Хроматография (ГФ СССР XI, вып. 1)
•Хроматография - физико-химический метод разделения смесей, в котором разделяемые компоненты распределены между двумя фазами. Одна из этих фаз (стационарная фаза) неподвижна, а другая (подвижная фаза) постоянно движется в определенном направлении.
51
Хроматография в тонком слое
сорбента. Бумажная хроматография
•Хроматографические методы используются для определения подлинности, чистоты и количественного содержания веществ.
•Подлинность определяют по величине Rf в сравнении со стандартным образцом или данными частной ФС.
•Чистоту определяют по наличию дополнительных пятен на хроматограмме.
•Количественное определение проводят по площади и интенсивности пятен, а также другими химическими и физико-химическими методами после элюирования вещества.
52
финиш
Rf BA
старт
53
Посторонние примеси. Определение проводят методом ТСХ.
Испытуемый раствор. 1 г субстанции помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл безводного хлороформа, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный безводным хлороформом, отбрасывая первые порции фильтрата.
Раствор сравнения А. 0,01 г 4-аминоантипирина растворяют в 50 мл безводного хлороформа.
Раствор сравнения Б. 10 мл раствора сравнения А разбавляют безводным хлороформом до 25 мл.
На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (эквивалент 400 мкг анальгина) испытуемого раствора, 10 мкл (2 мкг) раствора сравнения А, 10 мкл (0,8 мкг) раствора сравнения Б и в одну точку 5 мкл (0,4 мкг) раствора сравнения Б и 5 мкл (около 0,4 мкг) раствора
4-метиламиноантипирина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру со смесью хлороформ - метанол (4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет 3/4 длины пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в УФ свете при 254 нм.
Пятно посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора, находящееся на одном уровне с пятном 4-метиламиноантипирина на хроматограмме из общей точки нанесения, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %); пятно любой другой посторонней примеси не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %). Суммарное содержание примесей не должно превышать 0,5 %. Пятно вблизи
линии старта (анальгин) в расчет не принимают. |
54 |
Газо-жидкостная хроматография. Высокоэффективная жидкостная хроматография
•Хроматографические методы используются для определения подлинности, чистоты (специфические примеси, остаточные органически растворители) и количественного содержания веществ.
•Подлинность определяют по величинам удерживания (времени или объему) со стандартным образцом или данными частной ФС.
•Чистоту определяют по наличию дополнительных пиков на хроматограмме.
•Количественное определение проводят по площади или высоте пиков на хроматограмме.
55
56
Посторонние примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Количественное определение».
Хроматографические условия
Колонка 250 × 4,6 мм с октадецилсилил силикагелем (С18), 5 мкм
Температура 70 ºС
Подвижная буферный раствор с рН 6,5 – ацетонитрил – вода фаза (ПФ) (2:7:11)
Скорость потока 1 мл/мин Детектор спектрофотометрический, 215 нм Объем пробы 100 мкл
Время удерживания пика азитромицина около 26 мин. Относительное время удерживания пика примеси А около 0,42, пика примеси В около 1,7.
Содержание азитромицина вычисляют по площади пиков на
хроматограмме. |
57 |
|
Литература по фармацевтической химии в библиотечной системе сайта КрасГМУ
1.Фармацевтическая химия: сб. тестовых заданий с эталонами ответов для студентов очной и заочной формы обучения, обучающихся по специальности 060108 – Фармация / сост. Н. В. Кувачева, Е. С. Гагарина, А. В. Озерская ; Красноярский медицинский университет. - Красноярск : КрасГМУ, 2011. - 211 с.
2.Фармацевтическая химия : рук. к практ. занятиям для студентов по спец. 060108 - Фармация / Е. С. Гагарина, А. В. Озерская, Н. В. Кувачева [и др.] ; Красноярский медицинский университет. - Красноярск : КрасГМУ, 2009. - 176 с.
3.Фармацевтическая химия в схемах и таблицах: учеб. пособие для студентов / Н. В. Кувачева, Я. В. Горина, А. В. Озерская ; Красноярский медицинский университет. - Красноярск : КрасГМУ, 2013. - 75 с.
4.Фармацевтический анализ неорганических препаратов : учеб. пособие к практическим занятиям для студентов, обучающихся по спец. 060108 - Фармация / Е. С. Гагарина, А. В. Озерская, Н. В. Кувачева ; Красноярский медицинский университет. - Красноярск :
КрасГМУ, 2010. - 68 с.
5.Функциональный анализ : учеб. пособие к практ. занятиям для студентов 3, 4, 5 курсов по спец. 060108 – Фармация / А. В. Озерская, Е. С. Гагарина, Н. В. Кувачева ;
Красноярский медицинский университет. - Красноярск : КрасГМУ, 2011. - 60 с. |
58 |
|