Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МУ Частная бактериология.doc
Скачиваний:
11
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
1.85 Mб
Скачать
  1. Методы лабораторной диагностики

Основной метод диагностики дифтерии — бактериологический, обычно с предварительной бактериоскопией. Серологический метод используют для определения токсигенности возбудителя и, значительно реже, для выявления антитоксинов в сыворотке крови больного.

Материалы для исследования: пленки или слизь из зева, носа, глаза и других областей в зависимости от локализации поражений. Клинический материал берут сухим тампоном, пленки отделяют пин­цетом. Материал для микроскопии и посева берут отдельными тампо­нами. Бактериологическое исследование рекомендуется начать не позднее чем через 3 часа после взятия материала.

Бактериоскопии подвергаются микропрепараты, приготовлен­ные с тампона и окрашенные по Граму, Леффлеру, Нейссеру. При об­наружении палочек с морфологией и расположением, характерным для C.diphtheriae (зерна волютина на полюсах клеток), дают предваритель­ный ответ: "обнаружены палочки, подозрительные на дифтерийные; исследование продолжается".

Бактериологическое исследование. Производят посев инфици­рованным тампоном на чашки с теллуритовым кровяным агаром (сре­да Клауберга и др.), на которых могут вырасти радиально исчерченные колонии серого цвета (бивар gravis) или черные гладкие колонии не­сколько меньшего размера (биовар mitis). Потемнение колоний C.diphtheriae происходит вследствие их способности восстанавливать теллур из теллурита калия, (теллурит калия включают в среду для по­давления роста грамотрицательной микрофлоры). Колонии отсевают на скошенные среды — сывороточный агар или свернутую лошадиную сыворотку. Выделенную культуру идентифицируют на основании изу­чения ее морфологических, культуральных, биохимических свойств и определения токсигенности. C.diphtheriae ферментирует глюкозу, га­лактозу, цистеин, не расщепляет сахарозу и мочевину (см. табл 19).

Таблица 19. Дифференциальные признаки C.diphtheriae и некоторых других видов коринебактерий, выделяемых со слизистых дыхательныхпутей человека

Виды

Токси-генность

Цистиназа (проба Пизу)

Уреаза

Углеводы

Агглютина-бельность поливален­тной сывороткой

Глюкоза

Сахароза

Крах­мал

C.diphtheriae

+

+

-

+

-

+

+

C.xerosis

-

-

-

+

+

-

-

C.pseudodiphtheriticum

-

-

+

-

-

-

-

Определение токсигенности — очень важный тест при идентифи­кации выделенной культуры коринебактерий, так как продуцировать экзотоксин способны только патогенные штаммы C.diphtheriae и имен­но они являются возбудителями дифтерии.

Токсигенность определя­ют с помощью двойной диффузии в геле (метод Оухтерлони). Можно определять токсигенность у выделенных культур C.diphtheriae также при помощи вариантов реакции непрямой гемагглютинации — РОНГА и РНАТ. Эти реакции позволяют получать ре­зультат в день исследования (нередко через 1-2 часа) и отличаются высокой чувствительностью.