Простой метод окраски.
Окрашивают одним красителем анилинового ряда – основным или кислым:
- кислый фуксин
- эозин
- метиленовый синий
- генциановый фиолетовый
2) Используется для изучения морфологии микроорганизмов
Сложный метод окраски.
Используют несколько красителей (основная и вспомогательные краски, обесцвечивающие жидкости (этанол)):
- метод Грамма
- окраска по Нейссеру
- Гинса-Бурри (выявление капсул)
- Циля-Нильсена (выявление спор)
2) Используются для определения не только морфологии, но и химического состава и структуры микробных клеток.
Схема окрашивания по Грамму:
Генцианвиолет 2-3 мин
Раствор Люголя на 1 мин
95% этаноловый спирт – несколько раз до тех пор, пока не перестанут отходить фиолетовые струйки красителя
Вода
Фуксина Циля 1-2 мин
Гр+ фиолетовые, Гр- красно-розовые
Поясните, в чем заключаются различия асептических и антисептических мероприятий.
Асептикой называется система мероприятий, которая направлена на предупреждение попадания и внедрения возбудителей различных инфекций в рану, полости тела, органы, ткани больного при диагностических процедурах, хирургических операциях и перевязках.
Ее эффективность достигается путем уничтожения микробов при помощи дезинфекции и стерилизации с применением хим.веществ и использованием физических факторов.
Антисептика – это комплекс лечебно-профилактических мероприятий, проводящийся с целью уничтожения микробов в ране или в организме.
Различают два вида хирургической инфекции: экзогенный и эндогенный. Экзогенный источник инфекции находится в окружающей среде, эндогенный – в организме больного. Основная роль в предупреждении эндогенного инфицирования принадлежит антисептике, экзогенного – асептике.
К основным асептическим мероприятиям относят борьбу с воздушной инфекцией. С этой целью регулярно проводят влажную уборку, проветривание и облучение помещений медучреждений, во время проведения операций сокращают время контакта открытой раны с воздухом.
Для борьбы с капельной инфекцией медперсоналу запрещают разговаривать в операционной или в перевязочной, проводят своевременную уборку этих помещений.
В целях борьбы с контактной инфекцией проводят стерилизацию инструментов, материалов и приборов, соприкасающихся с раной. Одним из самых важных мероприятий по обеспечению асептики является санация медперсонала.
К антисептическим мероприятиям относят первичную хирургическую обработку ран, удаление нежизнеспособных и инфицированных тканей, инородных тел, наложение гигроскопичных повязок, воздействие ультразвуком, сухим теплом, использование бактериостатических и бактерицидных средств.
Патогенные микробы могут попасть в организм больного через руки медицинских работников. С целью предупреждения инфицирования проводят местную антисептику – гигиеническую обработку кожи рук медперсонала до и после контакта с инфекционными больными и их выделениями, до и после инструментальных и мануальных исследований, не связанных с проникновением в стерильные полости, после посещения инфекционных стационаров, после посещения туалета и перед уходом домой.
Также существуют и общие антисептические мероприятия, которые включают в себя насыщение организма специальными препаратами (сульфаниламиды, антибиотики), воздействующими на очаг инфекции или на патогенную микрофлору.
Промежуточное положение между бактериями и вирусами занимают Риккетсии. По размерам и форме близки к бактериям (неподвижные палочки длиной не более 1,0 мкм, не образующие спор и капсул), размножаются простым делением, но живут только в тканях поражаемого ими органа (облигатные внутриклеточные паразиты). Вызывают у человека сыпной тиф, лихорадку.
Бактерия, имеющая жгутики по всей поверхности тела – перитрих – (род Escherichia, Salmonella)
Дезинфекция - это уничтожение патогенных микроорганизмов и разрушение их токсинов с объектов внешней среды.
Сапрофиты являются микроорганизмами, питающимися мертвыми органическими веществами. Они превращают органические вещества в неорганические, участвуют тем самым в круговороте веществ в природе.
Спора у бактерий необходима для выживания при неблагоприятных условиях внешней среды.
Малярия передается путем Трансмиссивным (переносчик комар).
Прионы это белковые молекулы, мельче вируса, изменяют структуру белка в человеческой клетке и вызывают различные болезни.
По составу питательные среды бывают
Простые – для
- материала, слабо загрязненного микрофлорой,
- как основа сложных питательных сред
2) Сложные –
- на основе простых питательных сред,
- с добавлением различных компонентов для изучения определенных микроорганизмов (кровь, сыворотка, яйцо, картофель, сахара и др.)
Споры не погибают при стерилизации в
Знать представителей кокков.
Микрококки – отдельно расположенные шаровидные клетки; делятся в разных плоскостях
Диплококки – парные кокки (гонококки, диплококки, менингококки); делятся в одной плоскости
Стрептококки – клетки округлой или вытянутой формы, составляющие цепочку; делятся в одной плоскости
Тетракокки – 4 соединенные вместе шаровидные бактерии; делятся в двух взаимно перпендикулярных плоскостях
Стафилококки – шаровидные, расположены в виде грозди винограда; делятся в разных плоскостях
Сарцины – симметричные пакеты из 8 и более кокков; делятся в трех взаимно перпендикулярных плоскостях
Какие организмы можно отнести к группе бактерий?
Обширная группа одноклеточных микроорганизмов, характеризующихся отсутствием окруженного оболочкой клеточного ядра.
Поясните, каким требованиям должны соответствовать питательные среды.
- питательность (содержать все вещества, необходимые для жизнедеятельности микроорганизмов)
- оптимальный рН (7,2-7,4-7,6)(исключения: холерный вибрион (рН 8-8,6), дрожжи и плесень при рН 5,0-5,5)
- изотоничность 0,9% (концентрация солей должна обеспечивать осмотические условия)
- стерильность и прозрачность
- влажность не менее 20%
53. Дайте понятия терминам: асептика, антисептика, пирогены, резистентность, контаминация, дезинфекция, стерилизация.
Асептика – действия, направленные на предупреждение попадания в рану возбудителя инфекции.
Антисептика – уничтожение микробов, которые способны вызвать инфекционный процесс внутри живого организма (на поврежденных или контактных участках кожи и слизистых оболочках).
Пирогены – продукты жизнедеятельности или распада микроорганизмов, погибшие микробные клетки, вызывающие повышение температуры тела.
Резистентность – сопротивляемость, устойчивость организма (популяции, биоценоза) к воздействию различных факторов
Контаминация – загрязнение микроорганизмами вследствие несоблюдения правил асептики.
Дезинфекция – уничтожение патогенных микроорганизмов с объектов внешней среды.
Стерилизация – уничтожение всех фор микроорганизмов, включая споры, с объектов внешней среды.
Чем характеризуются отделы бактерий по классификации Берги?
В основу деления на отделы положено строение клеточной стенки.
1 отдел –включает МО с разной морфологией, Гр-. Размножаются в основном бинарным делением, в некоторых группах – почкованием, в одной – множественным делением. Спор не образуют. Многие подвижны с помощью жгутиков или скольжения. Аэробные, анаэробные или факультативно анаэробные формы. Отдел подразделяется на 3 класса, объединяющие нефотосинтезирующие и фотосинтезирующие организмы.
2 отдел – входят организмы Гр+. Размножаются в основном бинарным делением. У некоторых образуются эндоспоры. У других – споры на гифах или в спорангиях. Перемещаются с помощью жгутиков. Большинство неподвижны. В состав отдела входят аэробные, анаэробные, факультативно анаэробные организмы. В зависимости от морфологии предложено деление на 2 класса: Firmibacteria (кокки, палочки, неветвящиеся нити) и Thallobacteria (ветвящиеся формы).
3 отдел – относятся прокариоты, у которых отсутствует клеточная стенка и не синтезируются предшественники пептогликана. Клетки окружены ЦПМ, чрезвычайно плеоморфны. Размножение бинарным делением, почкованием, фрагментацией. Окрашивание по Граму отрицательное. Характерно образование мелких, врастающих в агар колоний. Могут быть сапрофитами, паразитами или патогенами. Представлены одним классом – Mollicutes.
4 отдел – объединены прокариоты, по имеющимся данным претендующие на более раннее происхождение, чем формы, включенные в 1 и 2 отделы. Клетки разной формы: кокки, палочки, нити. Многие плеоморфны. Большинство имеют клеточную стенку, но она не содержит типичного пептидогликана. Клеточная стенка может быть построена только из белковых макромолекул или гетерополисахаридов. Окрашивание по Граму отрицательное или положительное. Большинство – строгие анаэробы. Многие имеют жгутики. Характеризуются экологическим и метаболическим разнообразием, способностью жить в экстремальных условиях. Объединены в класс Archaeobacteria.
Бактерии |
|||
Эубактерии |
Архебактерии (археи) |
||
Грамотрицательные с тонкой клеточной стенкой |
Грамположительные с толстой клеточной стенкой |
Не имеющие клеточной стенки |
С дефектной клеточной стенкой |
Для переживания неблагоприятных условий бактерии образуют споры.
Синтез белка в бактериальной клетке выполняет рибосома.
Органогенами бактериальной клетки являются водород, кислород, углерод и азот.
Период инфекционного процесса начинается с момента проникновения микроба до первых признаков заболевания, называется Инкубационный.
Прионы – это белковые молекулы, изменяют структуру белка в организме человека, вызывают тяжелые неизлечимые заболевания ЦНС.
Стерилизацию паром под давлением проводят в автоклавах.
Белки, участвующие в процессах метаболизма – ферменты.
Оксидоредуктазы – (окислительно-восстановительные)
Трансферазы – (перенос радикалов и атомов)
Гидролазы – (расщепляют вещества на более простые с присоединением воды)
Лиазы – (отщепляют от субстратов химические группы, не используя воду)
Изомеразы – (превращают субстрат в изомеры)
Лигазы-синтетазы – (ускоряют синтез сложных соединений)
Бактерии относятся к прокариотам.
Возбудители газовой гангрены по образованию спор относятся к группе клостридии (палочковидные Гр+ бактерии, образующие овальрные споры, в диаметре превышающие поперечник вегетативной части).
Источником инфекции является человек (вич-инфекция, сифилис); животные (бешенство, сиб.язва, бруцеллёз); объекты внешней среды, в которых обитают сапрофиты (столбняк, газовая гангрена, лептоспирозы).
К доядерным клеткам относят клетки прокариот, к ним относятся бактерии и археи.
Поясните, в каких помещениях аптек и для чего необходимо устанавливать бактерицидные лампы. Приказ МЗ РФ от 21.10.1997 №309 в редакции Приказа Минздрава РФ от 24.04.2004 № 172. «Инструкция по санитарному режиму аптечных организаций (аптек)»
Бактерицидные лампы устанавливают для дезинфекции воздуха и различных поверхностей в асептических помещениях.
Дистилляционная, моечная-стерилизационная, ассистентская-асептическая, стерилизационная лекарственных форм.
Методы хранения дезинфицирующих средств.
См вопрос 27
В чем особенности образования спор и капсул у бактериальной клетки, цель образования и их роль в обмене веществ.
Споры бактерий – форма существования бактериальных клеток в состоянии анабиоза.
Бактериальная спора формируется внутри материнской клетки и называется эндоспорой. Способностью к спорообразованию обладают преимущественно палочковидные Гр+ бактерии бациллы и клостридии, из шаровидных – лишь единичные виды, например, Sporosarcina ureae. Внутри клетки образуется одна спора.
Основная функция спор о- сохранение бактерий в неблагоприятных условиях внешней среды.
Процесс образования спор проходит ряд последовательных стадий:
- подготовительная. Изменяется метаболизм, завершается репликация ДНК и происходит ее конденсация. Клетка содержит два и более нуклеоида, один из них локализуется в спорогенной зоне, остальные – в цитоплазме спорангия. Одновременно синтезируется дипиколиновая кислота;
- стадия предспоры. Со стороны ЦПМ вегетативной клетки происходит врастание двойной мембраны, или септы, отделяющей нуклеоид с участком уплотненной цитоплазмы (спорогенная зона). В результате чего образуется проспора, окруженная двумя мембранами;
- образование оболочек. Вначале между мембранами проспоры образуется зачаточный пептидогликановый слой, затем над ним откладывается толстый пептидогликановый слой кортекса и вокруг его наружной мембраны формируется споровая оболочка;
- созревание споры. Заканчивается образование всех структур споры, она становится термоустойчивой, приобретает характерную форму и занимает определенное положение в клетке.
Расположение спор в клетке может быть терминальным (на конце палочки), субтерминальным (ближе к концу), центральным и латеральным.
Капсула – слизистый слой, расположенный над клеточной стенкой бактерии. Может состоять из полисахаридов(чаще всего) или белков. В состав капсулы входят углеводы. В зависимости от толщины слоя различают макрокапсулу, толщиной более 0,2 мкм, хорошо различимую в световом микроскопе, и микрокапсулу, толщиной менее 0,2 мкм, обнаруживаемую лишь при помощи электронного микроскопа или выявляемую химическими и иммунологическими методами.
Капсула – полифункциональный органоид, выполняющий важную биологическую роль.
- предохраняет бактерию от фагоцитоза, бактериофагов, антибиотиков и др. неблагоприятных факторов;
- препятствует высыханию бактерий;
- способствует прикреплению к субстрату.