Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов

Метод диагностики

Исследуемый материал

1. кровь

2. моча

3. желчь

4. фекалии

1.Бактериоскопический

Возможен ли?

Не используется

Не используется

Не используется

Не используется

2.Бактериологический

а) посев на селективные/элективные питательные среды (названия, состав сред, наблюдаемые изменения)

• среда накопления – 20%-й желчный бульон (пептический перевар животной ткани, натрия таурохолат, натрия хлорид).

• среда накопления, элективная – среда Раппопорт (желчный бульон 10%, 2% глюкоза, индикатор (кислый фуксин, обесцвеченный щелочью);

• мясопептонный бульон с добавлением 1%-й глюкозы.

Изменения среды – помутнение, покраснение среды Рапопорт, появление видимых колоний на плотной части "двойной" среды.

• среда накопления – селенитовый бульон (гидролизат казеина, лактоза, фосфат натрия, гидроселенит натрия).

Помутнение среды

• среда накопления – селенитовый бульон (гидролизат казеина, лактоза, фосфат натрия, гидроселенит натрия)

Помутнение среды.

• среда накопления – селенитовый бульон (гидролизат казеина, лактоза, фосфат натрия, гидроселенит натрия).

Помутнение среды

б) посев на дифференциально-диагностические среды (названия сред, принципы дифференциации культур). Культуральные свойства

среды Эндо, Плоскирева, Левина, ВСА.

Колонии возбудителей брюшного тифа и паратифов на средах Эндо, Левина и Плоскирева бесцветные, нежные, на висмут-сульфитном агаре - черного цвета. При отсутствии роста в течение 10 дней выдают отрицательный ответ.

в) пересев подозрительной колонии на среду Клиглера (состав, принцип работы среды, изменения при росте сальмонелл, формула)

S. Typhi

S. Paratyphi

Состав: МПА, глюкоза, лактоза, сульфат железа, индикатор феноловый красный (в нейтральной среде – красный, при сдвиге рН в кислую сторону становится желтым, при выделении сероводорода образуется черное кольцо, при газообразовании в среде появляются пузырьки газа)

Изменения – почернение столбика агара с сохранением красного цвета “язычка” среды, газ не выделяется.

-/К, Н2S+

Изменения – почернение столбика агара с сохранением красного цвета “язычка” среды, газ выделяется.

-/КГ, Н2S- – S. Paratyphi А

-/КГ, Н2S+ – S. Paratyphi B

г) изучение биохимических свойств (К, КГ, +/-)

S. Typhi

S. Paratyphi А

S. Paratyphi В

Лактоза

-

-

-

Глюкоза

К

КГ

КГ

Мальтоза

К

КГ

КГ

Маннит

К

КГ

КГ

Н₂S

+

-

+

Индол

-

-

-

д) Изучение антигенных свойств

Напишите антигенную формулу для возбудителей, пользуясь сокращенной схемой Кауфмана-Уайта (Приложение 1)

S. Typhi

S. Paratyphi А

S. Paratyphi В

9, 12, [Vi] d

1, 2, 12 a [1, 5]

1, 4, [5], 12 b 1, 2

Например: антигенная структура Salmonella Typhimurium –О 1,4,12 Н i:1,2 (серогруппа О-4(В)).

3. Серодиагностика

Цель исследования

Исследуемый материал

Используемые реакции

Роль специфических антител (классы Ig, время обнаружения)

Цель – выявление специфических АТ.

Материал – сыворотка больного.

Реакции – РНГА с парными сыворотками и эритроцитарными сальмонеллезными О-, Н- и Vi-диагностикумами, РИФ.

Диагностическое значение имеет 4-кратное увеличение титра антител в динамике заболевания (после выявления больного и в начале второй недели заболевания). Первые АТ – IgМ, затем IgG.

4. Молекулярно-генетические методы

ПЦР.