- •Иммунологические методы диагностики иммунологические реакции
- •Реакции агглютинации.
- •Ориентировочные реакции агглютинации.
- •Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации
- •Развернутые реакции агглютинации.
- •Реакция вейля при сыпном тифе
- •Реакции преципитации.
- •Реакция микропреципитации на примере экспресс-диагностики сифилиса (эдс).
- •Реакция нейтрализации бактериальных экзотоксинов
- •2. Единицы измерения токсина и антитоксина
- •Реакция преципитации в агаре.
- •Реакция преципитации в геле.
- •Реакции, протекающие с участием комплемента реакции лизиса.
- •Определение антирезус - антител в сыворотке.
- •Критерии учета результатов реакции
- •Реакции с применением меченых антигенов и антител реакции иммунофлюоресценции.
- •Метод радиоиммунного анализа – риа.
- •Метод иммуноферментного анализа – ифа.
- •Иммуноблоттинг.
- •Иммуннохемилюминесцентный метод.
- •Методы индикации и идентификации вирусов.
- •Цветная проба.
- •Реакция торможения цветной пробы
- •Реакция торможения гемагглютинации.
- •Реакция гемадсорбции (рГадс).
- •Реакция торможения гемадсорбции (ртГадс)
- •Цитопатогенное действие вируса (цпд).
- •Реакция торможения цитопатогенного действия (рт цпд).
- •Реакция бляшкообразования (бо).
- •Динамика выработки антител различных классов.
- •Принципы диагностики torch – инфекций.
- •Диагностика токсоплазменной инфекции.
- •Диагностика герпесвирусной инфекции.
- •Диагностика цитомегаловирусной инфекции.
Критерии учета результатов реакции
+ + + + |
Полная задержка гемолиза, эритроциты в осадке, надосадочная жидкость прозрачная; резко положительная РСК. |
+ + + |
Неполная задержка гемолиза, эритроциты в осадке, надосадочная жидкость прозрачная, слабо розового цвета; положительная РСК. |
+ + |
Частичная задержка гемолиза, надосадочная жидкость красно-розового цвета, прозрачная; слабо положительная РСК. |
+ |
Осадок незначительный, жидкость красная; сомнительная РСК. |
- |
Полный гемолиз, прозрачная красная жидкость. Отрицательная РСК. |
Рис.
17. Реакция связывания комплемента.
РЕАКЦИЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ ТРЕПОНЕМ (РИТ)
(извлечение из справочника М.О. Биргера. М., 1982. С. 505-506)
Реакция основана на наблюдениях Д.К. Заболотного (1907) и П.П. Маслаковца в отношении потери подвижности бледной спирохеты при добавлении к её культуре сыворотки крови больных сифилисом в присутствии комплемента.
Ингредиенты реакции:
1. Антиген — взвесь тканевых спирохет (получают из размельчённого яичка кролика, заражённого сифилисом).
2. Антитела — сыворотка обследуемого больного.
3. Комплемент (сыворотка крови морской свинки);
Реакцию выполняют в меланжерах. Основной опыт — соединение в смесителе сыворотки больного, взвеси тканевых спирохет и активного комплемента.
После 19-20 — часовой инкубации при + 35Сº на предметное стекло наносят каплю содержимого из меланжера, кладут на неё покровное стекло и в микроскопе с темнопольным конденсором определяют количество подвижных и неподвижных спирохет. Опыт сопоставляют с контролями и по формуле вычисляют процент специфически иммобилизированных антителами спирохет.
Таблица 10.
Схема постановки Реакции иммобилизации трепонем
№ п/п |
Ингредиенты |
№ меланжеров |
|||||||
1 |
2 контр. Компле мента |
3 |
4 контр. Антигена |
5 |
|||||
1. |
Сыворотка обследуемого |
До метки 1 |
До метки 1 |
- |
- |
- |
|||
2.
|
Взвесь тканевых спирохет в смеси с активным комплементом |
До метки 2 |
- |
До метки 2 |
- |
- |
|||
3.
|
Смесь тканевых спирохет с инактивированным комплементом |
|
До метки 2 |
-
|
До Метки 2
|
- |
|||
4.
|
Взвесь тканевых спирохет без комплемента |
- |
- |
- |
- |
До метки 2 |
|||
Процент специфически иммобилизированных спирохет в опыте определяют по формуле: Х = Tк-То x 1000, где
Тк - число подвижных трепонем в контроле (с инактивированным комплементом);
То – число подвижных трепонем в опыте (с активным комплементом).
Результат считают положительным, если процент иммобилизации выше 50, слабоположительным – от 31 до 50, сомнительным – от 21 до 30, отрицательным – ниже 30.
