СТРАТЕГИЯ ОЧИСТКИ БЕЛКОВ
Подготовка «Захват» Промежуточная «Полировка» очистка
ТКА РЕКОМБИНАНТНЫХ ВАРИАНТОВ ГЛУТАМИЛЭНДОПЕПТИ
BIGEP |
Purification |
Total |
Amount of |
Yield, |
Purification |
form |
stage |
protein, mg |
protein of |
% |
rate |
|
|
|
interest, % |
|
|
SPM |
IB solution |
10 |
34 |
100 |
1.0 |
|
IEC |
3 |
80 |
70 |
2.4 |
|
GPC |
1.5 |
100 |
44 |
2.9 |
PM |
IB solution |
16 |
72 |
100 |
1.0 |
|
IEC |
7.5 |
89 |
58 |
1.2 |
|
GPC |
5 |
100 |
43 |
1.4 |
PEM |
IB solution |
15 |
77 |
100 |
1.0 |
|
IEC |
7.2 |
92 |
58 |
1.2 |
|
GPC |
5.5 |
100 |
48 |
1.3 |
M |
IB solution |
18 |
86 |
100 |
1.0 |
|
IEC |
8 |
95 |
49 |
1.1 |
|
GPC |
7 |
100 |
45 |
1.2 |
чистка металлопротеазы термоактиномицет
Purification stages |
Total |
protein |
|
(mg) |
E. coli cell lysate |
168,0 |
Anion exchange |
21,1 |
chromatography on |
Econo-Pac High Q column |
|
Hydrophobic interaction |
6,0 |
chromatography on Phenyl |
Sepharose CL-4B |
|
Size exclusion |
4,1 |
chromatography on |
Superdex 75 HR column |
|
Proteolyt ic activity (U/mg)
8,3
29,3
37,3
41,0
Yield by activity
(%)
100,0
44,2
15,9
12,1
Purifi- catio n rate
1,0
3,5
4,5
4,9
Вопросы для
самоподготовки• Структурная организация белков: общие положения.
•Хроматографические методы разделения: обращенно-фазовая, гидрофобная, ионообменная, гельпроникающая и аффинная хроматография.
•Электрофоретические методы разделения: изоэлектрофокусирование и SDS- электрофорез.
•Центрифугирование, разделение
осаждением, диализ и