Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лекция-Генетика и ПЦР.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
272.25 Кб
Скачать

24 Экстракции за 40-60 мин.

ВКО:

-эндогенный – о качестве забора материала и его сохранности.

-экзогенный –контроль эффективности экстракции и эффективности удаления ингибиторов

ПЦР / ОТ-ПЦР. Данный вид ВКО добавляется на стадии экстракции.

Учитываетя по своему каналу , обычно по каналу FAM

Клинический материал содержит широкий спектр ингибиторов амплификации:

- Гемоглобин крови

-Иммуноглобулины

-Слизь (мукополисахариды)

-Ферменты (нуклеазы ,протеазы)

-Билирубин и желчные кислоты

-Мочевина

-Гормоны

-Ионы металлов

-Продукты жизнедеятельности сопутствующей микрофлоры

- Гепарин

Оборудование.

Термоциклеры-приборы ,способные циклически изменять температуру и время на основе

специальной заданной программы.

Амплификаторы отличаются друг от друга системами охлаждения ,способами обогрева ,

режимами регулирования смены температуры ,количеством платформ .

В термоциклере пробирки помещаются в металлический блок ,температура которого изме-

няется с помощью элемента Пелтье ,который позволяет изменять температуру блока с боль-

шой скоростью , что сокращает продолжительность каждого цикла ПЦР.

Современныетермоциклеры приспособлены к использованию тонкостенных пластиковых

пробирок для реакционной смеси , что позволяет ускорить теплообмен между блоком прибора и реакционной смесью и дополнительно сократить время проведения реакции.

Регулирование по матрице , при котором заданный в программе температурный профиль

трактуется как температурный профиль термоблока.

Схема амплификации

Схема амплификации