- •Департамент кадровой политики и образования
- •Московская государственная академия ветеринарной
- •Медицины и биотехнологии имени к.И. Скрябина
- •Основы производства гипериммунных сывороток и иммуноглобулинов
- •Учебно-методическое пособие по биотехнологии
- •Основы производства гипериммунных сывороток и иммунноглобулинов
- •4. Материальное обеспечение:
- •План проведения лабораторной работы
- •Классификация гипериммунных сывороток
- •Отбор животных-продуцентов. Грундиммунизация
- •Подбор животных-продуцентов
- •Грундиммунизация животных продуцентов
- •Гипериммунизация животных
- •Приготовление сывороточных препаратов
- •2. Основы биотехнологии производства гамма – глобулинов
- •2.1. Общие сведения о гамма-глобулинах
- •2.2. Содержание гамма-глобулинов в сыворотке крови животных
- •Содержание белковых фракций в сыворотке крови
- •2.3. Связь гамма-глобулина с антителами
- •2.4. Основные типы иммуноглобулинов
- •2.5. Методы получения гамма-глобулинов
- •2.5.1. Электрофоретическое разделение белков
- •2.5.2. Разделение белков методом хроматографии
- •2.5.3. Ультрафильтрационный метод выделения гамма-глобулина
- •2.5.4. Метод солевого фракционирования (высаливание)
- •Осаждение гамма-глобулина сернокислым аммонием
- •Осаждение гамма-глобулина хлористым натрием
- •Осаждение гамма-глобулина сернокислым натрием
- •2.5.5. Спиртовой метод получения гамма-глобулина
- •Фракционирование сыворотки крови спиртовым методом (вариант б)
- •2.5.6. Спиртово-хлороформенный метод получения гамма-глобулина
- •2.5.7. Риваноловый метод получения гамма-глобулина
- •3. Контроль готового препарата гамма-глобулина
- •Получение гамма-глобулина на биопредприятиях
- •Получение гамма-глобулина риваноловым методом в условиях хозяйства
- •Применение гамма-глобулинов в ветеринарии
- •7. Практическая работа
- •1. Получить гамма-глобулин из сыворотки крови крупного рогатого скота риваноловым методом
- •2. Провести контроль качества готового препарата
- •3. Расфасовать готовый препарат
- •8. Список использованной литературы
- •Содержание
Отбор животных-продуцентов. Грундиммунизация
Получение гипериммунных сывороток осуществляется в несколько этапов:
1. Подбор животных - продуцентов
2. Грундиммунизация (грундирование) - отбор животных из числа завезенных путем создания у них основы иммунитета.
3. Гипериммунизация животных-продуцентов
4. Приготовление сывороточных препаратов
Подбор животных-продуцентов
Всех завезенных на биофабрику животных выдерживают в карантине 45 суток. За это время их всесторонне обследуют с ежедневным (утром и вечером) двукратным измерением температуры тела, проверяют на пораженность гельминтами и при необходимости дегельминтизируют.
Всех животных исследуют на инфекционные болезни, согласно требованиям нормативно-технической документации.
Лошадей исследуют:
1. Caп
2. Трихомоноз
3. Бруцеллез
4. Туберкулез
5. Пироплазмидозы
6. Инфекционная анемия
Крупный рогатый скот исследуют:
1. Туберкулез
2. Бруцеллез
3. Лептоспироз
Свиней исследуют:
1. Туберкулез
2. Бруцеллез
Овец исследуют:
1. Бруцеллез
2. Туберкулез
3. Паратуберкулез и др.
При отборе животных-продуцентов учитывают их физиологические и иммуннобиологические показатели.
На активность выработки животным-продуцентом гипериммунной сыворотки антител влияют:
1. Тип нервной деятельности животного-продуцента
2. Реактивность организма
3. Порода
4. Пол
5. Конституция
6. Возраст
Лошадей используют в возрасте от 3 до 12 лет, помеси донской и казахской пород, массой 450-500 кг.
Волов используют в возрасте от 3 до 8 лет, массой не менее 350 кг, красностепной, калмыцкой, симментальской, швицкой астраханской пород.
Свиней используют в возрасте 5-6 месяцев, массой не менее 80 кг, крупной белой породы.
Овец, баранов и валухов используют в возрасте 2-3 лет и массой 30-45 кг (для получения диагностических сывороток и сывороточных сред).
Учитывая, что введение антигенов животным и периодическое кровопускание приводят к нарушению обмена веществ и анемии, а в ряде случаев, и к снижению титров антител, главное внимание уделяют вопросам полноценного, сбалансированного кормления животных-продуцентов.
Кормление животных-доноров отличается от кормления других животных и осуществляется по специально разработанным и утвержденным рационам.
Такие рационы должны содержать по 11-12 кормовых единиц и по 1000-1200 г переваримого протеина, а также включать сочно-витаминные корма и быть строго сбалансированными по минеральному составу.
Для восстановления крови после крововзятия важно правильно организовать минеральное кормление животных.
На 1 кг сухого корма лошадей должно приходиться:
железа - 145-165 мг;
меди - 15-18 мг;
кобальта -1,2-1,4 мг;
марганца - 9 мг.
Для восстановления красной крови лошадям вводят в рацион эритроциты, фибрин, кормовые антибиотики, проращенный овес. Иногда проводят реинфузию эритроцитов.
Кормят животных-продуцентов 3-5 раз в день, водопой - вволю, соль лизунец - вволю (кроме свиней).
Крупных животных содержат индивидуально, мелкий рогатый скот и свиней - группами.
