Эритротесты цоликлон анти-А (розовый цвет) и анти-В (синий цвет) предназначены для определения групп крови человека взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов анти-А и анти-В.

Проанализируйте возможные причины возникновения и последствия развития резус-конфликта при переливании резус-несовместимой крови и в системе мать-плод. Уметь интерпретировать результаты определения резус-фактора с помощью стандартных цоликлонов

Резус-фактор. Кроме антигенов, определяющих четыре названные группы крови (система АВО), эритроциты могут содержать в разных комбинациях и многие другие антигены. Среди них особенно большое значение имеет резус-фактор.

Причины резус конфликта между матерью и плодом. Rh-антиген (резус-фактор) не имеет в плазме

"врожденных" антител. Они могут вырабатываться иммунной системой резус-отрицательного реципиента при переливании ему резус-положительной крови или организмом резус-отрицательной матери, беременной резус-положительным плодом, если плацента имеет дефекты, и вследствие нарушения ее барьерных функций кровь плода и матери смешиваются. В первом случае повторное переливание резус-несовместимой крови может привести к аутоиммунному гемолизу, так как резус-антитела являются сильнейшими гемолитическими ядрами. Во втором случае, если целостность плаценты нарушена, иммунная система матери вырабатывает резус-антитела к эритроцитам плода, что может привести к частичному, а при высоком титре антител к полному, гемолизу крови плода и его внутриутробной гибели.

Метод определения резус-фактора крови. Классическая тепловая проба на водяной бане в настоящее время не проводится. В клинической лабораторной практике применяют экспресс-метод.

Наденьте перчатки. Нанесите на тарелку по одной капле контрольной сыворотки (справа — К) и стандартной антирезус сыворотки (слева — Rh). Рядом с каждой сывороткой поместите по одной капле исследуемой крови (размер капли крови должен быть вдвое меньше, чем капля сыворотки).

Последующие манипуляции должны начинаться с контрольной сыворотки, но не наоборот! (в противном случае пользоваться одним концом палочки нельзя). Стеклянной палочкой перемешайте каплю крови с каплей сыворотки (контрольной), образуя общую каплю размером с копеечную монету. Затем подобным же образом перемешайте кровь с антирезус-сывороткой. Покачивая тарелку, наблюдайте за реакцией. Для лучшего выявления наличия или отсутствия агглютинации можно добавить в обе пробы по капле физиологического раствора.

Если исследуемая кровь резус-положительна, то в пробе со стандартной антирезус сывороткой наблюдается агглютинация эритроцитов (в контроле ее быть не должно). Если кровь резус-отрицательная, агглютинация отсутствует в обеих пробах. При возникновении агглютинации в пробе с контрольной сывороткой определение следует повторить либо проводить другими методами.

Еще более прост метод определения Rh-фактора с помощью стандартных цоликлонов. Каплю стандартной сыворотки "цоли-клон анти-Д-супер" нанесите на сухое стекло. Добавьте 1 каплю исследуемой крови, смешайте. При наличии агглютинации кровь считают резус-положительной, а при отсутствии агглютинации — отрицательной.

Стандартные цоликлоны

Существуют следующие виды цоликлонов: цоликлон анти-А (розовый), анти-В, и анти-D-супер, это солевые растворы искусственно полученных антител к антигенам, которые находятся на поверхности эритроцитов(антитела соответственно Альфа, Бета и для положительного резуса).

А и В - для определения групп крови, а D - резус-фактора

Например: на предметное стекло капают раствор цоликлона анти-А, потом каплю крови. Стеклянной палочкой их перемешивают. Если произойдёт агглютинация, то есть сворачивание, значит реакция прошла, предположительно группа крови 2(вторая), так как при такой группе на пов-ти эритроцитов есть антигены А к антителам Альфа. Далее на новом предметном стекле делают тоже самое, но с цоликлоном анти-В. Если есть реакция, то это 4 группа крови, если нет, то тогда 2.

Проанализируйте физиологические основы переливания крови. Правила переливания крови. Охарактеризуйте гемотрансфузионные среды

Физиологические основы и правила переливания крови.

1. Прежде чем приступить к трансфузии, врач должен:

а) Определить показания к трансфузии, выбрать трансфузионную среду.

б) Определить групповую принадлежность крови больного с помощью стандартных сывороток или синтетических цоликлонов, независимо от того, имеются ли эти данные в выписке, истории болезни, паспорте и др.

в) Определить групповую принадлежность крови донора из каждого флакона, предназначенного для переливания.

г) Провести пробы на совместимость.

групповую по системе АВ0

по резус-фактору (экспресс-метод)

биологическую и индивидуальную

-до переливания определяется групповая принадлежность и резус-фактор крови донора и реципиента, переливают кровь одной групповой принадлежности;

-перед гемотрансфузией (переливанием крови) проводят пробу на биологическую совместимость;

-в случае отсутствия реакции агглютинации при проведении биологической пробы проводят пробу на индивидуальную совместимость: при введении реципиенту 10 мл донорской крови в течение 10-15 мин наблюдают за состоянием пациента, при отсутствии жалоб и реакций со стороны организма начинают переливание крови;

-кровь переливается в ограниченном количестве (не более 150 мл).

2. Во время трансфузии внимательно следят за: а) общим самочувствием больного; б) жалобами на боли в поясничной области;

в) состоянием пульса, дыхания, артериального давления. 3. После трансфузии больному необходимо:

а) соблюдать постельный режим в течение 2—3 ч; б) производить почасовое измерение температуры тела в течение 3 ч; в) сделать общий анализ крови; г) сделать общий анализ мочи;

д) измерять диурез в течение суток (после массивных трансфузий и в тяжелых случаях реанимации и интенсивной терапии).

4. Подробно документировать в истории болезни и в журнале по форме № 9 операцию переливания крови, ее компонентов и кровезаменителей.

ОСНОВНЫЕ ГЕМОТРАНСФУЗИОННЫЕ СРЕДЫ Консервированная кровь

Готовят с применением одного из консервирующих растворов. Роль стабилизатора при этом играет цитрат натрия, который связывает ионы кальция и предупреждает свёртывание крови, роль консерванта - декстроза, сахароза и др. В состав консервирующих растворов входят антибиотики. Консерванты добавляют в соотношении с кровью 1:4. Хранят кровь при температуре 4-6 ?С. Кровь, консервированная раствором глюгицир, хранится 21 день, раствором циглюфад - 35 дней. В консервированной крови менее устойчивы к хранению факторы гемостаза и иммунные факторы, функция связывания кислорода сохраняется в течение длительного периода. Поэтому с целью остановки кровотечения переливают кровь со сроком хранения не более 2-3 сут, с целью иммунокоррекции - не более 5-7 сут. При острой кровопотере, острой гипоксии целесообразно использовать кровь небольших (3-5 дней) сроков хранения.

Свежецитратная кровь

Вкачестве стабилизирующего раствора используют 6% раствор цитрата натрия в соотношении с кровью 1:10. Такую кровь используют непосредственно после заготовки или в ближайшие часы.

Гепаринизированная кровь

Гепаринизированную кровь применяют для заполнения аппаратов искусственного кровообращения. В качестве стабилизатора и консерванта используют гепарин натрия с декстрозой и хлорамфениколом. Гепаринизированную кровь хранят при температуре 4 0С. Срок хранения - 1 сут.

Компоненты крови

Всовременных условиях в основном используют компоненты (отдельные составные части) крови. Трансфузии цельной крови проводят всё реже из-за возможных посттрансфузионных реакций и осложнений, обусловленных большим количеством антигенных факторов, имеющихся в цельной крови. Кроме того, лечебный эффект компонентных трансфузий выше, так как при этом осуществляется целенаправленное воздействие на организм. Существуют определённые показания к компонентной трансфузии: при анемии, кровопотере, кровотечении показаны трансфузии эритроцитарной массы; при лейкопении, агранулоцитозе, иммунодефицитом состоянии - лейкоцитарной массы; при тромбоцитопении - тромбоцитарной массы; при гиподиспротеинемии, нарушениях свёртывающей системы, дефиците ОЦК - плазмы крови, альбумина, протеина.

Компонентная гемотрансфузионная терапия позволяет получить хороший лечебный эффект при меньшем расходовании крови, что имеет большую экономическую значимость.

Эритроцитарная масса

Эритроцитарную массу получают из цельной крови, из которой удалено 60-65% плазмы путём отстаивания или центрифугирования. Она отличается от донорской крови меньшим объёмом плазмы и высокой концентрацией эритроцитов (гематокритное

число 0,65-0,80). Выпускают во флаконах или пластиковых мешках. Хранят при температуре 4-6 ?С.

Проанализируйте механизмы свертывания крови, обеспечивающие поддержание целостности сосудистой стенки и остановку кровотечения: сосудисто-тромбоцитарный и коагуляционный гемостаз, факторы свертывания крови. Объяснить роль фибринолиза в обеспечении кровотока, механизмы активации системы фибринолиза

Гемостаз — остановка кровотечения при повреждении стенки сосуда, которая является результатом спазма кровеносных сосудов и формирования кровяного сгустка.

Система гемостаза включает в себя форменные элементы крови (главным образом тромбоциты), сосудистую стенку, плазменные факторы свертывания и противосвертывания. Важная роль в свертывании крови принадлежит биологически активным веществам, способствующим свертыванию крови, препятствующим свертыванию крови и разжижающим уже свернувшуюся кровь. Эти вещества содержатся в плазме и форменных элементах крови, а также в тканях, в том числе сосудистой стенки.

В системе свертывания крови различают сосудисто-тромбоцитарный (первичный) и коагуляционный (вторичный) механизмы гемостаза.

I.Cосудисто-тромбоцитарный гемостаз. (2-4 минуты) Остановка кровотечения начинается с первичной реакции крови на травму ткани и сосуда, важнейшая роль в которой принадлежит тромбоцитам.

Роль тромбоцитов в первичном гемостазе определяется их способностью прилипать к поверхности сосудистой стенки у места повреждения (адгезия), подвергаться биохимическим и структурным изменениям, высвобождать содержимое своих гранул (реакция освобождения) и склеиваться друг с другом (агрегация).

А. Сосудистый

1.повреждение стенки сосуда (порез,ушиб)

2.первичный сосудистый спазм: болевые рецепторы  ЦНС: головной мозг (промежуточный мозг)  спинной мозг (боковые рога)  симпатическаяВНСгладкие миоцитысужение

3.вторичный: разрушение клеток эндотелия сосудов  выделение Адреналина, Норадреналина, Тромбоксан А2, серотонинсужение сосудов

Б. Тромоцитарный

1. разрушение клетокоткрываются коллагеновые волокнана них + заряд 2. Адгезия и агрегация тромбоцитов - (отриц.заряд) к коллагеновым волокнам с зарядом +рыхлая пробка 3.фиброкинетин (фактор Виллебрандта) изменение формы тромбоцитовагрегация тромбоцитов между собойрыхлая тромбоцитарная пробка 4.ретракция (уплотнение + фибрин, эритроцин) = тромб

II. Коагуляционный гемостаз (5-10 минут)

А. I фаза:

-внешний путь (плазма): разрушение клеток сосудатканевой тромбопластин (внешняя протромбиназа) -внутренний путь: фактор Хангельмана неактфактор Хангельмана акт коллаген, факторы XIV, XV, Р3(активируют фактор Хангельмана) протромбиназа

Б. II фаза

Протромбин (фактор II неакт)  (протромбиназа катализирует)  тромбин (фактор II активный)

В. III фаза

Фибриноген (фактор I)  (тромбин (фактор II активный)) растворимый мономер фибринарастворимый полимер(Са2+(фактор XIIIнеакт)) растворимый полимер (фактор XIIIакт) красный тромбретракцияфибриновый тромб Адгезия (прилипание) тромбоцитов происходит только к поврежденному эндотелию при контакте с

соединительной тканью, главным образом с коллагеном.

Механизм адгезии связан с дзета-потенциалом тромбоцитов: группы отрицательно заряженных сиаловых кислот на их мембране реагируют с положительно заряженными аминогруппами коллагена сосудистой стенки. Важную роль в адгезии тромбоцитов играют двухвалентные катионы и фактор Виллебранда (тканевый фактор, синтезируемый в эндотелии сосудов, для которого на тромбоцитах имеются специфические рецепторы).

доминируют над свертывающими механизмами, что предотвращает спонтанное внутрисосудистое тромбообразование. Процесс коагуляции ограничивается зоной повреждения сосудов и тканей и не распространяется на весь кровоток.

Противосвертывающая система включает антикоагулянтную и фибринолитическую системы.

Основная функция противосвертывающей системы это поддержание крови в жидком состоянии, контроль скорости активации факторов свертывания и реакции между ними, устранение выполнивших свою роль фибриновых, тромбоцитарных, кровяных тромбов.

Противосвертывающая система поддерживает гемостатический гомеостаз через антикоагулянтную систему

ифибринолитическое действие.

Вантикоагулянтное звено включены различные вещества, которые вырабатываются как генетически детерминированные компоненты организма или возникают в процессе ввертывания крови и фибринолиза. Функция этих веществ:

1) препятствование активации факторов свертывания крови;

2) нейтрализация и ингибирование активных факторов коагуляции; 3) блокирование активации тромбоцитов, тромбоцитарных факторов (3 и 4) на стадиях протромбиназо- и тромбинообразования;

4) способствуют растворению фибрина, а также препятствуют полимеризации фибрин-мономеров. Различают первичные антикоагулянты, которые синтезируются в организме и выбрасываются в кровь,

где взаимодействуют с активными факторами коагуляции, нейтрализуя их. Поэтому кровь остается в жидком состоянии. Гепарин, гирудин, фосфатидилсерин, сфингомиелин, антитромбинIII.

Гепарин – физиологический ингибитор, обладающий прямым действием. Особенно богаты гепарином печень, легкие и мышцы. Гепарин ингибирует превращение протромбина в тромбин, тормозя действие образовавшегося тромбопластина.

Гирудин – выделяется из слюнных желез пиявки, препятствует образованию фибрина.

Антитромбин III (АТ III) - один из важнейших белков противосвертывающей системы. Он инактивирует III, XII, XI, X, IX факторы свертывания крови, в результате фибриноген не может превращаться в фибрин и образовывать сгустки. Действие антитромбина III многократно усиливается в присутствие гепарина.

Уменьшение образования в организме антитромбина III происходит при наследственной предрасположенности. Гетерозиготное носительство встречается у 0,1-0,3% здорового населения, что повышает риск тромбообразования в 5-10 раз.

Синтез антитромбина также снижен при заболеваниях печени. При заболеваниях почек может происходить потеря антитромбина III из организма.

При снижение в организме у пациента уровня антитромбина III на 50% от нормы возникает риск развития тромбозов и эмболий. При всех формах дефицита антитромбина III возникает ДВС-синдром.

Вторичные естественные антикоагулянты образуются из факторов свертывания и других белков в результате гемокоагуляции и фибринолиза (антитромбин I – фибрин, антитромбин IV, антитромбин VI и др.).

Антикоагулянты непрямого действия – не влияя непосредственно на процесс свертывания крови, они угнетают образование веществ, участвующих в этом процессе. Сюда относятся синтетические препараты – неодикумарин, пелентан и другие (синкумар, фенилин), блокирующие синтез в печени протромбина и фактора VII. Фибринолизин растворяет образовавшийся фибрин.

3.Система фибринолиза (плазминовая система) представлена основным белком плазминогеном, активаторами плазминогена и антиплазминами. Плазминоген находится в плазме крови в неактивном состоянии и под действием активаторов, образующихся из проактиваторов, переходит в активный фермент плазмин. Переход проактиваторов в активаторы осуществляется под действием факторов фибринолиза.

Фибринолитическая система или система фибринолиза – это расщепление фибриновых волокон под действием плазмина.

Эта система разрушает фибрин. Основным компонентом ее является плазмин (фибринолизин), который образуется из плазминогена под действием тканевого активатора плазминогена (ТАП).

Плазмин расщепляет фибрин на отдельные фрагменты — продукты деградации фибрина (ПДФ).

В дальнейшем тромб, остановивший кровотечение, подвергается ретракции (сжатию) и лизису (растворению). Фибринолиз – это процесс расщепления фибринового сгустка, в результате которого происходит восстановление просвета сосуда. Он отражает сложную реакцию между компонентами плазминовой системы

организма и фибрином.

Показатели, характеризующие плазминовую систему: - Плазминоген - Альфа-2-антиплазмин

- Альфа-1-антитрипсин