5.2. Лабораторная диагностика

5.2.1. Организация лабораторных исследований материалов от больных (подозрительных на заболевание) иерсиниозными инфекциями

Взятие материалов от больных иерсиниозами проводят в лечебно-профилактических организациях.

Лабораторные исследования материалов от больных (подозрительных на заболевание) осуществляют лаборатории, организации, структурные подразделения, имеющие санитарно-эпидемиологическое заключение и лицензию на выполнение работ с микроорганизмами III-IV групп патогенности.

Лабораторные исследования от больных (подозрительных на заболевание) иерсиниозными инфекциями проводят:

- в лабораториях ЛПО, ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» в субъекте Российской Федерации;

- в Региональных центрах по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней III-IV групп патогенности - с территорий прикреплённых субъектов Российской Федерации (по необходимости);

- в региональных опорных базах Референс-центра по мониторингу за иерсиниозами (ФГУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора, ФГУЗ «Российский научно-исследовательский противочумный институт «Микроб» Роспотребнадзора, ФГУЗ «Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока» Роспотребнадзора, ГУ НИИЭМ СО РАМН) – при необходимости консультативной помощи или невозможности проведения лабораторных исследований, необходимых для установления причинно-следственной связи при работе в эпидемическом очаге;

- в Референс-центре по мониторингу за иерсиниозами (ФГУН «Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера» Роспотребнадзора) - 2-5 изолятов иерсиний, выделенных в пробах материала от людей, объектов внешней среды при возникновении эпидемической вспышки для углубленного изучения возбудителя (фено- и генотипирование), нетипируемые штаммы возбудителей, выделенные в материале от людей и с объектов внешней среды в лабораториях ФГУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии» и Региональных центрах по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней III-IV групп патогенности.

5.2.2. Методы исследований и оценка результатов

5.2.2.1. Для подтверждения диагноза и установления этиологии применяют бактериологический, серологический и молекулярно-генетические методы.

Проводится ПЦР-исследование,выделение культуры Y. pseudotuberculosis или Y. enterocolitica, оценка нарастания титра антител в парных сыворотках.

5.2.2.2. Положительный результат ПЦР позволяет эпидемиологу сделать вывод о наличии Y. pseudotuberculosis или Y. enterocolitica в исследуемом материале от больных, подтвердить «вероятный» случай в первые дни болезни, облегчить дифференциальную диагностику иерсиниозов и наметить направление работы по эпидемиологической диагностике.

5.2.2.3. Окончательный диагноз может быть поставлен при бактериологическом выделении возбудителя или нарастании титра антител в парных сыворотках.

Одним из важнейших условий качественного проведения бактериологического исследования является правильный сбор материала и его подготовка к исследованию (Приложение 2, табл.4).

Схема проведения бактериологического исследования включает «обогащение» исследуемого материала при низкой температуре, использование дифференциально-диагностических сред для выделения и идентификации культур, определение их биотипа, серотипа, вирулентности.

5.2.2.4. Антитела к возбудителям псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза появляются в крови уже на первой неделе болезни, а существенное повышение их уровней происходит к началу_3-й недели. Этими сроками регламентировано обязательное исследование парных сывороток крови. Через 2 месяца часто наблюдается снижение концентрации антител, а через 6 месяцев они могут обнаруживаться в минимальных значениях (1:50; 1:100).

Наиболее выраженная динамика антителообразования наблюдается у больных с заболеванием средней тяжести. При легком течении, особенно при абдоминальной форме, динамика антител выражена слабо, титры антител начинают регистрироваться в диагностических значениях не ранее второй недели заболевания.

В связи с наличием у иерсиний перекрестно реагирующих антител учет минимального диагностического титра в РА и РНГА, считается равный 1:160 и 1:200, соответственно. Достоверным считается 2-4-кратное и выше нарастание титра антител при исследовании парных сывороток.