II. Базовый текст

1. Иммунный статус человека. Понятие, уровни, тесты оценки

Иммунный статус  это количественные и функциональные характеристики факторов иммунитета организма, определенные в конкретный момент времени.

Функции иммунной системы снижают различные факторы — несбалансированное питание, инфекции, ионизирующее излучение, химические вещества. Подобные нарушения — иммунодефициты — разделяют на первичные (врождённые) и вторичные (приобретённые). Врождённые дефекты иммунной системы встречают сравнительно редко и обусловлены генными дефектами. Вторичные нарушения часто представляют звенья патогенеза многих патологических состояний (например, болезней злокачественного роста, эндокринных расстройств). Особенно часто вторичные расстройства развиваются при бактериальных и вирусных инфекциях, обычно нося временный характер (транзиторные иммунодефициты). Дефекты могут затрагивать различные компоненты иммунной системы. Выделяют Т-клеточные, В-клеточные и комбинированные (Т-В-клеточные) иммунодефициты. Также возможны расстройства гуморальных и клеточных факторов неспецифической защиты организма.

Для выявления иммунодефицитных состояний возникает необхо­димость оценки показателей функциональной активности им­мунной системы, т. е. иммунного статуса. С 1987 года для изучения иммунного статуса используют принцип двухэтапной оценки иммунологического статуса.

2. Тесты оценки иммунного статуса человека I уровня и методы их определения

На первом (скрининговом) этапе выявляют грубые дефекты в системе гуморального и клеточного иммунитета, в системах комплемента и фагоцитоза с помощью наиболее простых, но точ­ных, так называемых ориентировочных методов, которые могут охарактеризовать функцию основных компонентов иммунного ответа организма. Этим требованиям отвечают иммунологи­ческие тесты первого уровня, включающие в себя следующие основные тесты: определение общего и относительного числа лимфоцитов; основных субпопуляций (Т- и В-клетки); фагоцитарной активности лейкоцитов; концентрации иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови (табл. 31).

Общее (абсолютное) и относительное число лимфоцитов опре­деляют по данным клинического анализа крови. Содержание Т- и В-лимфоцитов подсчитывают в реакции иммунофлюоресценции, используя меченые моноклональные флюоресцирую­щие сыворотки к специфическим поверхностным антигенным маркерам, обозначаемым символами CD (claster differentiation  кластеры дифференцировки). Таких антигенных маркеров известно несколько десятков, но отдельные из них характерны для того или иного типа клеток:

• рецептор CD3⁺ — всех Т-лимфоцитов;

• рецепторы CD19⁺, 20, 21, 72 — В-лимфоцитов;

• рецепторы CD4⁺ — Т-хелперы и Т-клетки памяти;

• рецепторы CD8⁺ — Т-супрессоры и Т-киллеры;

• рецепторы CD16⁺ — NK-клетки (натуральные киллеры).

В настоящее время популяции и субпопуляции лимфоцитов определяют с помощью специфических моноклональных AT к различным поверхностным маркерам посредством проточной цитофлюориметрии или с помощью иммунолюминесцентной микроскопии.

Более доступным и простым, но менее точным и устаревшим, является метод розеткообразования. Он основан на том, что В-лимфоциты могут адсорбировать на своей поверхности эрит­роциты мышей, а Т-лимфоциты — эритроциты барана (их также могут образовывать NK-клетки). Лимфоцит с прилип­шими к нему эритроцитами — это и есть розетка, их подсчи­тывают в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках из смеси лимфоцитов и соответствующих эритроцитов.

Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови оп­ределяют процент фагоцитирующих клеток и фагоцитарный по­казатель (среднее количество микробных клеток, поглощен­ных одним лейкоцитом).

Концентрацию (уровень) иммуноглобулинов разных классов G, М, А и Е в сыворотке крови определяют в реакции преципитации в геле (радиальная иммунодиффузия по Манчини) с анти-глобулиновыми сыворотками к IgG, IgM, IgA, но этот метод дает достаточно большую ошибку при определении: ±15%.

Таблица 31. Тесты оценки иммунного статуса I уровня

Тест	Метод определения
Лейкоцитарная формула (относительное и абсолютное количество нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов и лимфоцитов)	Световая микроскопия мазка крови, окрашенного по Романовскому-Гимзе
Относительное и абсолютное количество Т-лимфоцитов (CD3+ клеток)	Проточная цитофлюориметрия
относительное и абсолютное количество Т-лимфоцитов (Т-хелперов (CD4+ клеток), Т-киллеров (CD8+ клеток), индекса соотношения CD4/CD8)	Проточная цитофлюориметрия
Относительное и абсолютное количество В-лимфоцитов (CD20+ клеток)	Проточная цитофлюориметрия
Концентрация иммуног­лобулинов А, М, G	Реакция Манчини; ИФА
Показатели фагоцитоза (фагоцитарный индекс, фагоцитарное число, коэффициент завершенности фагоцитоза)	Световая микроскопия мазков крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе; расчет показателей активности фагоцитоза
Титр комплемента	Реакция иммунного гемолиза
Количество иммунных комплексов	Турбидиметрия (метод анализа мутных сред, основанный на измерении интенсивности поглощённого ими света)