11. Демонстрация мазков с микробным фагоцитозом нейтрофилов. Подсчет фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса.

Определение фагоцитарной способности лейкоцитов периферической крови производят по методике Кост и Стенко. В видалевскую пробирку берут 1 капилляр (от прибора Панченкова) раствор 0,5% лимоннокислого натрия и 2 капилляра крови из пальца. Этим же капилляром приливают 1 капилляр однодневной культуры штамма золотистого стафилококка в 2-миллиардном разведении, тщательно перемешивают и ставят в термостат на 30 минут при температуре 37 градусов Цельсия (за это время термостат не открывать!).

Взяв через 30 минут из термостата пробирку делают обычным способом мазок, быстро высушивают на воздухе, фиксируют и красят.

Подсчет микробов производят следующим способом: на 100 сегментоядерных нейтрофильных клеток подсчитывают отдельно в каждой клетке количество фагоцитированных микробов и распределение фагоцитирующих клеток. Записывается следующим образом:

1	число микробов в клетке от 0 до 5	число клеток
2	... от 6 до 10
3	... от 11 до 20
4	... от 21 до 40
5	... от 41 и выше
6	Фагоцитарный индекс (ФИ) - всего фагоцитирующих клеток на 100 нейтрофилов.
7	Всего фагоцитировано микробов на 100 нейтрофилов
8	Среднее число фагоцитированных микробов на 1 фагоцитирующую клетку (Фагоцитарное число)

12. Работа с картой оценки т- и в-системы иммунитета у человека. Оценка т-системы иммунитета (клеточный иммунитет).

Т- лимфоциты — это клетки-регуляторы, которые действуют как рубильники: включают и выключают действие иммунной системы. Команды они отдают, выделяя сигнальные молекулы, которые называются цитакинами. Эти молекулы переносят сигналы от Т-лимфоцитов к другим клеткам. B-лимфоциты вырабатывают специальные белки — антитела.

Антитела — это специальные белки, которые с удивительной точностью — как ключ, подогнанный к замку, — узнают тот субстрат, против которого они направлены. Антигены — это белки или фрагменты белков, несущие признаки чужеродности и вызывающие иммунный ответ при введении в организм. Все клетки иммунной системы — и Т-лимфоциты, и В-лимфоциты, и макрофаги — обладают способностью очень быстро мигрировать по всему организму. Лучше всего передвигаются Т-лимфоциты и вспомогательные клетки, несколько хуже — В-лимфоциты.

Для оценки Т-системы иммунитета пользуются следующими методами:

1.Метод "спонтанных" розеток (розеткообразование с эритроцитами барана) - определяют количество Т-лимфоцитов в крови.

2. Реакция бласттрансформации лимфоцитов in vitro под влиянием ФГА или в микст культуре.

3. Определение динамики бласттрансформации.

4.Оценка продукции лимфоцитами периферической крови гуморальных медиаторов клеточного иммунитета.

Наиболее распространен тест подавления миграции макрофагов факторов; угнетающим их миграцию (MIF), выделяемым сенсибилизированными лимфоцитами под влиянием соответствующего антигена. С помощью этого метода in vitro можно установить сенсибилизацию организма к тому или иному антигену.

5. Постановка кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа на широко распространенные антигены (туберкулезы, трихофитин). 6. Контактная аллергия к динитрохлорбензолу (ДНХБ). Этот гаптен при накожной аппликации вызывает развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа. Повторное нанесение препарата дает типичную кожную реакцию. Поскольку вероятность контакта индивидуума с данными редкими химическими соединениями ничтожна, проба ДНХБ служит весьма распространенным методом оценки способности организма развить гиперчувствительность замедленного типа, т.е. функциональной активности Т-системы иммунитета.

7. Отторжение аллогенного кожного лоскута. Эта реакция тоже относится к гиперчувствительности замедленного типа и осуществляется в основном Т-лимфоцитами. Однако трансплантация чужеродной ткани приводит к сенсибилизированному организму по отношению к трансплантационным агентам, что может оказаться нежелательным при последующем лечении больного такими методами, как пересадка костного мозга, вилочковой железы и др.

8. Биопсия лимфатических узлов и гистологическая оценка тимус-зависимых областей вилочковой железы. Эти тесты ставятся в сложных для диагностики случаях при подозрении на комбинированные иммунодефициты и злокачественные образования.