1_MIKROBIOLOGIYa_metoda_1_Morfologia

При микроскопии препаратов, окрашенных по Романовскому-Гимзе, ЭТ хламидий окрашиваются в розовый или красноватый цвет. Они находятся преимущественно внеклеточно. Более крупные РТ окрашиваются в различные оттенки от голубого до темносинего цвета и находятся в основном внутриклеточно. При микроскопическом исследовании РТ обнаруживаются в виде скоплений вокруг ядер эпителиальных клеток в форме «шапочки жандарма» или диффузно. Ядра эпителиальных клеток имеют вишневый оттенок различной интенсивности, а цитоплазма прокрашивается в нежно-голубой цвет.

Риккетсии

Риккетсии (открыты и описаны Риккетсом) - мелкие Гр- бактерии. Являются облигатными внутриклеточными паразитами, так как их собственная метаболическая активность слабая. Риккетсии способны образовывать АТФ, но не синтезируют НАД и полностью зависят от жизнедеятельности клетки хозяина; не растут на искусственных питательных средах.

Для риккетсий характерен полиморфизм. Они могут иметь форму: палочковидную (0,5-4 мкм), нитевидную (10-40 мкм), кокковидную. Не образуют спор, жгутиков, капсул.

Примеры:

Rickettsia prowazekii (возбудитель эпидемического сыпного тифа);

Rickettsia typhi (возбудитель эндемического сыпного тифа).

Способы изучения морфологии риккетсий:

световая микроскопия фиксированных препаратов, окрашенных по Граму, Романовскому-Гимзе, Здродовскому٭;

фазово-контрастная микроскопия;

электронная микроскопия.

Примечание: ٭ по Романовскому-Гимзе они окрашиваются в пурпурно-фиолетовый цвет, по Здродовскому – в ярко-красный.

Актиномицеты и нокардии

Актиномицеты и нокардии - палочковидные Гр+ бактерии, способные образовывать нити и ветвиться. Они напоминают мицелий грибов, однако по своему строению относятся к прокариотам.

Большинство этих бактерий обитает в почве. Патогенные для человека представители относят в основном к следующим родам и видам:

род Actinomyces (семейство Actinomycetaceae), чаще А.israelii;

pод Nocardia (семейство Nocardiaceae), чаще N.asteroides.

Они вызывают соответственно актиномикозы и нокардиозы.

Актиномицеты – тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки длиной 1-2,5 мкм,

но чаще образуют нити до 10-50 мкм. Палочковидные формы могут иметь утолщенные концы, в мазках располагаются одиночно, парами, V- или U-образно. Встречаются зернистые или четкообразные формы. Окраску по Граму фиксируют плохо.

При актиномикозах развиваются хронические гнойные поражения различных органов, чаще лица, реже – легких, аппендикса и др.

Вокруг размножающегося возбудителя в тканях формируются специфические гранулемы, внутри которых находятся колонии актиномицетов – друзы.

Друзы при микроскопическом исследовании напоминают отходящие от центра лучи с утолщенными концами, что дало им соответствующее название (от греч. actis – луч + myces – гриб). Друзы могут достигать значительных размеров, образуя так называемые серые гранулы (тельца Боллингера) размером 0,3-2 мм.

Для изучения морфологии актиномицет и друз используют:

световую микроскопию мазков, окрашенных по Романовскому-Гимзе, Граму, ЦилюНильсену(кислотонеустойчивы) под иммерсионной системой;

световую микроскопию препаратов «раздавленная капля» под малым увеличением и с иммерсионной системой٭٭;

фазово-контрастную микроскопию;

электронную микроскопию.

Для приготовления препарата «раздавленная капля» друзы помещают на несколько минут в каплю 5-10%-го гидроксида натрия, затем промывают водой и наносят на предметное стекло в каплю такого же раствора щелочи, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. При малом увеличении типичные друзы имеют вид образования округлой формы с бесструктурным центром и периферией радиального строения. При исследовании с иммерсионной системой в центре друз видны сплетения тонких гифов с пигментированными зернами. По периферии от этого клубка мицелия отходят радиально в виде лучей гифы, имеющие колбовидные утолщения на концах.

Нокардии - нитевидные прямые или изогнутые клетки с частым ветвлением; при старении распадаются на палочковидные или кокковидные элементы или образуют многоядерные нити. Названы в честь французского бактериолога Э.Нокара, впервые выделившего бактерии в 1888г.

При нокардиозах поражаются в основном легкие, могут быть инфекции подкожножировой клетчатки и др.

Для изучения морфологии нокардий используют:

световую микроскопию мазков, окрашенных по Граму, Цилю-Нильсену (относительно кислотоустойчивы);

фазово-контрастную микроскопию;

электронную микроскопию.

Спирохеты

Спирохеты (от греч. speria – спираль и chaite – волос) объединены в порядок Spirochaetales – тонкие, спирально завитые бактерии длиной 3-500 мкм, Гр-, подвижны. Медицинское значение имеют представители родов Borrelia, Treponema и Leptospira.

Клетки состоят из цитоплазматического цилиндра, покрытого тонкой клеточной стенкой и периплазматических фибрилл, которые как бы закручиваются вокруг цитоплазматического цилиндра придавая спирохетам винтообразную форму. Периплазматические фибриллы являются аналогами жгутиков бактерий, обуславливают подвижность.

Методы изучения морфологии спирохет:

световая микроскопия: окраска по Морозову (трепонемы окрашиваются в черный или темно-коричневый цвет), окраска по Романовскому-Гимзе;

темно-полевая микроскопия;

электронная микроскопия.

Роды спирохет отличаются между собой по биологическим свойствам, в том числе по морфологии (табл. 9)

Таблица 9