2. Антитоксические сыворотки. Методы получения. Диаферм. Применение антитоксических сывороток в медицине.

Антитоксические гетерогенные сыворотки получаются путем гипериммунизации различных животных. Они называются гетерогенными т.к. содержат чужеродные для человека сывороточные белки. Более предпочтительным является применение гомологичных антитоксических сывороток, для получения которых используется сыворотка переболевших людей (коревая, паротидная), или специально иммунизированных доноров(противостолбнячная, противоботулинистическая), сыворотка из плацентарной а так же абортивной крови, содержащие антитела к ряду возбудителей инфекционных болезней вследствие вакцинации или перенесенного заболевания. Для очистки и концентрирования антитоксических сывороток используют методы: осаждение спиртом или ацетоном на холоде, обработка ферментами, аффинная хроматография, ультрафильтрация. Основным из них, применяемым, является метод «Диаферм-3», включающий ферментативный (пептический) гидролиз, позволяющий освободиться от неспецифических белков сыворотки.

Антитоксические сыворотки применяются для лечения токсинемических инфекций (столбняк, ботулизм, дифтерия, газовая гангрена). После введения антитоксических сывороток возможны осложнения в виде анафилактического шока и сывороточной болезни, поэтому пред введением препаратов ставят аллергическую пробу на чувствительность к ним пациента, а вводят их дробно, по Безредке.

3. Аденовирусы. Характеристика возбудителей, принципы лабораторной диагностики.

Впервые выделены в 1953 г. В отличие от других респираторных вирусов содержат ДНК, относятся к семейству Adenoviridae, роду Mastadenovirus.

Структура и химический состав. Нуклеокапсид вириона представляет собой сферические частицы диаметром 70-90 нм. Капсид построен из 252 капсомеров по кубическому типу симметрии в форме икосаэдра. От 12 вершин икосаэдра отходят отростки — фибры (нити). Внешняя оболочка отсутствует.Аденовирусы состоят из ДНК и белков.Геном аденовирусов состоит из двунитевой линейной ДНК .С молекулой ДНК ковалентно связан внутренний белок, инициирующий репликацию ДНК. Внутренние белки в комплексе с ДНК формируют сердцевину вириона, расположенную под вершинами капсида.

Антигены. В составе капсида содержатся типоспецифические антигены — гликопротеиновые нити, которые обладают гемагглюти-нирующими свойствами. Нуклеокапсид вириона является комплементсвязывающим антигеном, идентичным для разных серотипов аденовирусов человека.

Культивирование и репродукция. Аденовирусы культивируют в первичной культуре клеток почки эмбриона человека, линии клеток Hela, Нер-2 и др. ЦПД аденовирусов связано не только с их репродукцией, но и прямым токсическим действием .Аденовирусы адсорбируются на клеточных рецепторах с помощью нитей. Депротеинизация проникших в клетку вирионов начинается в цитоплазме и завершается в ядре, где освобождается ДНК с прикрепленным к ней терминальным белком. Транскрипция генома и репликация вирусной ДНК происходят в ядре с помощью клеточных ферментов. Вначале синтезируются иРНК, кодирующие синтез вирусоспецифических ферментов, а затем иРНК,несущие информацию о синтезе капсидных белков и нитей. Сборка вирусных частиц происходит в ядре, где образуются кристаллоподобные включения. В каждой клетке синтезируется несколько сотен вирусных частиц. Выход аденовирусов сопровождается разрушением клетки хозяина. Цикл репродукции аденовирусов в клетке продолжается 14-24 ч.

Патогенез. В организме человека первичная репродукция аденовирусов происходит в эпителиальных клетках слизистой оболочки дыхательных путей и кишечника, в конъюнктиве глаза и в лимфоидной ткани (миндалины, мезентериальные лимфатические узлы). При циркуляции в крови аденовирусы поражают эндотелий сосудов. Это приводит к экссудативному воспалению слизистых оболочек, к образованию фибринозных пленок и некрозу. Аденовирусы могут проникать через плаценту, вызывая внутриутробные заболевания, аномалии развития плода, смертельные пневмонии новорожденных.

Чаще всего аденовирусы вызывают острые респираторные заболевания

(фарингиты, ларингиты, трахеобронхиты). У детей и у пожилых людей могут развиться затяжные формы мелкоочаговой или интерстициальной аденовирусной пневмонии (серотипы 3, 4, 7, 14). Для аденовирусной инфекции характерно сочетанное поражение слизистой оболочки и лимфоидных тканей миндалин, аденоидов и конъюнктивы

глаза (фарингоконъюнктивальная лихорадка). Нередки случаи эпидемических вспышек конъюнктивитов одного или обоих глаз (серотипы3, 4, 8, 19). Аденовирусные конъюнктивиты и кератоконъюнктивиты нередко являются госпитальными инфекциями. Кишечныеаденовирусы (серотипы 40, 41) вызывают у детей младшего возраста

вспышки гастроэнтерита. В некоторых случаях наблюдаются длительная персистенция аденовирусов в организме человека и переход в хроническую форму инфекции (хронические тонзиллиты, гаймориты, ангины и др.). У детей возможна аллергизация организма, сопроводающаяся развитием астматического бронхита и ларинготрахеита. Ряд

серотипов аденовирусов индуцирует опухоли у животных.

Иммунитет. После перенесения заболевания формируется типоспецифический гуморальный иммунитет, связанный с синтезом антител класса IgM и IgG, в носовом секрете выявляются SIgA. Иммунитет не длительный, повторные заболевания наблюдаются у детей через 8-12 мес. после перенесения первичной инфекции.

Эпидемиология. Источником инфекции являются больные с острой или латентной аденовирусной инфекцией. Инфекция передается воздушно-капельным путем. «Кишечные» аденовирусы выделяются с фекалиями и распространяются фекально-оральным путем. Аденовирусные инфекции чаще поражают детей в возрасте от 6 мес. до 2 лет. Аденовирусы обладают сравнительно высокой устойчивостью к действию

физических и химических факторов. Они способны длительноевремя сохранять инфекционность во внешней среде, особенно при пониженных температурах. Аденовирусы инактивируются через несколько минут при температуре выше 56°С и при УФ-облучении.

Профилактика. Для профилактики и раннего лечения аденовирусных инфекций применяют лейкоцитарный интерферон, а также фермент дезоксирибонуклеазу.

В США с успехом применяется живая аденовирусная вакцина для иммунизации военнослужащих.

Лабораторная диагностика. Для выявления вирусного антигена в эпителиальных клетках слизистой оболочки дыхательных путей применяют иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы, а в испражнениях — иммуноэлектронную микроскопию. Выделение аденовирусов проводится путем заражения чувствительных культур

клеток с последующей идентификацией вируса в РСК, а затем в реакции нейтрализации и РТГА. Серодиагностика проводится в тех же реакциях с парными сыворотками

больных людей.

Билет №26

1.Основы классификации микробов. Понятие о виде, культуре, штамме. Биологические особенности прокариотов.

Микробы-это мельчайшие формы жизни ,которые в процессе эволюции развились в ветвь самостоятельных организмов.Они не видимы невооруженным глазом и не проходят через бактериальные фильтры В таксономическом отношении микроорганизмы очень разнообразны. Они включают прионы, вирусы, бактерии, водоросли, грибы, простейшие и даже микроскопические многоклеточные животные.

По наличию и строению клеток вся живая природа может быть разделена на прокариоты (не имеющие истинного ядра), эукариоты (имеющие ядро) и не имеющие клеточного строения формы жизни. Последние для своего существования нуждаются в клетках, т.е. являются внутриклеточными формами жизни все живое делят на 4 царства жизни: эукариоты, эубактерии, архебактерии, вирусы и плазмиды.

К прокариотам, объединяющим эубактерии и архебактерии, относят бактерии, низшие (сине- зеленые) водоросли, спирохеты, актиномицеты, архебактерии, риккетсии, хламидии, микоплазмы. Простейшие, дрожжи и нитчатые грибы- эукариоты.

В основе систематики микроорган.лежат фенотипические признаки:морфологически. Фенопипическ. И биохимические.Морфологическик характериз .форму и структуру микробной клетки;физиологич. Особенности роста на искусствен. Питат средах в определенных условиях культивирования и морфологию колоний на твердых средах;биохимические –тип окислительного и пластического метаболизма, ферментацию углеводов,протеолотические и др. признаки.В настоящее время исполязуют ряд таксономических систем:нумерическая таксономия,хемотаксономия,генетическая и генетическая тасономия.

Нумерическая таксономияпризнает равноценность всех фенотипических признаков.Видовая принадлежность исследуемого микроорг.устанавливается по числу совподающих признаков.Для хеотаксономии применяют физико-химич. и биохимические признаки.Генотаксономия основана на генетических признаках, которыу устанавлив в опытах трансформации, трансдукции и коньюгации.Серотоксономия на определении соответствующих антигенов.

Вид-эволюционно сложившуюся совокупность особей, имеющих единый тип оранизации, который в стандартных условиях проявляется сходными фенотипическими признаками:морфологическими,физиологическими и биохим .

Штммом называют культуру, выделенную из определенного источнока,или из-за одного и тогоже источника в разное время.Культура-микровные особи одного и того же вида, выращенные из одной клетки на твердой питательной среде. Основные отличия прокариот от эукариот состоят в том, что прокариоты не имеют1морфологически оформленного ядра (нет ядерной мембраны и отсутствует ядрышко), его эквивалентом является нуклеоид, или генофор, представляющий собой замкнутую кольцевую двунитевую молекулу ДНК, прикрепленную в одной точке к цитоплазматической мембране; по аналогии с эукариотами эту молекулу называют хромосомной бактерией; 2сетчатого аппарата Гольджи; 3эндоплазматической сети; 4 митохондрий.Различия отсутствие у прокариот мембран, с помощю которых органеллы микробной клетки ограничены от цитоплазмы.Система мембран у пракориот представлена только цитоплазмотической мембраной, отграничивающая цитоплазму от окр. Среды.Окислит-воттановит ферменты локализованы в мезосомах.У прокариот отсутствует митоз.они размножаются путем бинарного деления и существуют в гаплойдном ссостоянии.