10. Иммунитет

После заболевания отмечается развитие местного иммунитета — усиливается синтез лимфоидными клетками слизистой оболочки кишечника SIgА, которые покрывают слизистую оболочку и препятствуют адгезии и проникновению шигелл в эпителиальные клетки. АТ к Аг возбудителя возникают в 1-ю неделю заболевания, достигая максимального титра на 2-й неделе. Но напряженный иммунитет они не формируют. Иммунитет типоспецифический, нестойкий.

11. Методы лабораторной диагностики

Основной метод диагностики — бактериологический; применяют также серологический и молекулярно-генетический методы, аллергическую пробу.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал — испражнения, которые берут из судна, отбирая пробы, содержащие слизь и гной, в стерильную пробирку. Нередко материал берут непосред­ственно из верхнего отдела прямой кишки с помощью тампона, про­волочной петли и ректальной трубки. Бактериологическое исследование необходимо проводить в кратчайший срок после взятия материала («у постели больного»), т.к. шигеллы в испражнениях быс­тро погибают. Обычно материал помещают в консервирующую смесь, содержащую физиологический раствор NaCl с глицерином, или в транс­портную среду — селенитовую среду обогащения или среду с желчью (табл. 14). В результате срок исследования продлевается до 24 часов при усло­вии хранения проб в холодильнике.

Таблица 14. Схема бактериологического исследования дизентерии

Этапы исследования	Ход исследования	Результат
Предварительный этап	Посев исследуемого материала на жидкую селенитовую среду	Среда помутнела
1-й	Посев исследуемого материала или пересев с селенитовой среды на чашки со средой Левина или Плоскирева для получения изолированных колоний	На среде выросли различные колонии, в том числе лактозонегативные
2-й	Пересев лактозонегативных колоний на комбинированную среду Клиглера или Ресселя уколом в столбик или штрихом по скошенной поверхности. Часть колоний засевают в Api 20 Е тест-систему	Столбиковая часть комбини-рованной среды закислилась, скошенная поверхность имеет нейтральный или щелочной рН
3-й	Идентификация чистой культуры на основании изучения: 1. морфологии — окраска по Граму и препарат «раздавленная капля» 2. учет результатов биохимического тестирования 3.Серологическая идентификация: РА на стекле с поливалентными дизентерийными сыворотками Чувствительность к АБ методом бумажных дисков	1. культура неподвижна, в окрашенном препарате в поле зрения — небольшие грам-палочки с закругленными концами, расположенные беспорядочно 2. Биохимическая характеристика соответствует роду 3. При положительной реакции агглютинации культура относится к определенному роду и виду шигелл Учет чувствительности к АБ
4-й	Учет результатов идентификации по проведенному исследованию	Заключение: из исследуемого материала выделена культура чувствительная к таким-то АБ

Серологический метод. Его проводят с целью выявления анти­тел в сыворотке больного при затянувшихся, хронических формах за­болевания, а также для ретроспективной диагностики. Антитела можно выявить с помощью РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) или развернутой реакции агглютинации («дизентерийный Видаль»). В последнее время рекомендуется в каче­стве основной серологической реакции использовать РСК (реакция связывания комплемента), ее используют также и для обнаружения антигенов.

Антигены шигелл определяют в испражнениях или исследуя ко­лонии, выросшие на чашках с дифференциально-диагностическими средами, в реакциях: иммунофлюоресценции, непрямой гемагглютинации, иммуноферментного анализа, а также для экспресс-метода диагностики искользуют КОА (коагглютинация). Антигены S. sonnei обнаруживают в пищевых продуктах и в объектах внешней среды, используя «Шигелла-тест» — диагностичес­кую систему для постановки ИФА.

В трудных для диагностики случаях заболевания иногда приме­няют молекулярно-генетические методы исследования: ПЦР или ген­ное зондирование.

В качестве дополнительного экспресс-метода диагностики у де­тей, особенно при стертых и субклинических формах дизентерии, мо­жет быть использована внутрикожная аллергическая проба с дизентерином.