Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

Molekulyarnaya_biotekhnologia_Glik_B__Pasternak_Dzh

.pdf
Скачиваний:
106
Добавлен:
17.12.2022
Размер:
12.13 Mб
Скачать

Предметный указатель

581

Центрифугирование высокоскоро-

на основе бакуловирусов

стное, использование для сбо-

144-145, 145р, 156т

 

ра клеток 363—364

рансляция 118-121, 119р,

Центромера 501

 

121р

 

 

Цефалоспорин 26 Ор

эукариотические

135-

Цефалоспори наци лаза 265

136,

 

 

Цианамид 401т

 

13

 

 

Циклический AMP (cAMP) 107р,

- S, cerevisiae

136-137

 

108

- системы с использованием

Циклогексадионы 401т

культур клеток насекомых

Цил парный нейротрофический

143-149

 

 

фактор (CNTF) человека

Экспрессия генов 105

 

486т, 492

в грамотрицательньк

Цистеин 256т

бактериях

 

 

Цитозин 29-30, 29-ЗОр

 

111

 

 

Цитокинины 375р, 376

—крупномасштабных системах

Цыплята трансгенные 436—438,

 

109-111, ИОр

 

437р

при участии сильных

 

регули-

 

 

 

руемых промоторов

105-112

Частота аллелей 450—453,451т

- оптимизация

208, 209т

 

Челночные векторы 62,136,147,

- чужеродных генов в растениях

148р

 

382-386

 

 

 

Электропорация 76-77, 136,

ШайнаДраьзарно последовательность

 

380т

 

 

38

Элементы Ds 386,386р

 

Штамм-продуцент, усовершенст-

Эмфизема 484т

 

 

вование 17,255

Эндоглюканаза 69,297-298,

 

 

297р, 300

 

 

Экзоглюканаза 297-299,297р,

У нлп и у кл сауа Fok I 174

 

300

Эндонуклеазы рестрикции, крупно-

Экзонуклеаза III 166

масштабное производство

 

Экзоны 36, 37р, 472-476,

 

247-249,249р

 

473-475Р

Эндорфины

 

205т

— улавливание 474—476,

Энергетические ресурсы клетки,

474-47 5р

 

их расходование 123,

Экзотоксин А 223, 223р

 

127-130,

 

128т

Экзотоксины 223

Энкефалин

 

205т

Энтеротоксин холерный 235-236,

Экспрессивность варьирующая 442

 

237р

 

 

Экспрессируемый STS (eSTS)

 

 

 

Энхансерная последовательность 46,

465, 466р, 537

 

384

 

 

Экспрессирующие векторы 107

 

 

 

Эписомные

векторы

137

— для работы с клетками млеко-

Эритромицин

261,

263р

питающих 149—154,

Эритропоэтин

206т,

537

150-151Р

Эрлифгаые реакторы 357, 357р,

 

 

 

358-360

 

 

 

Эстераза 343

 

 

Этанол, повышение эффективности производства 289-292, 291-292Т

-получение с помощью целлю- лазных генов 300

-Z,mobitis 292-294,292т, 293р

-промышленное производство

287-289,288р

4-этилбензоат 282-283, 284-285р Этилен, растительный гормон

326-327, 327р

- синтез в растениях 405—406. 40

1-Г-этилен-6ис1триптофан] (ЭБТ) 521

Эукариотические экспрессирующие векторы 136,136р Эукариотический селективный

маркерный ген 135,382т Эукариоты, выделение целлюлаз- ных генов 298-300,299р

- использование в молекулярной биотехнологии 24

- клеточные стенки 24-25, 25р

-клонирование структурных генов 70-71

-культуры клеток 27-28

-модификация белков 27

—репликация 33—34

—структурные особенности клеток 24-25, 25р

-транскрипция 35-36, Збр,

45-47, 46р

-трансляция 38-39,3

-экспрессирующие векторы

135-155

«Эффект свидетеля» 503 Эффектор 42,43-44р

Ювенильный гормон личинок

343-344, 392т

Яйцо как источник белковых продуктов 438

Указатель латинских названий

Acetobactersuboxyden$ 251p

Acretnoniian chrysogenum 27т, 265,

266p

Agrobacterittm radiobacter 323, 324p

-\umefadens 62,373-379,379p

Akuligenes \ l l

-eulrophus 270-272, 271p

Arabidopsis ihaliatia 413 Aspergillus awamori 290

niduians 127

-niger 289-290

Asticcaulis excentricus 340 Auiograpfia californica 144,

144-145p, 344

Azptobacter chrococcum 307

Bacillus amyioiiquefaciens 124, 172,

173т, 288-290

-èrerà 27т, 291, 292т

circulons 169

-Kchenlformis 208,209т

megalerium 307

-stearvlhemwphilus 171-172, 172т,

290

-subtiKs 62,124-125,125т, 125p, 210,210p, 290

-thuringiensis 27т, 332-342, 334p, 343т, 335p, 337p, 338т, 341p, 389-393, 390т, 525

Bradyrhiwbium 307, 308т, 314-315,

315т, 320

Brassica 410

Brevibacterium 255-256

Camphylobacter hyoinfestittalis 189 Candida lipolytica 301т Caulodactercrescentus 340

Cellulomonasfimi 300 Chaetomiian cettutotyticum 301т Clavibacîerxyli 342

Closiridiutn thermasut/ttrogenes 291, 292т

Corynebacterium diphtheriae 211

-glutamicum 27, 27т, 123, 250, 252p, 255-257,256т, 257p

Enierodaciereglotnerans 325

- cloacae 111

Erwinia carofovora 402 -herbicota 27т,251-253р

Escherichiacoti 24-27, 27p, 41, 50,53, 58, 76-77, 105,115-116,122-L23, 126-127,146-147,148p, 160-162, 161p, 189,215, 218-221,219-221p, 247-249,249p, 254-255,254-255p, 267-268, 268p, 271, 271p, 285-286, 286p, 291, 292т, 338, 355-356, 360-363,361p, 367,379,379p, 400, 520,522

Flavobacterium okeanokottes 174 Fusarium solani 265

Haemophilusperainfluenzae 53

Hansenula polymorpha 27, 141—142

Hetiothis virescens 343

Klebsiettaowenae 401,401p

-pneumoniae 111, 310,310т, 312,

312p

Kluyveromycesfragitis 301т

- lactis 27, 140

Lacfobacillus amylovorm 294,295p - planiarum 294, 295p

Legionella pneumophita 189 Leptosphaeria maculons 195 Leistmama major 237-238, 238p

Methytophilusmethylotrophus 301-302,

301т

Myälusedulis 268,269p

Pénicillium chrysogenum 259, 260p

Pichia postons 27, 141-142,

142-143p

Providenda stuarfii 248,249p

Püeudomonas 27т, 223,223p, 252,

254-255p, 275-276,276т, 282-286,

283p, 286т

-aeruginosa 116

-cepacia 323

-diminuta 265

-fluorescent 111, 322,322p, 323т, 340, 341p

-putida 281,282т, 322,322p - stutzgri 111

-syringae 325,523 Pythium uttimum 323, 323т

Bfti&bium 27т, 307-308,308т, 314-315, 315-316T, 316-320, 318

- legumitwsarum 315,316т

-melihti 313, 316-320, 317p, 325

Khizoctonia solani 323,325 Ricketlsia nctetlsii 242

Saccharomyces cerevisiae 27, 236-140, 139p, 170, I70r,290, 301,477

 

 

Указатель латинских названий

583

disîaticus 27

- antibioticus 268

Vitreoscilla

122-130,264,355-356

Saccharopolyspora erythreae 261

- coelicolor 259

 

 

 

Salmonella 236,243

- Kvidans 123

 

 

 

iyphi 189

Synechococcus 340

Xanthomonas campestris 27т,

 

Schtzosaccharomyces pombe 27, 141,

Synechocysfis 340

266—267, 267p, 267т

 

143

 

-maltophilia

123

 

Semstia marcescens 111, 325

 

 

 

 

Shigpllaflexneri 2M

Thermus thermophilus 291, 292т

Yarrowia lipolytica 27,141

 

Spirulina maxima 301т

Trichodertnû harganum 325

 

 

 

Streptomyces 27т, 257-258,258p,

-/resd 27т, 300

Zymomonas mobitis 27т, 292-294,

260, 261т, 262p, 263, 26Ep

Trypanosoma crusi f 89-190

292т, 300, 393p

 

Оглавление

 

От редактора перевода .............................................

5

Предисловие .............................................................

7

Предисловие к первому изданию ........................

9

ЧАСТЫ

 

ОСНОВЫ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОТЕХ-

 

НОЛОГИИ...............................................................

13

Глава I. Молекулярно-биотехнологическая

 

революция .................................................................

15

Технология ре комби нантных ДНК..Т ............................

15

Возникновение молекулярной биотехно-

 

логии ...................................................................

16

Коммерциализация молекулярной био-

 

технологии..........................................................

19

Надежды и опасения .........................................

20

Заключение ........................................................

22

Литература ...............................................................

23

Контрольные вопросы ...........................................

23

Глава 2. Биологические системы, использу-

 

ющиеся в молекулярной биотехнологии................

24

Прокариоты и эукариоты....................................

24

Escherichia coli .........................................................

24

Saccharomyces cerevisiae .........................................

27

Культуры эукариотических клеток .....................

27

Заключение..............................................................

28

Литература ............................................................

28

Контрольные вопросы .......................................

28

Глава 3. ДНК, РНК и синтез белка ......................

29

Структура ДНК.....................................................

29

Репликация ...........................................................

32

Расшифровка генетической информации:

 

РНК и белок ......................................................

33

Трансляция ........................................................

38

Регуляция транскрипции у бактерий.................

41

Регуляция транскрипции у эукяриот ................

,45

Заключение .............................................................

47

Литература.............................................................

49

Конфольные вопросы...........................................

49

Глава 4. Технология рекомбинантных ДНК ........

50

Рестрицирующие эндонуклеазы.........................

50

Плазмидные векторы.............................................

56

Плазмидный вектор pBR322..........................

58

Трансформация и отбор ...............................

58

Другие плазмидные векторы ......

„ .................

60

Создание и скрининг библиотек.........................

 

62

Создание геномной библиотеки....................

 

62

Скрининг с помощью гибридизации.............

64

Иммунологический скрипит .......................

 

67

Скрининг по активности белка .......................

 

69

Клонирование структурных генов эукариот.........

70

Векторы для клонирования крупных фраг-

 

ментов ДНК ............................................................

 

71

Векторы на основе бактериофага λ ...................

71

Космиды ..............................................................

 

74

Векторные системы для клонирования

 

очень крупных фрагментов ДНК

...................

76

Генетическая трансформация прокариот..........

76

Перенос ДНК в E. coli ...................................

 

76

Электропорация.............................................

 

76

Конъюгация ...................................................

 

77

Заключение ........................................................

 

77

Литература..........................................................

 

78

Контрольные вопросы.......................................

 

79

Глава 5. Химический синтез, определение

 

11>клеотцлной последовательности и ампли-

 

фикация ДНК...........................................................

 

80

Химический синтез ДНК .................................

 

80

Фосфорамидитный метод..............................

 

80

Применение синтезированных олиго-

 

нуклеотидов .........................................................

 

85

Синтез генов ..................................................

 

86

Методы секвенирования ДНК .........................

 

88

ДидезоксинуклеотидныЙ метод секве-

 

пиронания ДНК ...............................................

 

89

Секвснирование ДНК с помощью вектора

 

па основе фага М13............................................

 

91

Прий мерпосредованная прогулка...............

93

Полимеразная цепная реакция ...........................

 

94

Получение с помошью ПЦР кДНК, от-

 

вечающих концам молекул мРНК.................

98

Синтез генов с помошью ПЦР ....................

 

102

Заключение ............................................................

 

102

Литература .............................................................

 

103

Контрольные вопросы .......................................

 

104

Глава 6. Оптимизация экспрессии генов,

 

клонированных в прокариитических

 

 

системах ..................................................................

 

105

Экспрессия генов при участии сильных

 

регулируемых промоторов ...............................

 

105

Оглавление 5S5

Регулируемые промоторы .............................

107

Получение больших количеств белковых

 

продуктов ........................................................

 

108

Крупномасштабные системы........................

109

Использование для экспрессии других

 

микроорганизмов...........................................

 

111

Химерные белки ................................................

 

112

Расщепление химерных белков ...................

112

Применение химерных белков ....................

113

Включение белков в поверхностные струк-

 

туры .................................................................

 

115

Однонаправленное тандемное

 

расположение генов...........................................

 

117

Трансляционные экспрессирующие век-

 

торы .....................................................................

 

118

Стабилизация белков.........................................

 

121

Рост в условиях недостатка кислорода............

122

Применение хозяйских штаммов с дефи-

 

цитом протеиназ ...........

, ............................... 122

Бактериальный «гемоглобин».......................

122

Инте1риция чужеродной ДНК в хромосо-

 

му хозяина ..........................................................

 

123

Повышение эффективности секреции ............

126

Метаболическая перегрузка.............................

127

Заключение.........................................................

 

130

Литература ..........................................................

 

131

Контрольные вопросы.......................................

 

133

Глава 7. Получение рекомбиыантных белков

 

с помощью эукариотических систем..................

135

Системы экспрессии Saccharomyces сеге-

 

visiae ........................................................................

 

136

Векторыдля S. cerevisiae...........................

,...137

Прямая экспрессия в S. cerevisiae................

137

Секреция гетерологичных белков, синте-

зируемых S. cerevisiae.....................................

 

139

Другие дрожжевые системы экспрессии..........

140

Синтез поверхностного антигена вируса

 

гепатита В........................................................

 

141

Синтез бычьего лизоцима С2 .......................

142

Системы экспрессии с использованием

 

культур клеток насекомых.................................

143

Система экспрессируюших векторов на

 

основе бакуловирусов....................................

 

144

Получение рекомбинантных бакулови-

русов................................................................

 

145

Создание челночного вектора на основе

 

бакуловирусов для E. coli и клеток на-

 

секомых ..............................................................

 

146

Выделение рекомбинантного белка из кле-

ток насекомых с помощью аффинного

 

связывания..

 

...149

Экспрессирующие векторы для работы с

 

клетками млекопитающих ................................

 

149

Селективные маркерные гены......................

150

Экспрессия двух клонированных генов

 

в одной клетке млекопитающих...................

151

Заключение.........................................................

 

154

Литература ..........................................................

 

155

Контрольные вопросы ......................................

 

156

Глава 8. Направленный мутагенез и генная

 

инженерия белков...............................................

 

158

Направленный мутагенез: методика...............

158

Олигонуклеотид-направленныЙ мутагенез

 

с использованием ДНК фага М13...............

159

Олигонуклеотид-направленныЙ мутагенез

 

с использованием плазмидной ДНК ..........

161

Олигонуклеотид-направленныЙ мутагенез

 

с использованием ПЦР-амплификации........

163

Случайный мутагенез с использованием

 

«вырожденных» олигонуклеотидных i iptm-

 

меров ...............................................................

 

163

Случайный мутагенез с использованием

 

аналогов нуклеотидов...................................

 

166

Генная инженерия белков................................

 

168

Образование дополнительных дисульфид-

 

ных связей ......................................

,.............. 168

Замена аспарагина на другие аминокис-

 

лоты..................................................................

 

170

Уменьшение числа свободных сульфгид-

 

рильных групп................................................

 

170

Повышение ферментативной активности .......

171

Изменеие ιюгребности ферментов в ме-

 

таллических кофакторах ...............................

 

172

Изменение специфичности фермента .........

173

Повышение стабильности и специфич-

 

ности фермента...............................................

 

174

Заключение .........................................................

 

175

Литература ...........................................................

 

175

Контрольные вопросы.......................................

 

176

МАСТЬ II

 

 

МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ

 

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ .........

179

Глава 9. Молекулярная диагностика ................

181

Методы иммунодиагностики

............................

182

Ферментный иммуносорбентныи анализ ......

182

Моноклональные антитела ...........................

184

Образование и отбор гибридных клеток ,...1Й5

Идентификация гибридных клеточных ли-

 

ний, секретирующих специфические ан-

 

титела..

............................ 185

586 Оглавление

Системы ДНК-диагностики ...........................

187

Гибридизационные зонды .........................

188

Диагностика малярии ................................

188

Выявление Trypanosoma cruzi......................

189

Нерадиоактивные методы детекции............

190

Геномная дактилоскопия............................

192

Использование полиморфных ДНК-маркеров ....

194

Молекулярная диагностика генетических

 

заболеваний ...................................................

195

Серповидноклеточная анемия ....................

195

Метод ПЦР/ЛОЗ ........................................

196

Генотипирование с использованием флуо-

 

ресцентно меченных ПЦР-праймеров ........

198

Мутации в разных сайтах одного гена........

199

Перспективы..................................................

201

Заключение ....................................................

201

Литература .....................................................

202

Контрольные вопросы ...................................

203

Глава 10. Микробиологаческое производство

 

лекарственных средств ........................................

204

Лекарственные препараты ................................

204

Выделение кДНК интерферонов ................

204

Интерфероны человека, полученные ме-

 

тодом генной инженерии ...........................

207

Гормон роста человека, полученный ме-

 

тодом генной инженерии ..........................

208

Оптимизация генной экспрессии ...............

208

Ферменты ......................................................

209

ДНКаза! ....................................................

209

Альгинат-лиаза ..........................................

209

Моноклональные антитела как лекарствен-

 

ные средства ..................................................

210

Структура и функции антител ...................

211

Профилактика отторжения транспланти-

 

рованных органов ......................................

212

Лекарственные вещества, связанные с мо-

 

ноклональными антителами.......................

212

Моноклональные антитела человека..........

214

Гибридные Моноклональные антитела че-

 

ловека и мыши ...........................................

215

Производство антител с помощью Е. coU.......

218

Лекарственные средства против ВИЧ ............

222

Заключение....................................................

224

Литература .....................................................

224

Контрольные вопросы ...................................

226

Глава 11. Вакцины................................................

227

Субъединичные вакцины ...............................

228

Противогерпетические вакцины .................

230

Противоящурные вакцины..........................

230

Противотуберкулезные вакцины.................

231

Пептидные вакцины...................................

 

231

Генная иммунизация ..................................

 

233

Аттенуированныс накщшы ..............................

 

234

Протинохолерпые вакцины..........................

 

235

Противосальмонеллезные вакцины ............

 

236

Противолейшманиозные вакцины .............

 

237

«Векторные* вакцины ....................................

 

238

Протинонирусные вакцины ........................

 

238

Противоб акте риал ьные вакцины................

 

242

Бактерии как системы доставки анти-

 

генов ...........................................................

 

242

Заключение ....................................................

 

243

Литература......................................................

 

244

Контрольные вопросы ....................................

 

246

Глава 12. Использование рскомбинантных

 

микроорганизмов для получения коммерчес-

 

ких продуктов.........................................................

 

247

Эндонуклсазы рссчрикции.............................

 

247

Малые биологические молекулы .........

, ......... 250

Синтез L-аскорбиновой кислоты ................

 

250

Синтез индиго ............................................

 

252

Синтез аминокислот ..................................

 

255

Антибиотики ..................................................

 

257

Клонирование генов биосинтеза антибио-

 

тиков...........................................................

 

259

Синтез ноных антибиотиков ........................

 

259

Разработка новых методов получения по-

 

ликетидных антибиотиков ..........................

 

260

Усовершенствование производства анти-

 

биотиков .....................................................

 

263

Биополимеры .................................................

 

266

Создание рекомбинантной бактерии

 

Xanthomonas campestris с целью получения

 

ксантановой слизи „ ....................................

 

266

Выделение генов биосинтеза меланина ......

267

Микробиологический синтез животного

 

биополимера с адгезивными свойствами .......

268

Микробиологический синтез каучука.........

270

Микробиологический синтез полигидрок-

 

сиалканоатов ..............................................

 

270

Заключение ....................................................

 

272

Литература .....................................................

 

272

Контрольные вопросы.......................................

 

274

Глава 13. Биодеградация токсичных соеди-

 

нений и утилизация биомассы ............................

 

275

Дсфадация ксенобиотиков с помощью

 

микроорганизмов ...............................................

 

275

Метаболические пути биодеградации ксе-

 

нобиотиков, созданные методами генной

 

инженерии .....................................................

 

276

Оглавление 587

Перенос плазмид............................................

 

276

Изменение генов ...........................................

 

281

Утилизация крахмала и Сахаров.......................

286

Промышленное производство фруктозы и

 

этанола ............................................................

 

287

Повышение эффективности производства

 

фруктозы и этанола ........................................

 

289

Zymomonas mobilis ...........................................

 

292

Получение силоса...........................................

 

294

Утилизация целлюлозы ...., ...............................294

Компоненты лигноцеллюлозы .....................

294

Выделение прокариотических иеллюлаз-

 

ных генов .........................................................

 

2%

Выделение эукариотических целлюлазных

 

генов.................................................................

 

298

Манипуляции с целлюлазными генами.......

300

Белок одноклеточных организмов...................

301

Заключение .........................................................

 

302

Литература...........................................................

 

303

Контрольные вопросы.......................................

 

305

Глава 14. Бактерии, стимулирующие рост

 

растений ..............................................................

 

306

Фиксация азота ..................................................

 

306

Нитрогеназа ........................................................

 

308

Компоненты....................................................

 

308

Генная инженерия кластера генов нитро-

 

геназы...............................................................

 

310

Гидрогеназа.........................................................

 

313

Метаболизм водорода ....................................

313

Модификация генов гидрогеназ...................

314

Образование клубеньков...................................

316

Конкуренция среди организмов, образу-

 

ющих клубеньки .............................................

 

316

Манипуляции с генами образования клу-

 

беньков ............................................................

 

316

Биоконтроль патогенных микроорганизмов .......

320

Сидсрофоры ....................................................

 

321

Антибиотики...................................................

 

322

Ферменты .................

, ..................................... 323

Образование кристаллов льда и антифриз-

 

ныс белки ........................................................

 

325

Стимуляция роста растений свободножи-

 

вушими бактериями...........................................

 

326

Заключение .........................................................

 

327

Литература ..........................................................

 

328

Контрольные вопросы .......................................

 

330

Глава 15. Микробные инсектициды...................

331

Токсин, синтезируемый Bacillus

 

thuringiensis .........................................................

 

332

Механизм действия и использование ..........

332

Идентификация генов токсинов .................

335

Генная инженерия генов токсинов

 

В. thuringiensis.................................................

336

Бакуловирусы как инструмент биоконт-

 

роля......................................................................

342

Механизм действия .......................................

342

Усиление биоконтроля с помощью генной

 

инженерии .......................................................

343

Заключение ........................................................

344

Литература..........................................................

345

Контрольные вопросы.......................................

347

Глава 16. Промышленный синтез белков при

 

участии рскомбинантных микроорганизмов ......

349

Рост микроорганизмов.....................................

350

Периодическая культура ...............................

351

Периодическая культура с добавлением

 

субстрата ........................................................

352

Непрерывная культура...................................

353

Повышение эффективности ферментации ......

354

Культуры с высокой плотностью..................

356

Биорсакторы .......................................................

357

Типичные курпномасштабные системы

 

ферментации.......................................................

359

Двухступенчатая ферментация в тандем-

 

ных эрлифтных биореакторах......................

360

Двухступенчатая ферментация в одном ре-

акторе с механическим перемешиванием ......

362

! 1ериодичсскам ферментация и периоди-

 

ческая ферментация с добавлением суб-

 

страта ...............................................................

363

Сбор клеток.........................................................

363

Разрушение клеток ............................................

365

Дальнейшая обработка .....................................

366

Солюбилизация белков .................................

367

Заключение.........................................................

367

Литература ..........................................................

368

Контрольные вопросы.......................................

369

ЧАСТЬШ

 

ЭУКАРИОТИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ................

371

Глава 17. Генная инженерия растений: ме-

 

тодология ...............................................................

373

Трансформация растений Tî-плазмидой

 

из Agrobacterium tumefaciens ...............................

373

Векторные системы на основе Ti-плазмид ....

377

Физические методы переноса генов в рас-

 

тительные клетки...............................................

379

Бомбардировка микрочастицами.....................

380

Применение репортерных генов при транс-

 

формации клеток растений ..............................

381

iH>;

Оглавление

 

Эксперименты по экспрессии чужеродных

 

генов в растениях ...............................................

382

Выделение различных промоторов и их

 

использование ................................................

383

Введение чужеродных генов в хлоропласт-

 

нуюДНК ......................................................

384

Получение трансгенных растений, не со-

 

держащих маркерных генов...............................

386

Заключение .........................................................

386

Литература...........................................................

387

Контрольные вопросы .......................................

388

Глава 18. Генная инженерия растений: при-

 

менение....................................................................

 

389

Выведение растений, устойчивых к насеко-

 

мым-вредителям, вирусам и гербицидам ..........

389

Растения, устойчивые к насекомым-

 

вредителям .....................................................

389

Растения, устойчиныс к вирусам .................

395

Растения, устойчивые к гербицидам ...........

400

Растения, устойчивые к грибам и бакте-

 

риям .................................................................

 

401

Получение растений, противостоящих не-

 

благоприятным воздействиям и старению.......

403

Окислительный стресс.................................

403

Солевой стресс ...............................................

404

Созревание плодов .........................................

405

Изменение окраски цветков .............................

406

Изменение пищевой ценности растений .......

407

Аминокислоты................................................

408

Липиды............................................................

408

Изменение вкуса и внешнего вида плодов .......

410

Изменение внешнего вида ............................

410

Изменение вкуса ............................................

411

Растения как биореакторы ...............................

412

Антитела.......................................................

412

Полимеры .......................................................

412

Чужеродные белки, аккумулирующиеся

 

в семенах .........................................................

413

Заключение.........................................................

413

Литература ..........................................................

413

Контрольные вопросы ......................................

416

Глава 19. Трансгенные животные......................

418

Трансгенные мыши; методология ....................

419

Использование рстровирусных векторов ...

419

Метод микроинъскций ДНК......................

420

Использование модифицированных эмб-

 

риональных стволовых клеток .....................

422

Клонирование с помошью переноса

 

ядра..................................................................

 

426

Перенос генов с помощью искусственных

дрожжевых хромосом...................................

 

428

Трансгенные мыши: применение ....................

 

430

Трансгенный крупный рогатый скот ...............

 

433

Трансгенные овцы, козы и свиньи .................

 

435

Трансгенные птицы...........................................

 

436

Трансгенные рыбы ..........................................

 

438

Заключение .........................................................

 

439

Литература ..........................................................

 

439

Контрольные вопросы.......................................

 

441

Глава 20. Молекулярная генетика человека ....

442

Генетическое сцепление и картирование

 

генов ....................................................................

 

444

Обнаружение и оценка генетического сцеп-

ления у человека ................................................

 

446

Анализ сцепления методом максимального

 

правдоподобия: логарифм соотношения

 

шансов (лод-балл)..........................................

 

447

Построение генетических карт хромосом

 

человека ............................................................

 

450

Генетический полиморфизм.........................

 

450

Полиморфизм длины рестрикционных

 

фрагментов .....................................................

 

451

Полиморфизм коротких тандемных пов-

 

торов ................................................................

 

454

Картирование локуса генетического забо-

 

левания в определенном районе хромо-

 

сомы ....................................................................

 

456

Построение мультилокусных хромосомных

 

карт человека......................................................

 

459

Локализация гена заболевания на карте

 

сцепления ..........................................

,.............460

Картирование с использованием радиаци-

 

онных гибридоп...............................................

 

460

Физическое картирование генома человека .....

462

Построение контигов из YAC-, ВАС- и

 

РАС-библиотек ..............................................

 

462

Построение контигов из космидных, Р1-

 

и λ-библиотек...............................................

 

463

Транскрипционное картирование ...............

 

465

Клонирование генов заболеваний человека .....

467

Выявление мутаций в генах человека ..........

467

Функциональное картирование ..................

 

468

Кандидатное картирование .........................

 

469

Позиционное картирование........................

 

469

Позиционно-кандидатмое картирование......

476

Программа *Геном человека*· ..........................

 

477

Заключение ......................................................

 

479

Литература ..........................................................

 

481

Контрольные вопросы .....................................

 

482

Глава 21. Генная терапия...................................

483

Генная терапия ex vivo ......................................

487

Генная терапия in vivo ......................................

493

Вирусные системы доставки генов ..................

493

Ретровирусные векторы ................................

493

Аденовирусные векторы ..............................

494

Векторы на основе аденоассоциированных

 

вирусов ............................................................

4%

Векторы на основе вируса простого герпеса.....

496

Невирусные системы доставки генов..............

498

Активация предшественника лекарствен-

 

ного вещества («пролскарства») .....................

502

Лекарственные средства па оснопе олиго-

 

нуклеотидов.........................................................

503

Синтез «антисмысловых» мРНК in vivo ......

504

«Антисмысловые» олигонуклеотиды как

 

лекарственные средства ...............................

506

Олигонуклеотиды, связывающиеся с бел-

 

ками: антитромбинопый аптамер .................

508

Рибозимы как лекарственные средства.......

508

Коррекция генетических дефектов с помо-

 

щью олигонуклеотидов ......................................

509

Заключение .........................................................

510

Литература.. .........................................................

511

Контрольные вопросы .......................................

513

ЧАСТЬ IV

 

КОНТРОЛЬ ИССЛЕДОВАНИЙ В ОБЛАС-

 

ТИ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОТЕХНОЛО-

 

ГИИ И ПАТЕНТОВАНИЕ ЬИОТЕХНОЛО-

 

ГИЧЕСКИХ ИЗОБРЕТЕНИЙ........................

515

Глава 22. Контроль применения биотехноло-

 

гических методов.................................................

517

Контроль экспериментов с рекомбинант-

 

нымиДНК........................................................

518

Контроль за производством и потреблением

 

пищевых продуктов и пишевых добавок............

519

Химозин...

...520

 

Оглавление

 

589

Триптофан ...................................................

 

 

520

Бычий соматотропин ..................................

 

521

Контролируемое шсвобождспие генети-

 

чески модифицированных организмов в

 

 

окружающую среду............................................

 

523

Pseudomonas

syringae, не образующие

крис-

таллов льда .....................................................

 

 

523

Открытые полевые испытания других ге-

нетически

модифицированных

организ-

мов ...................................................................

 

 

525

Генная терапия человека..................................

 

526

Политика в области генной терапии сома-

тических клеток.............................................

 

527

Накопление дефектных генов в будущих

 

поколениях.....................................................

 

 

528

Генная терапия клеток зародышевой линии.....

529

Клонирование человека................................

 

529

Заключение ........................................................

 

 

530

Литература........................................................

 

 

531

Контрольные вопросы .....................................

 

532

Глава 23. Патентование биотехнологичес-

 

ких изобретений

.....................................................

 

533

Общие вопросы патентования изобретений .......

534

Патентование изобретений в разных стра-

 

нах .......................................................................

 

 

536

Патентование ДНК-последовательностей......

537

Патентование многоклеточных организмов .....

539

Патентование и фундаментальные иссле-

 

дования ..............................................................

 

 

539

Заключение ......................................................

 

 

541

Литература........................................................

 

 

541

Контрольные вопросы......................................

 

542

Словарь терминов .............................................

 

543

Предметный указатель ......................................

 

564

Указатель латинских названий ..

 

...577

Учебное издание

Бернард Глик, Джек Пастернак

МОЛЕКУЛЯРНАЯ БИОТЕХНОЛОГИЯ

Зав. редакцией канд. биол. наук М. Р. Погосбекова Ведущий редактор Н. Н. Шафрановская Редактор Р. Ф. Куликова Художник Н. В. Зотова

Технический редактор Е. В. Денюкова Корректор Р. Ф. Куликова

Оригинал-макет подготовлен Л. К. Васильевой График-дизайнеρ С. В. Машин Оператор Н. Е. Кизилова

Лицензия ЛР № 010174 от 20.05.97 г.

Подписано к печати 10.09,01. Формат 84 χ 108ι/κ>. Бумага офсетная. Печать офсетная. Гарнитура NewionC. О&ьем

18,50 бум, л. Усл. печ. л. 62.16. Уч.-изд я. 62,07. Изд. № 4/9698. Тираж 5000 экз. Зак. 5185.

Издательство «Мир» Министерства РФ по делам печати, телерадиовещания и средств массовых коммуникации 107996, ГСП-6, Москва, 1-Й РИЖСКИЙ пер,, 2.

Диапозитивы изготовлены в издательстве «Мир» Отпечатано в полном соответствии С качеством предоставленных диапозитивов

в ОАО «Можайский полиграфический комбинат», 143200, г. Можайск, ул. Мира, 93

Соседние файлы в предмете Биотехнология