3. Практическая работа.
Выполнение заданий.
Лабораторная работа № 1. Бактериологическое исследование мокроты больного с подозрением на пневмонию
1. Для исследования берется мокрота, собранная утром натощак в специальную склянку с широким горлышком завинчивающейся пробкой.
.2. Из мокроты готовят одновременно 2 препарата («мазки-близнецы»), один из них окрашивается по Граму, другой - по Бурри-Гинсу, микроскопируют.
3. Посев мокроты на кровяной или сывороточный МПА, МПБ, с добавлением 1% глюкозы.
4. Бактериологический метод исследования - посев мокроты на кровяной агар и сывороточный МПБ. После инкубирования при 37°С в течение 24 часов - отбор подозрительных колоний, приготовление из них фиксированного препарата, окраска по Граму и Бурри-Гинсу, микроскопия. Идентификация проводится с чистой культурой (проба с инулином и желчью; РА на стекле с типовыми диагностическими сыворотками).
Одновременно осуществляется биологический метод исследования путем заражения белых мышей. Проводится определение чувствительности выделенного возбудителя к антибиотикам.
В день поступления проводятся также ускоренные методы диагностики (реакция Нейфельда и метод Сейбина).
Диагностика подтверждается серологическим методом - с целью выявления антител к возбудителю в сыворотке крови больного - ставится РСК.
После завершения исследований учитываются и анализируются полученные результаты и выдается окончательный ответ.
Лабораторная работа № 2. Приготовление фиксированных препаратов из смывов 10 поверхностей кафедры микробиологии, выявление наиболее загрязненных поверхностей.
Проведение люминесцентной микроскопии:
- на предметное стекло нанести исследуемый материал, высушить, фиксировать в смеси Никифорова;
- обработка флюоресцирующими диагностическими сыворотками;
- микроскопия в люминесцентном микроскопе (лаборатория бактериологическая).
Лабораторная работа № 3. Лигирование плазмидной ДНК с фрагментами хромосомной ДНК. Приготовление реактивов для выделение хромосомной ДНК. Выделение хромосомной ДНК по методу Мармура. Очистка выделенной ДНК от РНК. Рестрикция хромосомной ДНК по Bam HI – cайту (лаборатория молекулярной биологии).
4. Ситуационные задачи для разбора на занятии
1) Алгоритм разбора задач
- прочитать внимательно условие задачи;
- ознакомиться с заданиями;
- дать ответ на поставленные вопросы;
- сделать выводы;
- составить план диагностики и терапии.
2) Пример задачи с разбором по алгоритму:
Задача №1.
В отделении у одной из пациентов появились признаки цитомегаловирусной инфекции: головные боли, высокая температура, сыпь папулезно-везиеулярная; из анамнеза жизни известно, что инфицирована Цитомегаловирусом внутриутробно.
Задание:
К какому семейству относятся цитомегаловирусы?
Эпидемиология цитомегаловирусной инфекции (источник инфекции, механизм, факторы, и пути передачи инфекции)?
Какими путями происходит заражение плода?
Характер исследуемого материала?
Специфическая профилактика цитомегаловирусной инфекции?
Решение:
К какому семейству относятся цитомегаловирусы?
Цитомегаловирусы относятся к семейству герпесвирусов (ДНК-содержащих).
Эпидемиология цитомегаловирусной инфекции (источник инфекции, механизм, факторы, и пути передачи инфекции)?
Источник - больной человек и вирусоноситель.
Механизм - аэрогенный, контактный, кровяной, реже - фекально-оральный.
Факторы - воздух, биологические жидкости, кровь.
Пути - воздушно-капельный, контактно-половой, контактно-ротовой,
парентеральный, контактно-родовой, капельный, плацентарный, реже
алиментарный.
Какими путями происходит заражение плода?
Заражение плода произошло плацентарным путем.
Характер исследуемого материала?
Исследуемым материалом служит кровь, мокрота, слюна, испражнения, спинно-мозговая жидкость.
Специфическая профилактика цитомегаловирусной инфекции?
Применяется живая вакцина либо в виде моновакцины, либо в сочетании с
вакциной против краснухи.