Реакция вейля при сыпном тифе

п/п	Ингредиенты	Разведение сыворотки					Контроли
		1/25	1/50	1/100	1/200	1/400	Сыворот ки		антигена
1.	Физиологический раствор	-	0,25	0,25	0,25	0,25	-		0,25
2.	Сыворотка больного (1:25)	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	дез р-р	0,25 (1:5)	-
3.	Антиген из риккетсий Провачека (50 млн.м.т./мл)	0,25	0,25	0,25	0,25	0,25	-		0,25

Пробирки встряхнуть, поместить в термостат на 24 часа и 2 часа при комнатной температуре.

Диагностическим титром РАР считают положительный результат в разведениях 1:100 – 1:160.

Максимальные титры антител при первичном сыпном тифе доходят до 1:1280 – 1:3200, при повторном (болезнь Бриля) – до 1:640 (чаще 1:160 – 1:640).

Агглютинины у реконвалесцентов в 88,5 % сохраняются 1 – 3 месяца. После чего они сохраняются в титрах 1:50 – 1:400 – у небольшого числа переболевших, а через год полностью исчезают из кровотока.

Диагностический титр у детей – 1:100, у взрослых – 1:200.

Анамнестическая реакция редко бывает положительной в титре 1:20.

Реакции преципитации.

Реакции преципитации (РП) предложены Краусом (1897) и основаны на феномене образования видимого осадка (преципитата) или общего помутнения среды после взаимодействия растворимых, либо находящихся в коллоидном дисперсном состоянии антигена с антителом. РП позволяют быстро (в течение нескольких секунд) выявлять незначительные количества антигена. Они очень чувствительны, их применяют для тонкого иммунохимического анализа, выявляющего отдельные компоненты в смеси антигенов. Метод имеет несколько разновидностей.

1. Реакция кольцепреципитации

2. Реакция микропреципитации

3. Реакция флокуляции

4. Реакция преципитации в геле

5. Реакция преципитации в агаре

6. Иммуноэлектрофорез.

Реакция кольцепреципитации. Как вариант этой реакции широко известна реакция Асколи. Она применяется для поиска антигена возбудителя сибирской язвы в материале (например, на шкурках животных).

Постановка реакции осуществляется в тонких пробирках и заключается в том, что вначале в пробирку вносится сыворотка, содержащая антитела к возбудителю сибирской язвы, на нее сверху осторожно наслаивается термопреципитиноген, так, чтобы жидкости не перемешивались. При нахождении антигена в субстрате (спор возбудителя сибирской язвы) в месте соприкосновения двух жидкостей возникает кольцо преципитации (мутное кольцо). Схема реакции представлена на рис. 9.

Рис.9. Выявление АГ в реакции кольцепреципитации.

Реакция микропреципитации на примере экспресс-диагностики сифилиса (эдс).

Данная реакция выполняется для скрининга сывороток при массовых обследованиях на сифилис. В качестве антител применяются сыворотки крови пациентов, антигеном служит кардиолипиновый антиген (неспецифический).

Реакция выполняется в лунках иммунологического планшета. Необходимо иметь два контроля: в первом в качестве ингредиентов применяется физиологический раствор и кардиолипиновый антиген (контроль мутности), во втором контроле – заведомо положительная сыворотка и кардиолипиновый антиген (контроль преципитата).В опытной лунке – изучаемая сыворотка больного, взятая в разведении 1:10 и кардиолипиновый антиген. После смешивания реагентов в течение 2-5 минут осторожно покачиваем планшет, в течение этого времени формируется преципитат, жидкость в лунке становится прозрачной. Учет реакции ведется по четырех плюсовой системе. Результат, оцениваемый как один и два плюса считается сомнительным, на 3 и 4 ++++ - положительным. Схема реакции микропреципитации представлена на рис. 10.

Рис. 10 Экспресс-диагностика сифилиса (ЭДС).