государственное бюджетное образовательное учреждение высшего

профессионального образования

«Северо-Осетинская государственная медицинская академия»

Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

КАФЕДРА МИКРОБИОЛОГИИ

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ РАЗРАБОТОК

ПО МИКРОБИОЛОГИИ, ВИРУСОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

ДЛЯ СТУДЕНТОВ ЛЕЧЕБНОГО ФАКУЛЬТЕТА

ВЕСЕННИЙ СЕМЕСТР

Владикавказ 2012

Под редакцией доктора медицинских наук, профессора, зав. каф. микробиологии ГБОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития Российской Федерации Л.Я. Плахтий.

Авторский коллектив: асс.к.м.н. Черткоева М.Г., асс.к.м.н. Гатиева Е.И.

Основное назначение разработок – методическая помощь студентам к каждому практическому занятию в весеннем семестре. Указания составлены в соответствии с Федеральным государственным образовательным стандартом Высшего и профессионального образования (2011г.)

РЕЦЕНЗЕНТЫ:

Л.В. Бибаева –д.м.н., профессор, зав.кафедрой биологии и гистологии ГБОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития Российской Федерации.

А.Р.Кусова–д.м.н., профессор зав. кафедрой общей гигиены и физического воспитания ГБОУ ВПО СОГМА Минздравсоцразвития Российской Федерации.

Методические рекомендации утверждены на заседании ЦУКМС ГБОУ ВПО «Северо-Осетинская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ» от _____________201 г., протокол №

Практическое занятие №1. Тема: Морфология микробов. Микроскопический метод исследования.

Учебная цель:

1. Изучить морфологию отдельных представителей бактерий.

2. Освоить технику микроскопирования.

3. Освоить простой метод окраски микроорганизмов.

Студент должен знать:

1. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории, режим

работы и назначение.

2. Классификацию бактерий.

3. Строение микроскопа.

4. Методы микроскопического исследования.

5. Технику микроскопического исследования.

Студент должен уметь:

1. Приготовить мазок из чистой культуры, окрасить простым способом.

2. Микроскопировать с иммерсионной системой.

План занятия:

1. Знакомство с правилами работы и основами техники безопасности в микробиологической лаборатории.

2. Устройство и оборудование микробиологической лаборатории, режим работы и назначение.

3. Классификация бактерий.

4. Морфология бактерий, методы изучения (световая, темнопольная, фазовоконтрастная, электронная микроскопия).

5. Этапы приготовления мазка.

6. Простой метод окраски бактерий.

7. Приготовление мазков из культуры стафилококка и кишечной палочки, окраска простым методом.

8. Демонстрация препаратов из микрококков, диплококков, тетракокков, сарцин, стафилококков, стрептококков, кишечной палочки, бацилл, вибрионов.

Самостоятельная работа студентов

1. Приготовление мазка и окраска простым методом (под руководством

преподавателя).

2. Освоение техники микроскопирования. Микроскопическое изучение

морфологии бактерий:

3. Просмотр демонстрационного мазка из чистой культуры стафилоккока

(Staphylococcus aureus). Окраска генциан-виолетом.

3. Просмотр демонстрационного мазка из чистой культуры кишечной

палочки (E. coli). Окраска — водным фуксином.

3. Оформление протокола исследования.

Информационный материл по теме

1. Техника приготовления мазков.

Мазки готовят на обезжиренных предметных стеклах, предварительно обрисовав карандашом по стеклу место будущего мазка с противоположной стороны предметного стекла. При росте бактерий на жидкой питательной среде, материал берут стерильной бактериальной петлей, наносят на стекло и растирают над очерченной площадкой. В случае роста бактерий на плотной питательной среде, на предметное стекло предварительно наносят петлей каплю воды и материал растирают.

3. Бактериальную петлю перед использованием с оставшейся культурой стерилизуют в пламени горелки. Приготовленный мазок высушивают на воздухе или держа высоко над пламенем спиртовки.

4. После этого препарат фиксируют, для чего мазок стороной, где нет материала, троекратно проводят через середину пламени горелки. Фиксация позволяет убить микробы, прикрепить их к стеклу и, наконец, убитые микробы окрашиваются лучше, чем живые.

2. Техника простых методов окраски

Окраска бактерий преследует цель сделать их резко отличными от фона, что позволяет изучить под микроскопом их морфологию и структуру. В микробиологии используют простые и сложные методы окраски препаратов.

При ПРОСТОМ СПОСОБЕ окраски, мазок окрашивают каким-либо одним красителем, например, водным фуксином (2-3 мин.) или метиленовой синью (2-3 мин.), промывают водой, высушивают и микроскопируют.