений, но

проникновению в них возб)

воспринимает изменения длины волны и ее амплитуды, по этому

РНГА основана на использовании эритроцитов с адсорбированными

неокрашенный объект при обычном методе микроскопирвоания

практически невидем, для повышения контрастности живых

на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соот-

неокрашенных объектов их превращают в «амплитудные» с помощтю ветствующими антителами сыворотки крови больных вызывает специального фазово-контарстного устройства, который включается в склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в

себя несколько фазовых объектов с различным увеличением; фазовый виде зонтика(+ рез-т) и пуговки(- рез).

 

 

 

 

конденсор с набором кольцевых диафрагм для каждого объектива,

Компоненты. Для постановки РНГА могут быть использованы

вмонтированных в револьверный диск; вспомогательный микроскоп,

эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и

с помощью которого осуществляется настройка фазово-контрастной

другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином или

системы (фазовые кольца объектива должны быть совмещены с

глютаральдегидом. Антигенами в РНГА могут служить

соответ кольцевой диафрагмой конденсора).

полисахаридные АГ микроорганизмов, экстракты бактериальных

2)культуральный (бактериологический, вирусологический)

вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

3)биологический метод (заражение лабораторных животных)

Эритроциты,

сенсибилизированные

 

АГ,

 

называются

4)молекулярно-генетический

эритроцитарными

диагностикумами.

Для

приготовления

5)серологический

эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты

 

барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.

Простые и сложные методы окраски. Протравы и

Применение. РНГА применяют для выявления Ат в сыворотке

дифференцирующие вещества. Метод Грама

больного.

 

 

 

 

 

 

 

Механизм. Реакцию ставят на пластинках с лунками. Иссл сыворотку

Простой метод окраски является одноэтапным и заключается в

предварительно инактивированную при 56С в течении 30 мин для

окраске микропрепарата одним красителем. Используют основные

уничтожения комплемента, разводят от 1:20 до 1:12000 и более,

анилиновые красители (фуксин,генцианвиолет, метиленовый синий)в

разливают в лунки по 0,5 мл. К каждому разведению добавляют по

виде водных растворов или пропитанных красителем

0,1 мл эритроцитарного диагностикума. Р-ц выдерживаю в течении 2

фильтровальных бумажек. Продолжительность окраски 3-5 мин,

часов при 37С или при комнатной температуре. Контроль РНГА:

затем промывают водой, высушивают и микроскопируют. В

1)сесибилизированные

эритроциты

с

физ

 

раствором

препаратах окрашенных простым методом можно получить

2)несенсибилизированные

эриттроциты

с

физ

раствором

представление о форме и размерах микробных клеток, расположении

3)несенсибилизированные эритроциты с исслед сывороткой.

в мазке.

РОНГА ставится с эритроцитарным антительным диагностикумом,

Сложные методы окраски являются многоэтапными, приготовленный который представляет

собой взвесь

отмытых

 

эритроцитов,

мазок последовательно обрабатывают различными красителями,

нагруженных спец Ig. С помощью этой реакции можно быстро

протравами, дифференцирующими вещ. Сложные методы

обнаружить Аг в исследуемом материале (н-р дифтирийный токсин).

подразделяются на дифференциальные (позволяют отличить один вид Реакцию ставят на доске с лунками, в которые вносят двухкратное

или группу бактерий от другого) и для выявления различных

разведение культуральной жидкости от 1:8 до 1:512 в объеме 0,1 мл, а

морфологических структур клеток.

затем в каждую лунку добавляют по 0,1 мл эритроцитарного

Протравы — физические и химические факторы, обладающие

антительного диагностикума. Контроль РОНГА: 1) культуральная жид

свойствами повышать окрашиваемость микробов. Уплотняя

заведомо токсигенного штамма (+ контроль) 2) нетоксигенного

цитоплазму, они могут делать окраску более прочной, или усиливать

штамма (- контроль) 3)контроль эритроцитарного антительного

красящие св-ва красителей, или разрыхлять оболочки клеток, спор,

диагностикума. При наличии Аг образуется осадок в виде зонтика,

способствуя проникновению краски в клетку. Протравами

при отриц реакции — пуговка.

 

обрабатывают мазок в разных методах в различное время (до

РНАТ

(р-ц нейтрализации Ат) позволяет быстро выявить

окрашивания н-р метод Ожешки, во время окрашивания н-р метод

неизвестный Аг или Ат. В реакции участвуют: 1) культуральная жид,

Циля-Нильсена, после нанесения краски для ее закрепления н-р

возможно содержащая дифтирийный токсин 2)противодифтирийная

метод Грама).

антитоксическая сывортка (известные Ат) 3)эритроцитарный

Дифференцирующие вещ избирательно обесцвечивают или стр-ры

антигенный диагностикум, нагруженный дифтирийным токсином.

бактериальной клетки и не обесцвечивают другие.

Контроли

как

в

РОНГА+контроль

противодифтирийной

Метод Грама. Цель применения — выявление Gram+ и Gram-

антитоксической сыворотки.

 

бактерий. Реактивы: 1)краски (генцианвиолет карболовы и

Разведение культуральной жид разливают в лунки по 0,1 мл, в

карболовый фуксин) 2) протрава (р-р Люголя) 3) Дифференцирующее каждую лунку добавляют антитоксическую

противодифтирийную

вещ (этиловый спирт) Способ фиксации — в пламени горелки. Этапы сыв (по

2 гемагглютинирующих единицы в объеме 0,1 мл) и

окрашивания: 1)генцианвиолет 3 мин 2) нанести р-р Люголя 1 мин 3)

выдерживают при 37С 30 мин, чтобы произошла нейтрализация

промвть в этаноле 4)промыть водой 5) окраска фуксином 5 мин 6)

токсина.

Затем

добавляют эритроцитарный диагностикум,

промыть водой 7) высушить.Сущ-ть метода — окраска задерживается нагруженный дифтирийным токсином и выдерживают 2 часа. При

в многослойном пептидогликане у Gram+ бактерий .

наличии в культ жид тоскина, он связ с антитоксической сывороткой.

 

Добавленный позже эритр диагн с сорбированным токсином не

 

вступит в реакцию, и гемагглютинации не произойдет, в лунках

 

образется пуговка (положит реакция на нейтрализацию Ат). Если в

(отрицательная реакция на наличие нейтрализации Ат).

культ жид не содержится токсина, антитоксическая сыв останетсяБилет 18 свободной и взаимодействует с эритроцитарным диагностикумом,Этапы развития микробиологии. Луи Пастер произойдет гемагглютинация и выпадет осадок в виде зонтикаГипотетический

Морфологический (первооткрывателем микромира называют Антони ван Левенгука; микроскопировал каплю воды и дал описание обитавшим там сущ-м; далее развитие м/б пошло только в описании новых видов)

Физиологический период связан с работами Луи Пастера (показал что при стерилизации брожения не будет, тем самым доказал что в брожении основную роль играют микроорганизмы; также стало открытием новая форма жизни — анаэробная, без присутствия О2, а также иногда губительна для жизнидеятельности анаэробных м/орг.В 1860—1862 годах Пастер изучал возможность самозарождения микроорганизмов. Он провёл элегантный опыт, доказавший невозможность самозарождения микробов (в современных условиях, хотя тогда не поднимался вопрос возможности самозарождения в прошлые эпохи), взяв термически стерилизованную питательную среду и поместив её в открытый сосуд с длинным изогнутым горлышком. Сколько бы сосуд ни стоял на воздухе, никаких признаков жизни в нём не наблюдалось, поскольку содержащиеся в воздухе споры бактерий оседали на изгибах горлышка. Но стоило отломить его или сполоснуть жидкой средой изгибы, как вскоре в среде начинали размножаться микроорганизмы, вышедшие из спор.

Иммунологический период Молекулярно-генетический

Пастеризаxция — процесс одноразового нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ до 60 °C в течение 60 минут или при температуре 70—80 °C в течение 30 мин[13]. Технология была предложена в середине XIX века французским микробиологом Луи Пастером. Применяется для обеззараживания пищевых продуктов, а также для продления срока их хранения.В процессе такой обработки в

продукте погибают вегетативные формы

микроорганизмов,

однако споры сохраняются в жизнеспособном

состоянии и при

возникновении благоприятных условий начинают интенсивно развиваться. Поэтому пастеризованные продукты (молоко, пиво и другие) хранят при пониженных температурах в течение ограниченного периода времени. Считается, что пищевая ценность продуктов при пастеризации практически не изменяется, так как

сохраняются

вкусовые

качества

и

ценные

компоненты

(витамины, ферменты).

 

 

 

 

создал вакцину против сибирской язвы и прививки против бешенства

ИФА

основан на использовании Ат или Аг меченных ферментами; в лунках сорбируют известные Аг или Ат, которые прочно прикрепляются к стенкам лунок и не удаляются при отмывании; затем вносят соответствующие испытуемые Аг или Ат, затем добавляют конъюгаты

— специфические Ат, конъюгированные с ферментом (после внесения в лунки очередного ингридиента, каждый раз проводят инкубацию и отмывают не связавшиеся Аг и Ат). Если в ре-те образуется Аг+Ат, то они остаются в лунке и с этим комплексом связываются конъюгаты. При «+» реакции в лунке будет нах-ся фермент, который мы обнаружим с помощью субстратной смеси (субстрат и хромоген), при расщеплении этого субстрата хромоген будет менять свой цвет, следовательно в лунке есть фермент, который связан с комплексом Аг-Ат. При «-» реакции хромоген не будет менять свой цвет, так как внесенные в лунки ингредиенты не вступили в взаимодействие и были удалены при промывании. Контроли: контроль Аг (без сыворотки) , реакция с положительной сыв, реакция с отрицательной сывороткой.

ИФА бывает прямая, непрямая и конкурентная. При прямой используют меченные ферментом Ат различной спецефичности для выявления Аг (недостаток — необходимо иметь множество конъюгатов различной спецефичности). При непрямой р-ц участвуют обычные иммуные диагностические сыворотки и меченная ферментом антииммуноглобулиновая сыворотка (более чувствительна чем прямая). Конкурентный метод основан на конкуренции за связывание с Ат испытуемого Аг и известного Ат меченного ферментом (наиболее чувствительный).

Билет 19

образуется линия преципитации между лункой с Ат и Аг, анализируя

Этапы развития микробиологии. Роберт Кох

которые можно судить об характере. 3)Метод иммуноэлектрофореза

Гипотетический

(чувств и спецефичен, позволяет выявить и различить Аг,

Морфологический (первооткрывателем микромира называют Антони

содержащиеся в многокомпонентной системе и в малых

ван Левенгука; микроскопировал каплю воды и дал описание

концентрациях; 1этаписслед вещ разделяют при помощи

обитавшим там сущ-м; далее развитие м/б пошло только в описании

электрофореза на составные компоненты, расплавленный агар

новых видов)

наливают в стеклянную пластинку, в центре вырезают лунку и вносят

Физиологический период связан с работами Луи Пастера (показал что в нее исслед материал, при электрофорезе отд компоненты вещ

при стерилизации брожения не будет, тем самым доказал что в

распределяются по оси миграции; 2 этап — р-ц преципитации в геле,

брожении основную роль играют микроорганизмы; также стало

на этой же пластинке параллельно оси миграции вырезают в геле

открытием новая форма жизни — анаэробная, без присутствия О2, а

канаки и в носят в них иммунную сыворотку, Ат и Аг исслед вещ

также иногда губительна для жизнидеятельности анаэробных

диффундируют в геле навстречу друг дургу, образуя дуги

м/орг.В 1860—1862 годах Пастер изучал возможность

преципитации при встрече различной кривизны и расположения.

самозарождения микроорганизмов. Он провёл элегантный опыт,

 

доказавший невозможность самозарождения микробов (в

 

современных условиях, хотя тогда не поднимался вопрос

 

возможности самозарождения в прошлые эпохи), взяв термически

 

стерилизованную питательную среду и поместив её в открытый сосуд

 

с длинным изогнутым горлышком. Сколько бы сосуд ни стоял на

 

воздухе, никаких признаков жизни в нём не наблюдалось, поскольку

 

содержащиеся в воздухе споры бактерий оседали на изгибах

 

горлышка. Но стоило отломить его или сполоснуть жидкой средой

 

изгибы, как вскоре в среде начинали размножаться микроорганизмы,

 

вышедшие из спор.

 

Иммунологический период

 

Молекулярно-генетический

 

Роберт Кох. Сибирская язва. Зная об опытах Луи Пастера над

 

животными, больными сибирской язвой, Кох с помощью микроскопа

 

изучает возбудителя, который, предположительно, вызывает

 

сибирскую язву. Проведя серию тщательных, методичных

 

экспериментов, он устанавливает, что единственной причиной

 

заболевания является бактерияBacillus anthracis, и изучает её

 

биологический цикл развития. Устанавливает эпидемиологические

 

особенности болезни, показывает, что одна палочка бактерии может

 

образовать многомиллионную колонию. Эти исследования впервые

 

доказали бактериальное происхождение заболевания. Туберкулез.

 

Растёртую туберкулёзную ткань 271-ого препарата Кох окрашивает в

 

метиловой синьке, а затем в едкой красно-коричневой краске,

 

используемой в отделке кожи, и обнаруживает крохотные, слегка

 

изогнутые, ярко-сине окрашенные палочки — палочки Коха.

 

24 марта 1882 года, когда объявил о том, что сумел выделить

 

бактерию, вызывающую туберкулёз, Кох достиг величайшего за всю

 

свою жизнь триумфа. В то время это заболевание было одной из

 

главных причин смертности. Выделил стерильную жидкость,

 

содержащую вещества, вырабатываемые туберкулезной палочкой в

 

течение её жизнедеятельности — туберкулин, который вызывал

 

аллергическую реакцию у больных туберкулезом Холера. Изучение

 

Кохом туберкулёза было прервано, когда он по заданию германского

 

правительства в составе научной экспедиции уехал в Египет и Индию

 

с целью попытаться определить причину заболевания холерой.

 

Работая в Индии, Кох объявил, что он выделил микроб, вызывающий

 

это заболевание — холерный вибрион.

 

Реакция преципитации. Метод двойной иммунодиффузии по

 

Оухтерлони. Иммуноэлектрофорез.

 

Р-ц преципитации — это осаждение мелкодисперсных Аг

 

специфическими Ат в присутствии электролита. Выпадение

 

нерастворимого комплекса Аг-Ат наблюдается при эквивалентных

 

соотношениях ингредиентов. Реакция используется для обнаружения

 

Аг известной преципитирующей сывороткой, полученных от жив

 

иммунизированных известным Аг. 1) Р-ц колцеприципитации

 

(диагностическая сыв известной специфичности, преципитиноген

 

(Аг), NaCl, в котором разводят сыв и Аг; в узкие пробирки наливают

 

сыв, затем острожно пастеровской пипеткой наслаивают

 

преципитиноген, конроль с нормальной сыв, на которую наслаивают

 

исследуемый Аг. При + реакции между спец сыв и исслед Аг

 

появляется преципитат в виде белого кольца, в контроле он

 

отсутствует. Титроп р-ц преципитации называют то наибольшее

 

разведение преципитогена, в котором еще обр-ся колько преципитата

 

на гарнице со спец сыв. 2) р-ц преципитации в геле (эта р-ц позволяет

 

проводить анализ сложного набора растворимых Аг или

 

преципитирующих Ат в исслед сист; принцеп состоит в том, что Аг и

 

Ат,реагируя в геле, образуют преципитат в виде белой линии, каждая

 

пара Аг+Ат обр-т отдельную линию, что позволяет сравнить

 

антигенный состав испытуемых вещ, а также выявить

 

соответствующие Ат.

 

Метод двойной диффузии по Оухтерлони (в часшки Петри наливают

 

просветленный агар и делают в нем лунки, в центральную вносят Ат,

 

а по перферии Аг, опыт учитывают через 24-48 ч, в + случае

 

Билет 16

размеров, с утолщенной клет стенкой, уплотненной цитоплазмой).

Комплемент, его структура, функции, пути

активации, роль вРазличают 4 морфологических формы риккетсий (по Здродовскому):

иммунитете.

кокковидную, палочковидную, бациллярную, нитевидная. Содержат

Природа и характеристика комплемента. Комплемент является однимбольшое кол-во липидов,плохо воспринимают анилиновые красители. из важных факторов гуморального иммунитета, играющим роль вДля их окраски применяют сложные методы Романовского-Гимзы и защите организма от антигенов. Комплемент представляет собойЗдродовского (применяется для обнаружения риккетсий в зараженных сложный комплекс белков сыворотки крови, находящийся обычно втк, облегченный метод Циля-Нильсена). Патогенные д/человека неактивном состоянии и активирующийся при соединении антигена сриккетсии являются возбудителями риккетсиозов, для которых антителом или при агрегации антигена. В состав комплемента входятхарактерны лихорадочные состоянияи часто высыпания на коже (н-р 20 взаимодействующих между собой белков, девять из которыхR.prowazekii вызывает эпидемический вшивый сыпной тиф).

являются основными компонентами комплемента; их обозначаютМетоды культивирования риккетси1: 1)в желточном мешке цифрами: С1, С2, СЗ, С4... С9. Важную роль играют также факторы В,развивающихся кур эмбрионов; 2) в клеточных культурах D и Р (пропердин). Белки комплемента относятся к глобулинам и(перевиваемые и первичные КК); 3) пассажи на животных; 4) в орг-ме отличаются между собой по ряду физико-химических свойств. Впереносчиков (вшей); частности, они существенно различаются по молекулярной массе, а

также имеют сложный субъединичный состав: Cl-Clq, Clr, Cls; СЗСЗа, СЗЬ; С5-С5а, С5b и т. д. Компоненты комплемента синтезируются в большом количестве (составляют 5—10% от всех белков крови), часть из них образуют фагоциты.

Функции комплемента многообразны: а) участвует в лизисе микробных и других клеток (цитотоксическое действие); б) обладает хемотаксической активностью; в) принимает участие в анафилаксии; г) участвует в фагоцитозе. Следовательно, комплемент является

компонентом многих иммунологических реакций, направленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных клеток и антигенов (например, опухолевых клеток, трансплантата).

Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад ферментативных протеолитических реакций, в результате которого образуется активный цитолитический комплекс, разрушающий стенку бактерии и других клеток. Известны три пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый.

По классическому пути комплемент активируется комплексом антиген-антитело. Для этого достаточно участия в связывании антигена одной молекулы IgM или двух молекул IgG. Процесс начинается с присоединения к комплексу АГ+АТ компонента С1, который распадается на субъединицы Clq, Clr и С Is. Далее в реакции участвуют последовательно активированные «ранние» компоненты комплемента в такой последовательности: С4, С2, СЗ. Эта реакция имеет характер усиливающегося каскада, т. е. когда одна молекула предыдущего компонента активирует несколько молекул последующего. «Ранний» компонент комплемента С3 активирует компонент С5, который обладает свойством прикрепляться к мембране клетки. На компоненте С5 путем последовательного присоединения «поздних» компонентов С6, С7, С8, С9 образуется литический или мембраноатакующий комплекс который нарушает целостность мембраны (образует в ней отверстие), и клетка погибает в результате осмотического лизиса.

Альтернативный путь активации комплемента проходит без участия антител. Этот путь характерен для защиты от грамотрицательных микробов. Каскадная цепная реакция при альтернативном пути начинается с взаимодействия антигена (например, полисахарида) с протеинами В, D и пропердином (Р) с последующей активацией компонента СЗ. Далее реакция идет так же, как и при классическом пути — образуется мембраноатакующий комплекс.

Лектиновыи путь активации комплемента также происходит без участия антител. Он инициируется особым маннозосвязывающим белком сыворотки крови, который после взаимодействия с остатками маннозы на поверхности микробных клеток катализирует С4. Дальнейший каскад реакций сходен с классическим путем.

В процессе активации комплемента образуются продукты протеолиза его компонентов — субъединицы СЗа и СЗb, С5а и С5b и другие, которые обладают высокой биологической активностью. Например, СЗа и С5а принимают участие в анафилактических реакциях, являются хемоаттрактантами, СЗb — играет роль в опсонизации объектов фагоцитоза, и т. д. Сложная каскадная реакция комплемента происходит с участием ионов Са2+ и Mg2+.

Патогенные риккетсии. Таксономия. Свойства. Состав и метаболизм. Культивирование. Роль Это Грамполиморфные бактериоподобные прокариоты, капсул и

спор не образуют. Таксн. Положение: порядок Rickettsiales сем Rickettsiaceae род Rickettsia; Жизненный цикл риккетсии вкл 2 стадии

— вегетативную (внутриклеточную) и покоящуюся. Вегетативная стадия активно размножается путем бинарного деления в цитоплазем или ядре (редко) клетки-хозяина, так как являются облигатными внутриклеточными энергетическими паразитами (главное св-во)., так как не могут синтезировать кофермент НАД. Покоящаяся форма обладает повышенной резистентностью (клетки округлые, меньших

Билет 25

антиген-антитело. Для этого достаточно

участия

в связывании

Св-ва вирусов. Вирион. Химический состав, Функция и локализацияантигена одной молекулы IgM или двух молекул

IgG. Процесс

гликопротеинов и липидов.

начинается с присоединения к комплексу

АГ+АТ компонента С1,

Вирусэто неклеточная форма

жизни, обладающая собственнымкоторый распадается на субъединицы Clq, Clr и С Is. Далее в реакции

геномом, способностью к репродукции в клетках жив орг-в илиучаствуют последовательно активированные «ранние» компоненты клеточных культурах, адапционными свойствами и изменчивостью.комплемента в такой последовательности: С4, С2, СЗ. Эта реакция Вирусы значительно отличаются от всех других м/орг и их выделяютимеет характер усиливающегося каскада, т. е. когда одна молекула

в отдельное царство Vira. У них отсутствует клеточная организация,предыдущего

компонента

активирует

несколько

молекул

содержат только одну из двух нуклеиновых кислот (ДНК/РНК), непоследующего.

«Ранний»

компонент

комплемента С3

активирует

имеют собственных белок синтезирующих и генерирующих энергиюкомпонент

С5,

который

обладает

свойством

прикрепляться к

систем и являются абсолютными внутриклеточными паразитами намембране

клетки. На компоненте

С5 путем

последовательного

генетическом уровне, репродукируются в чувств клетке согласноприсоединения «поздних» компонентов С6, С7, С8, С9 образуется генетичнской прогармме заложенной в геноме используялитический или мембраноатакующий комплекс который нарушает биосинтетические системы и ресурсы клетки. Различают две формыцелостность мембраны (образует в ней отверстие), и клетка погибает сущ-ния вируса: внеклеточный вирион, которая не проявляетв результате осмотического лизиса.

жизнидеятельность и внутриклеточный вегетативный вирус, которыйАльтернативный путь активации комплемента проходит без участия репродуцируется в инфицированной клетке, вызывая продуктивнуюантител. Этот путь характерен для защиты от грамотрицательных

инфекцию.

 

 

 

микробов. Каскадная цепная реакция при альтернативном пути

Размеры вирусов очень малы.

Могут иметь

сферическую,начинается с взаимодействия антигена (например, полисахарида) с

многогранную,

палочковидную,

пулевидную,

нитевидную

ипротеинами В, D и пропердином (Р) с последующей активацией

булавовидную

форму. Различают

простые вирусы (сост

изкомпонента СЗ. Далее реакция идет так же, как и при классическом

нуклеиновой кислоты, ассоциированных с внутренними белкамипути — образуется мембраноатакующий комплекс.

капсида) и сложные вирусы (нуклеокапсид + суперкапсиднарЛектиновыи путь активации комплемента также происходит без

оболочка, явл модифицированной мембр клеточного происхождения,участия антител. Он инициируется особым маннозосвязывающим в которую вирион одевается при выходе из кл-ки). Хим.состав:белком сыворотки крови, который после взаимодействия с остатками основные компоненты вируса: НК и белки; Простые состоят только изманнозы на поверхности микробных клеток катализирует С4. них, в состав сложных входят также дополнительно углеводы иДальнейший каскад реакций сходен с классическим путем.

липиды, имеющие клет строение. В зависимости от строения НКВ процессе активации комплемента образуются продукты протеолиза вирусы разделяются на ДНК-геномные и РНК-геномные (+РНК/-РНК,его компонентов — субъединицы СЗа и СЗb, С5а и С5b и другие,

двунитевые),

фрагментированные

или

нефрагментированные.которые обладают высокой биологической активностью. Например,

Вирусные белки разделяются на

структурные (капсидные белки,СЗа и С5а принимают участие в анафилактических реакциях, являют-

геномные

белки,

матриксные

белки

сложных

вирусов,ся хемоаттрактантами, СЗb — играет роль в опсонизации объектов

суперкапсидные

поверхностные

белки)

и

неструктурныефагоцитоза, и т. д. Сложная каскадная реакция комплемента

(вирусиндуцированные ферменты, регуляторные белки, нестабильныепроисходит с участием ионов Са2+ и Mg2+.

белки-предшественники, ферменты, модифицирующие вирусные

белки).

 

 

 

 

 

 

Липиды переходятв

состав вирионов из клеточных, ядерных и др

внутренних мембран инфицированной клетки. Явл основным компонентом суперкапсида. Ф-ц — способствуют стабильности вириона.

Гликопротеиды — поверхностные белки суперкапсида. В их состав входят углеводы клеточного происхождения. Их гликолизирование осуществляется клет ферментами во время транспортировки белков на наружную поверхность суперкапсида, при этом клеточные белки вытесняются из мембран. Гликопротеины обладают антигенными свойствами.

Комплемент, его структура, функции, пути активации, роль в иммунитете.

Природа и характеристика комплемента. Комплемент является одним из важных факторов гуморального иммунитета, играющим роль в защите организма от антигенов. Комплемент представляет собой сложный комплекс белков сыворотки крови, находящийся обычно в неактивном состоянии и активирующийся при соединении антигена с антителом или при агрегации антигена. В состав комплемента входят 20 взаимодействующих между собой белков, девять из которых являются основными компонентами комплемента; их обозначают цифрами: С1, С2, СЗ, С4... С9. Важную роль играют также факторы В, D и Р (пропердин). Белки комплемента относятся к глобулинам и отличаются между собой по ряду физико-химических свойств. В частности, они существенно различаются по молекулярной массе, а также имеют сложный субъединичный состав: Cl-Clq, Clr, Cls; СЗСЗа, СЗЬ; С5-С5а, С5b и т. д. Компоненты комплемента синтезируются в большом количестве (составляют 5—10% от всех белков крови), часть из них образуют фагоциты.

Функции комплемента многообразны: а) участвует в лизисе микробных и других клеток (цитотоксическое действие); б) обладает хемотаксической активностью; в) принимает участие в анафилаксии; г) участвует в фагоцитозе. Следовательно, комплемент является

компонентом многих иммунологических реакций, направленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных клеток и антигенов (например, опухолевых клеток, трансплантата).

Механизм активации комплемента очень сложен и представляет собой каскад ферментативных протеолитических реакций, в результате которого образуется активный цитолитический комплекс, разрушающий стенку бактерии и других клеток. Известны три пути активации комплемента: классический, альтернативный и лектиновый.

По классическому пути комплемент активируется комплексом

Билет 22

Билет 3

Свойства вирусов. Репродукция. Особенности репродукции РНК+ и

Микробиология как наука

РНКвирусов

Микробиология — наука о живых организмах, невидимых

 

невооруженным глазом (микроорганизмах): бактерии, архебактерии,

Вирусы — неклеточные формы жизни, обладающие собственныммикроскопические грибы и водоросли, простейшие и вирусы. геномом, способностью к воспроизведению в клетках орг-в или(см билет 18 и 19)

клеточных культурах, адаптационными св-ми и изменчивостью Вирусы значительно отличаются от всех других м/орг и их выделяютРСК (р-ц связывания комплемента)

в отдельное царство Vira. У них отсутствует клеточная организация,основана на способности комплемента адсорбироваться на любом содержат только одну из двух нуклеиновых кислот (ДНК/РНК), некомплексе Аг-Ат; включает в себя 2 системы — основную и имеют собственных белок синтезирующих и генерирующих энергиюиндекаторную; 1 система состоит из определяемого Ат( или Аг) и систем и являются абсолютными внутриклеточными паразитами наизвестного Аг (или Ат), к ним добавляют комплимент. Если Аг генетическом уровне, репродукируются в чувств клетке согласносоответствует Ат, то к комплексу присоединяется комплимент, но генетичнской прогармме заложенной в геноме используяпроцесс связывания комплимент остается невидимым. Для этого биосинтетические системы и ресурсы клетки. Различают две формынужна 2 система — индикаторная система Аг-Ат состоящая из сущ-ния вируса: внеклеточный вирион, которая не проявляетэритроцитов барана и гемолитической сыворотки. Если в первой жизнидеятельность и внутриклеточный вегетативный вирус, которыйсистеме произошло образование Аг-Ат и к ним присоединился репродуцируется в инфицированной клетке, вызывая продуктивнуюкомплемент, то при добавлении индикаторной системы гемолиза не инфекцию. Вирусы бываю простые и сложные. Простые содержатпроизойдет, это указывает на + рекцию РСК. Если же в 1 системе не

только НК и белки, в

составе сложных могут быть липиды иобразуется Аг-Ат и комплемент остается свободным, то при

углеводы. Этапы репродукции вирусов: адсорбция

вирионов надобавлении индикаторной системы комплемент будет связываться с

клетке,

проникновение

вируса внутрь клетки, депротеинизацияэтой индикаторным комплексом Аг-Ат, вызывая гемолиз эритроцитов.

вириона

и освобождение

его НК,

экспрессия вирусного генома иТ.о. Наличие гемолиза — отрицательная реакция РСК.

синтез

компонентов

вириона

(транскрипция,

трансляция,РСК отличается высокой чувствительностью и специфичностью,

репликация), формирование вирионов, выход нового поколения изшироко используется в серологических реакциях. Но при постановке клетки. Особенности репродукции +РНК: +РНК выполняет функциюРСК необходимо соблюдать точное количественное соотношение иРНК, поступает на полирибосомы и полностью транслируется смежду ингредиентами, поэтому перед постановкой 1 основной образование гиганского полипептида-предшественника, которыйсистемы проводиться большая трудоемкая работа по их титрованию.

нарезается протеазами на отдельные белки — структурные и неструктурные. Особенности репродукции -РНК: Транскрипция осуществляется собственными транскриптазами вирусов, при этом возможно образование как коротких, так и длинных иРНК(+РНК) с последующей трансляцией индивидуальных зрелых белков или полипептида-предшественника,а также дочерних -РНК.

Инфекционный иммунитет. Формы проявления иммунитета. Антитоксический и антимикробный иммунитет. Стерильный и нестерильный. Местный иммунитет.

Иммунитет — это способ защиты орг-ма от инфекционных и других генетически чужеродных агентов. Различают врожденный иммунитет (явл видовым признаком, передается по наследству, неспецефичен) и адаптивный (приобретенный) иммунитет — произошла специализация мех-в иммунитета, которая привела к формированию иммунной системы и дифференцировке Т- и В-лимф и биосинтезу Ат различных классов; явл спецефичным, приобретается в течении жизни каждым орг-м индивидуально, не наследуется. Подразделяется на активный ( формируется имм сист в рез-те иммуного ответа на введение микроорганизмов или их токсинов; может быть естественно активным и искусственно активным) и пассивный (формируется путем введения в орг-м готовых Ат; естественно пассивный развивается при трансплацентарном переносе IgG от матери к плоду, пассивный искусственный иммунитет — введение терапевтических сывороток).

Адаптивный имм может быть противоинфекционным, противоопухолевым трансплантационным и др. Противоинфекционный иммунитет направлен против возб различной природы (антибактериальный, антивирусный, противогрибковый) или против токсинов (антитоксический).

Иммунитет разделяется на стерильный (полное устранения микроорганизмов из макроорганизма, н-р гепатит А) и не стерильный (некоторое кол-во возб осттается в организме, но теряют свою аггресивность и способность активно размножаться; н-р туберкуле, вирус герпеса; на фоне временного снижения ф-ц иммунной системы возможно повторное возникновение болезни, но орг-м с ней справляется, так как помнит как с ней бороться).

Также иммунитет бывает общий и местный. Местный имм — комплекс преспособлений, который защищает поверзности (слизистые оболочки) соприкасающиеся с внешней средой. К факторам формирующий местный иммунитет относится лизоцим, IgA.

Мех-м действия лизоцима — явл гликолитическим ферментом, расщепляет гликозидные св между аминосахарами пептидокликана, разрушая КС бактерий, что приводит к их гибели.

Билет 8 Билет 10 РНГА основана на использовании эритроцитов с адсорбированнымиМикоплазмы. Таксономия. Биологические св-ва. Методы изучения. на их поверхности антигенами, взаимодействие которых с соот-Роль

ветствующими антителами сыворотки крови больных вызываетМикоплазмы — полиморфные м/орг, отличающиеся от других склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки впрокариот отсутствием клеточной стенки и ее предшественников.

виде зонтика(+ рез-т) и пуговки(- рез).

Класс Mollicutes сем Mycoplasmataceae род Micoplasma

Компоненты. Для постановки РНГА

могут быть использованыОтсутствует КС, нет пептидоглика (ее ф-ц выполняет

эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека иограничивающая мембрана), выражен полифорфизм. Треб к пит другие, которые заготавливают впрок, обрабатывая формалином илисредам, медленно растут, нуждаются в стеролах (холестерине и его

глютаральдегидом.

Антигенами в

РНГА

могут

 

служитьпроизводных), которые входят в состав их липидной мембраны. Для

полисахаридные АГ микроорганизмов,

экстракты бактериальныхих культивирования используют специальные полужидкие среды, на

вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а

также другие

 

вещества.которых через 2-4 недели получают видимый рост в виде колоний,

Эритроциты,

сенсибилизированные

АГ,

 

называютсянапоминающих «яичницу-глазунью».

эритроцитарными

диагностикумами.

Для

приготовленияСодержат нуклеоид, рибосомы, цитоплазму и ЦПМ. Являются

эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроцитымембранными паразитами.

барана, обладающие высокой адсорбирующей активностью.

В связи с хрупкостью , их не удается окрашивать анилиновыми

Применение. РНГА применяют для выявления

Ат в

сывороткекрасителями и поэтому их изучают в нативных препаратах в фазово-

больного.

 

 

 

 

контрастном микроскопе.

Механизм. Реакцию ставят на пластинках с лунками. Иссл сывороткуВызывают инфекционные заболевания - респираторного микоплазмоз

предварительно инактивированную при 56С в течении 30 мин дляи урогенитальный микоплазмоз.

 

 

уничтожения комплемента, разводят от 1:20 до 1:12000 и более,

 

 

 

 

разливают в лунки по 0,5 мл. К каждому разведению добавляют поРеакция иммунного гемолиза

иммунного

лизиса (

растворение

 

 

 

0,1 мл эритроцитарного диагностикума. Р-ц выдерживаю в течении 2относится к

реакциям

часов при 37С или при комнатной температуре. Контроль

РНГА:жизнеспособных клеток (Аг), соединенных со специфическими Ат, в

1)сесибилизированные

эритроциты

с

физ

растворомприсутствии комплимента.

 

 

 

2)несенсибилизированные

эриттроциты

с

физ

растворомР-ц иммуного

гемолиза —

растворение

эритроцитов

в присутвии

3)несенсибилизированные эритроциты с исслед сывороткой.

 

спецефических Ат — гемолизинов и комплимента. При обр-нии Аг-

 

 

 

 

 

 

Ат происходит присоединения компонентов комплемента (активация

Энергетический метаболизм м/орг. Дыхание. Брожение.

Типыпо классичсекому пути); сформировавшийся мембраноатакующий

брожения, дыхательная цепь.

 

 

 

 

комплекс возд на мембрану эритроцита и вызывает их гемолиз;

Энергетический метаболизм(катаболизм) — это поток р-цииИнгридиенты р-ц иммуного гемолиза: эритроциты барана , сопровождающихся распадом крупных молекул на более мелкие сгемолитическая сыворотка (получают от кроликов, выделением энергии и запасанием получаемой энергии в формеиммунизированных эритроцитами барана), комплимент. Для контроля макроэргических молекул -АТФ, АДФ, ЦТФ и др. Главные из нихспецефичности Аг используют эритроциты собаки, которые готовят -АТФ, которые в дальнейшем расходуются для биосинтеза, активноготакже как взвесь эритроцитов барана. +рез-т — жид в пробирке ярко-

движения, осморегуляции и тп.

 

розового цвета (произошел гемолиз); - рез-т — жидкость бесцветна,

Основным способом получения энергии для большинства

м/оргна дне пробирки осадок эритроцитов.

является

дыхание(окислительно

фосфорилирование)

иРеакция иммунного гемолиза участвует в РСК в качестве

брожение(субстратное фосфорилирование).

индикаторной системы

Дыхание — это метаболичсекий процесс, идущий с образованием АТФ путем окислительного фосфорилирования, сопряженного с функционирвоанием электронно-транспортной цепи, при котором органические и неорганические соед служат донорами электронов, а конечным акцептором является в основном неорг соед. Главную роль в дыхании играет дыхательная цепь. Она содержит систему переносщиков , осуществляющих транспорт протонов и электронов цикле Кребса. У прокариот дых цепь нах-ся в ЦПМ и ее производных. Мембрана содержит фермент АТФ-синтазу, которая образует АТФ из АДФ. Важными ферментами дых цепи являются: флавопротеины (оквост ферменты, содержит в качестве простетической группы ФМН или ФАД, которые передают атомы водорода от НАДН и НАДФН последующим переносщикам), хиноны (ок-вост коферменты, которые способны переносить как водород так и электроны, они являются «сборщиками водорода» и передают его цитохромам; Грамэто убихинон, Грам+ нафтохинон), цитохромы (ок-вост ферменты, которые переносят только электроны, в их молекуле простетичнеской гр явл гем который содержит железо +3, при присоединении электронов железо восстанавливается до +2). см рисунок в БХ (обмен энергии)

Брожение — метаболический процесс, приводящий к образованию АТФ в рез-те анаэробного ок-вост превращения орг соед в реакциях субстратного фосфорилирования. Процессу брожения подвергается фосфорилированная молекула углевода. Субстратное фосфорилирование — это реакция фософрилирования, сопровождающаяся образованием АТФ при гликолизе и в цикле Кребса. При брожении донорами и акцепторами электронов являются органические вещества, процесс брожения протекает в анаэробных условиях. Конечными продуктами явл орг соед (спирты, ацетон, орг кислоты). В зависимости от природы конечных продуктов различают разные типы брожения: молочнокислое, спиртовое, уксуснокислое, маслянокислое, пропионовокислое, муравьинокислое и др. Хим природа конечных продуктов брожения зависит как от вида м/орг, осуществляющего энергетический метаболизм, так и от условий его протекания.

Билет 39

Хэнкса + сывортку; недостаток — не имеет строго определенного

Этапы развития микробиологии. Луи Пастер

состава, что приводит иногда к неоднородным рез-м исследования);

Гипотетический

синтетические среды ( готовят из определенного набора хим вещ,

Морфологический (первооткрывателем микромира называют Антонипоэтому имеет определенный постоянный известный состав; не ван Левенгука; микроскопировал каплю воды и дал описаниесодержат жив белка; пример среды — Игла, среда 199 и др). обитавшим там сущ-м; далее развитие м/б пошло только в описании новых видов)

Физиологический период связан с работами Луи Пастера (показал что при стерилизации брожения не будет, тем самым доказал что в брожении основную роль играют микроорганизмы; также стало открытием новая форма жизни — анаэробная, без присутствия О2, а также иногда губительна для жизнидеятельности анаэробных м/орг.В 1860—1862 годах Пастер изучал возможность самозарождения микроорганизмов. Он провёл элегантный опыт, доказавший невозможность самозарождения микробов (в современных условиях, хотя тогда не поднимался вопрос возможности самозарождения в прошлые эпохи), взяв термически стерилизованную питательную среду и поместив её в открытый сосуд с длинным изогнутым горлышком. Сколько бы сосуд ни стоял на воздухе, никаких признаков жизни в нём не наблюдалось, поскольку содержащиеся в воздухе споры бактерий оседали на изгибах горлышка. Но стоило отломить его или сполоснуть жидкой средой изгибы, как вскоре в среде начинали размножаться микроорганизмы, вышедшие из спор.

Иммунологический период Молекулярно-генетический

Пастеризаxция — процесс одноразового нагревания чаще всего жидких продуктов или веществ до 60 °C в течение 60 минут или при температуре 70—80 °C в течение 30 мин[13]. Технология была предложена в середине XIX века французским микробиологом Луи Пастером. Применяется для обеззараживания пищевых продуктов, а также для продления срока их хранения.В процессе такой обработки в

продукте погибают вегетативные формы

микроорганизмов,

однако споры сохраняются в жизнеспособном

состоянии и при

возникновении благоприятных условий начинают интенсивно развиваться. Поэтому пастеризованные продукты (молоко, пиво и другие) хранят при пониженных температурах в течение ограниченного периода времени. Считается, что пищевая ценность продуктов при пастеризации практически не изменяется, так как сохраняются вкусовые качества и ценные компоненты (витамины, ферменты). Создал вакцину против сибирской язвы и прививки против бешенства.

Типы культуры клеток. Методы культивирования. Питательные среды и солевые растворы

Культура клеток — клетки какой либо ткани жив или человека, способные расти и размножаться в искусственных условиях. Методы культивирования вирусов: в куринных эмбрионах, в лабораторных жив, и в культурах клеток. Типы культур клеток: фиксированные кусочки ткани (в наст время не используются), однослойные (первичные, полуперевиваемые, перевиваемые), суспензированные. Для успешного получения КК и последующего размножения в них вир культивируемые клетки должны постоянно нах-ся в сбалансированной физиологической среде, содержащей все необходимые компоненты для их жизнедеятельности и размножения. Для этого используют солевые растворы и вирусологичсекие питательные среды.

Солевые растворы имеют состав солей, качественно и количественно приближающихся к составу жид животного организма. Основное назначения этих солей — создание буферности и изотоничности среды и обеспечение наиболее важными неорганическими ионами. Присутствие ионов Ca и Mg необходимо для деятельности ряда клеточных ферментов, также способствую прилипанию клеток к стеклу во время культивирования. Фосфаты и бикарбонаты принимают участие в биохимических процессах. Также входит глюкоза — как основной источник энергии, необходимый для обмена вещ клетки. Наиболее употребляемые солевые растворы — это раствор Хэнкса и Эрла.

Вирусологические пит среды готовят на основе солевых растворов. Различают: естественные пит среды ( солевые р-ры Хэнкса и Эрла к которым добавляют сыворотку, амниотическую жид, эмбриональный экстрат куринного эмбриона; эти биологичсекие жидкости явл источниками витаминов, белкового питания и др вещ способствующих росту и развитию); ферментативные гидролизаты белковых веществ (чаще всего применяют ферментативный гидролизат лактальбумина, который получают из молока; он богат аминокислотами и витаминами, этот гидролизат добавляют к среде

Тут вы можете оставить комментарий к выбранному абзацу или сообщить об ошибке.

Оставленные комментарии видны всем.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]