9. Качественный анализ сырья, содержащего сердечные гликозиды.

Общие реакции

1) Реакция с бычьей желчью в присутствии концентрированной серной кислоты. К 0,5-1 мл очищенного извлечения осторожно прибавляют 1 мл концентрированной серной кислоты и осторожно наслаивают бычью желчь. При наличии сердечных гликозидов образуется пурпурное кольцо.

2) Реакция с танином: образуется осадок.

3) Реакция с фосфорно-вольфрамовой и фосфорно-молибденовой кислотами (на терпеноиды): при добавлении канализируемому извлечению 10% спиртовых растворов данных реактивов и последующем нагревании образуется соответственно фиолетовая или розовая окраска

Реакции цветные

Цветные реакции используют для доказательства лактонного кольца, стероидной природы вещества и наличия в молекуле углеводной части. С учетом того обстоятельства, что в растениях широко встречаются и другие стероиды (стерины, сапонины и др.), а также лактопы и углеводы (моносахариды, полисахариды, гликозиды), вывод о наличии сердечных гликозндов можно делать, только в случае поло жительныхтестов на все фрагменты молекулы (лактон, стероид, углевод). Цветные качественные реакции проводятся либо с индивидуальными веществами, либо с очищенным извлечением из растительного сырья. Самый простой прием очистки заключается п том, что к полученному извлечению из 1,0 г сырья на 70% спнрте(1:10)добавляют 2 г оксида алюминия, перемешивают и фильтруют. Далее несколько капельфильтратаупаривают в выпарительной чашке досуха, а сухой остаток растворяют в соответствующем растворителе или реагенте.

Реакции на пятичленное лактонное кольцо.

1. Реакция Валье (с пикриновой кислотой в щелочной среде). В этом случае развивается желтая или оранжевая окраска — в зависимости от концентрации сердечных гл и козидов. Данная реакция часто используется в методиках количественного определения суммы сердечных гликозндов (метод фотоэлектроколориметрии окрашенного комплекса).

2. Реакция Лееаля. Сухой остаток очищенного извлечения растворяют в 0,5 мл метилового или этилового спирта. Полученный раствор переносят в пробирку и добавляют 1-2 капли раствора нитропруссида натрия, затем осторожно по стенке (не взбалтывая) добавляют 1-2 капли 10% раствора едкого натра раствора. 11ри этом на границе двух растворов появляется красное окрашивание в виде.кольца.

3. Реакция Раймонда (с м-динитробензолом в щелочной среде). Развивается синяя окраска.

4. Реакция Кедде (с 3,5-динитробензойной кислотой в щелочной срсде). Об разуется синее окрашивание.

Там ещё было ТСХ

10. Количественное определение сердечных гликозидов в сырье (химический и биологический методы).

В настоящее время в фармацевтическую практику активно внедряются физико-химические и спектральные методы анализа. В этом отношении одним из перспективных методов является высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖ Х). Для количественного определения сердечных гликозндов возможно применение и метода газожидкостной хроматографии (ГЖ Х). При этом вначале сердечные гликозиды превращают в летучие производные путем силилирования или ацетилнровання, а затем подвергают анализу.

Среди других методов, которые используются для количественной оценки содержания сердечных гликозндов являются:

1. Фотоколориметрический метод. Основан на образовании различных окрашенных комплексов (см. реакции на лактонное кольцо). Например, в случае использования пикриновой кислоты в щелочной среде (реакция Балье) в анализируемом растворе примерно через 30 мин развивается оранжевая окраска, и этот окрашенный комплекс имеет максимум поглощения в области 490 500 нм. При использовании ксантгидролового реактива (10 мг ксантгидрола растворяют в 99 мл ледяной уксусной кислоты и добавляют 1 мл концентрированной HCI) образуется комплекс малинового цвета с максимумом 528-532 нм (см. методику количественного определения в НД «Листья наперстянки шерстистой»).

2. Хроматоспектрофотометрический метод. Основан на сочетании метода хроматографии, позволяющего разделять целевые сердечные гликозиды, и метода спектрофотометрии или фотоколориметрии, позволяющего измерять оптическую плотность окрашенного комплекса (см. методику для листьев наперстянки шерстистой).

3. Флуориметрический метод. Основан на способности сердечных гликозндов флуоресцировать поддействием сильных кислот (Н2$ 0 4. Н3Р 0 4) или окислителей (ГеС14) после кратковременного облучения УФ-светом.

4. Полярографический метод. В основе данного метода лежит способность сердечных гликозндов восстанавливаться на ртутно-капельном электроде при потенциалах 1.9-2,8 В с образованием диффузных токов, волны которых пропорциональны концентрации сердечных гликозндов.

5. Денситометрическийметод. Данному методу предшествует хроматографическое разделение компонентов, интенсивность окрашенных или флуоресцирующих пятен которых сканируется денситометром