4. Виды патологического материала и общие принципы его отбора.

Материал для исследований от заболевших, павших или вынужденно убитых животных следует брать как можно скорее после появления ярких признаков болезни или не позднее 2-3 ч после клинической смерти или убоя, т.к. в первые 1-2 дня значительно ослабевает барьерная роль кишечника и способствует рассеиванию кишечной флоры в трупе быстро развивается бактериальное обсеменение, взять пробу стерильно становится невозможно; и в результате воздействия защитных механизмов организма количество вируса может уменьшаться, может наблюдается феномен посмертной аутостерилизации, в результате чего вирус может быть не обнаружен или его количество окажется столь незначительным, что обычными рутинными методами исследования выделить его не удается.

При взятии патматериала исходят из патогенеза изучаемой инфекции (входные ворота, пути распространения вируса в организме, места его размножения и пути выделения). При респираторных инфекциях берут носоглоточные смывы, мазки из носа и глотки, соскобы трахеи и кусочки легкого трупов; при энтеровирусных кал; при нейротропных кусочки головного или спинного мозга; при дермотропных инфекциях свежие поражения кожи и т.п., т.е. отбирают тот материал, в котором предполагается наибольшая концентрация вируса. Материалом для выделения вируса могут служить различные экскреты и секреты, кусочки органов, кровь, лимфа и пр.

Кровь берут из яремной вены, у свиней из кончика хвоста или уха. Лучше кровь у свиней брать из орбитального венозного сплетения. Иглу вводят в область наружного угла глаза под углом 45 °С и направляют к противоположному углу нижней челюсти. Иглу вводят до упора в орбиту, если кровь не идет, то иглу можно отвести. Используют цельную дефибринированную, либо «лаковую» кровь (кровь с дистиллированной водой (1:1), либо отдельные элементы крови (эритроциты, лейкоциты, плазма, сыворотка). Для обнаружения противовирусных антител кровь берут дважды с интервалом 2-3 недели для получения парных сывороток.

Смывы с конъюнктивы, со слизистой оболочки носа, с задней стенки глотки, прямой кишки и клоаки у птиц берут стерильными ватными тампонами и погружают в пенициллиновые флаконы или пробирки, содержащие 3-5 мл соответствующей жидкости (раствор Хенкса, среды для КК (199, Игла) с антибиотиками (пенициллин и стрептомицин по 500 ЕД и нистатин по 20 ЕД на 1 мл среды) и белковым стабилизатором для предотвращения быстрой инактивации некоторых вирусов).

Мокроту собирают при помощи трахеотомии – в трахею вставляют трахеотубус, вводят через него металлическую трубочку с шелковой кисточкой на конце. Рефлекторно происходит кашель и мокрота остается на кисточке. Ее помещают в пробирку.

Слюну (при подозрении на поражения ротовой полости или слюнных желез) собирают прямо в пробирку пропитывают слюной стерильный тампон из ваты на палочке и помещают в пробирку с небольшим количеством физраствора, закрывают резиновой пробкой.

Мочу собирают при помощи катетера в стерильную посуду.

Фекалии берут из прямой кишки шпателем или палочкой и помещают в стерильную пробирку.

Везикулярную жидкость можно собрать шприцам или пастеровской пипеткой в стерильную пробирку.

Стенки афт, корочки с поверхности кожи снимают пинцетом.

Спинномозговую жидкость используют редко. Ее берут асептично путем обычной пункции.

В экспериментах материал берут у животных, убитых в состоянии агонии. Пробы берут в стерильных условиях. Следует избегать загрязнения проб со-

держимым пищеварительного тракта в нем могут находиться непатогенные сиротские вирусы, вызывающие деструкцию КК, осложняя диагностические исследования.

Посмертно в качестве патматериала берут кусочки органов размером в несколько см и массой 10-20 г, которые имеют видимые отклонения от нормы (по форме, размеру, цвету, консистенции, наличию необычных образований) и могут быть поражены и содержать вирус на основании клинической картины болезни перед смертью. Наиболее часто содержат вирус печень, селезенка, легкие, головной мозг, лимфатические узлы, почки. При подозрении на бешенство отправляют всю голову, слюну, маленький труп целиком.