5. Питательные среды и культуральные свойства

Бактерии хорошо развиваются при свободном доступе кислорода, при температуре от 15 до 40ºС. Могут расти на обычных питательных средах, но лучше и с характерной морфологией развиваются на средах, содержащих кровь или сыворотку любого вида животного.

Среды должны содержать в качестве источников азота аминокис­лоты: β-аланин, цистин, метионин, валин и др. Дифтерийная палочка способна восстанавливать металлический теллур из его солей. Теллурит калия является ингибитором микрофлоры, встречающейся в зеве.

1. Кровяной теллуритовый агар (КТА) состоит из питательного агара, 2% раствора теллурита калия и дефибринированной или гемолизированной лоша­диной или бычьей крови (10%). Колонии C.diphtheriae появля­ются через 18-24 часа черного цвета или серого с черным центром.

2. Среда Клауберга II состоит из питательного агара, 2% раствора теллурита калия, глицерина, гемолизированной крови. Через 24 часа вырастают матово-черные, неслившиеся плоские колонии, Че­рез 48-72 часа возможна их дифференциация на биотипы. Тип gravis образует серовато-черные колонии с несколько изрезан­ными краями, колонии типа mitis растут в виде мелких блестя­щих серовато-черных колоний с ровными краями.

3. Свернутая сыворотка — среда Ру — представляет собой чистую сыворотку крови любого происхождения. Ее разливают по 3 мл в пробирки и в наклонном положении пробирки нагревают в течение 1 часа при 80°С для свертывания. Колонии на среде Ру вырастают через 12-18 часов мелкие, диаметром 0,5-1,0 мм, круг­лые, суховатые, кремово-желтого цвета, не сливающиеся даже при сплошном посева.

6. Антигенная структура

Дифтерийные бактерии имеют довольно сложную антигенную структуру и серологически неоднородны. Выделяют О-и К-антигены. Полисахаридные компоненты О-антигенов клеточной стенки обладают межродовыми свойствами, обусловливая неспецифические перекрестные реакции с микобактериями, актиномицетами (нокардиями). Поверхностные К-антигены — капсульные белки, обладают видовой специфичностью и иммуногенностью.

7. Биохимические свойства

Дифтерийная палочка вырабатывает кислоту без газообразова­ния в средах с глюкозой, мальтозой и галактозой, но не с лак­тозой, сахарозой и маннитом. Сбраживание крахмала и глико­гена считают характерной особенностью типа gravis. Многие штаммы дают гемолиз на кровяном агаре и лизируют эритро­циты, добавленные к культуре.

Дифтерию вызывают только токсичные штаммы, об­ладающие способностью продуцировать экзотоксины. Степень токсичности дифтерийных микробов может быть раз­личной. Единицей измерения силы токсина служит минимальная смертельная доза (DLM) — наименьшее количество токсина, убиваю­щее морскую свинку массой 250 г в течение 3-4 суток. Кроме экзотоксина дифтерийная палочка продуцирует дермонекротоксин, гемолизин, нейраминидазу и гиалуронидазу.

Синтез дифтерийного токсина микробными клетками детерминирован специальным геном tox, локализующимся в ДНК лизогенного фага. Токсин продуцируют крупных размеров особи возбудителя, в которых отмечается спонтанная продукция фага. Генетические структуры, управляющие синтезом дифтерийного токсина, функционируют независимо от всех органоидов, обеспечивающих жизнедеятельность микробов. В связи с этим коринебактерии могут терять ген tox, и, собственно, патогенные свойства.