1. Какой наиболее вероятный диагноз у пациента?
2. В чём заключаются особенность заболевания? Какие аминокислоты накапливаются в организме в результате нарушения?
3. Каким лабораторным методом проводится исследование?
4. Что можно ожидать в результате лабораторного обследования?
Ответы:
1) Лейциноз ( заболевание кленового сиропа). Классическая форма.
2)Болезнь обусловлена дефицитом дегидрогеназного комплекса альфа-кетокислот с разветвленной цепью. Наследуется по аутосомно-рецессивному типу.
В крови и моче повышается содержание изолейцина, валина и особенно лейцина, который главным образом определяет токсический эффект.
3) Используют Тандемную масс-спектрометрию при неонатальном скрининге.
4) Обнаружение повышенных уровней короткоцепочечных аминокислот (лейцина, изолейцина и валина) и аллоизолейцина (метаболита лейцина).
Задача 4.
Болезнь Гоше является самой распространённой из лизосомных болезней накопления. В клинической картине отмечаются тяжелый неврологические расстройства, глубокая умственная отсталость и другие симптомы.
Вопросы:
1. Что является причиной поражения центральной нервной системы при данной патологии?
2. Что накапливается в нервных клетках?
3. Мутация в каком гене характерна для заболевания?
4. Какие лабораторные исследования рекомендуется провести для верификации диагноза?
Ответы:
Развивается в результате недостаточности фермента глюкоцереброзидазы, которая приводит к накоплению глюкоцереброзида во многих тканях включая цнс
накопление глюкоцереброзида
Болезнь Гоше наследуется по аутосомно-рецессивному механизму. В основе заболевания лежат мутации гена глюкоцереброзидазы, локализующегося в регионе q21 на 1-й хромосоме
Энзимодиагностика — определение активности кислой ?-глюкоцереброзидазы в лейкоцитах крови или в культивируемых фибробластах, полученных из биоптата кожи
Молекулярный анализ мутаций гена глюкоцереброзидазы
суррогатные маркеры активности болезни Гоше (хитотриозидаза и/или хемокин CCL-18 сыворотки) Клинический анализ крови и мочи, Биохимический анализ крови, рутинные показатели,
Задача 5.
В генетическую консультацию обратилась беременная женщина М. Она сообщила, что её брат по матери (отцы — разные) болен фенилкетонурией. Её дочь от первого брака здорова. Она также сообщила, что в роду её второго супруга N. были браки между близкими родственниками, но никто не болел фенилкетонурией. Обследование женщины М. и её настоящего супруга не выявило отклонений в состоянии их здоровья.
Вопросы:
1. Каков тип наследования фенилкетонурии? Какова вероятность развития фенилкетонурии у сыновей и дочерей?
2. Каким образом осуществляется распознавание этой болезни у новорождённых?
3. Какие гены исследуют при помощи молекулярно-генетического метода?
4. Какими методами может быть проведена молекулярно-генетическая диагностика (ДНК-диагностика)?
Ответы:
1) Фенилкетонурия наследуется по аутосомно-рецессивному типу. Если супруг не является носителем данного гена, то вероятность заболеть у потомков М. равна 0.
2) Существует ориентировочная проба с хлорным железом (тестируют мочу на пелёнках). Скрининговая программа предусматривает определение уровня фенилаланина в плазме крови, фенилпирувата в моче. Кровь у новорождённых берут на 3–5-й день после рождения, т.е. ещё в родильном доме (ранее 3 дней неэффективно из-за большого числа ложноотрицательных заключений). В случае положительного результата проводится уточняющая биохимическая диагностика.
3) Исследуют гены фенилаланингидроксилазы (РАН), локализующегося на длинном плече хромосомы 12, участке 12q22-q24.1
4) Исследование с образцами выделенной ДНК выполняется методами ПЦР, рестрикционного анализа, с разделением получаемых ДНК-продуктов с помощью гель-электрофореза в агарозном и полиакриламидном геле с последующей детекцией в УФ-свете. Определяется наличие/отсутсвие исследуемых мутантных вариантов гена PAH, а также определяется статус выявляемой мутации (гомозиготная или гетерозиготная мутация). Для анализа используется венозная кровь, взятая в пробирку с ЭДТА ≥ 2 мл.