Причины гипербилирубинемии, виды желтух. Диагностическое значение общего, прямого и непрямого билирубина. Метод определения билирубина в крови.
В желч. пуз. из БК → отщ. глюкуроновая к-та → Red до уробилиногена (в желч. пуз., тонк. киш.), стеркобилиногена (в ниж. отд. киш.). → Уро-/Стеркобилины= УРОБИЛИНОИДЫ (выв. с фекальными массами, 40-280 мг/сут).
Часть уробилиноидов всас.: уробилиноген (в тонк. к.) → воротная вена → печень → разруш. до пирролов → выв. с желчью (ЭнтероГепатич. уробилиногеновый цикл). Стеркобилиноген → геморроидальные вены → общ. кровоток → почки. О,6-4,0 мг/сут – уробилиноиды мочи.
БИЛИРУБИНУРИЯ св. с БК. Причины: восп. в печени (N БК в крови мало).
ЖЕЛТУХИ.
ДЛЯ ИССЛ ОБ:
1. Прямые спектрофотометрические методы, осн. на измер. абсорбции билирубина при 440‑460 нм, источником ошибок здесь является интерференция желтых небилирубиновых пигментов;
2. Ферментативные методы, осн. на окислении пигмента медьсодержащим ферментом билирубиноксидазой (КФ 1.3.3.5.), с образованием биливердина и исчезновением абсорбции при 460 нм. Методы этой группы точны и отличаются высокой специфичностью и чувствительностью;
3. Колориметрические диазометоды, базируются на взаимодействии билирубина с диазотированной сульфаниловой кислотой с образованием азопигментов. Под воздействием кислоты разрывается тетрапирроловая структура билирубина с образованием двух дипирролов, углеродные атомы метиленовых групп вступают в прямую реакцию с диазотированной сульфоновой кислотой (диазосмесь) с образованием розово-фиолетовых изомеров азодипиррола с максимумом поглощения при 530 нм. Связанный билирубин реагирует быстро, несвязанный –– только после добавления акселератора (кофеин, метанол, мочевина, бензоат или гидроокись натрия, уксусная кислота и другие). Последний освобождает билирубин из комплекса с белками и тем самым ускоряет реакцию азосочетания. Образовавшийся азокраситель ведет себя как кислотно-основной индикатор с несколькими цветными переходами: в сильнокислой среде он окрашен в фиолетовый цвет, в слабощелочной и слабокислой — в розовый, в сильнощелочной среде — в синий или зеленый цвета.
4. Электрохимические методы с использованием платинового и ртутного электродов;
5. Хроматографическое разделение отдельных фракций билирубина;
6. Флюорометрические методы, используется свойство свободного билирубина после поглощения при 430 нм испускать свет длиной 520 нм. Позволяют определить концентрацию неконъюгированного билирубина и, после обработки детергентом, общего билирубина главным преимуществом метода является возможность использовать микроколичества сыворотки.
Унифицированным методом является метод Йендрашика‑Клеггорна‑Грофа по диазореакции в щелочной или слабокислой среде в присутствии акселератора.
6. Энергетический обмен
62. Общие и специфические пути катаболизма белков, жиров и углеводов
(по Кребсу). Виды биологического окисления.
Человек и животные – гетеротрофы. Метаболизм: аэробный, анаэробный. 1 моль Glc (180 г) → анаэр:45’000 кал, аэр:686’000 кал. Энергетич. обмен – трансформация Е хим. в-в в Е АТР или др. конвертир. формы и исп. кл. этих форм Е для соверш. работы. Конвертир. формы Е: АТР, ΔμН+, ΔμNa+. Пища – источник Е, но она почти не сод. первичных доноров Н+ (в-в, кот. легко м.б. окислены) и восстановленных эквивалентов. Перв. доноры: ПВК, АсСоА, α-КГ, сукцинил-СоА, фумарат, оксалоацетат.
Стадии катаболизма:
Биологическое Ох – Ох орг. в-в в живом организме; –сов-ть б/х р-ий, происх. в жив. орг., в кот. орг. в-ва через ряд посл. р-ий подв. Ох; – сложный долгий многоступенч. процесс, в кот. участв. Red-Ox ферменты (в он., ДГ). ДГ: никотиновые (NADHH+ более энергоемкое соед, чем FADH2), флавиновые (FAD – более сильный восстанов., чем NAD+).
Синтез АТР: ADP + Pi –(+E)→ ATP + H2O
В орг. Ох, как правило, сопряжено с фосфорилированием → окислительное фосфорилир. (идет на внутр. мембр. мтх; синт. АТР из ADP и Pi, сопряж. с Ох субстр. и переносом е по дых. цепи).