- •Часть 1
- •Содержание
- •1. Теоретическая часть Тема: Углеводы.
- •Функции
- •2. Окисление сахаров. При окислении альдоз в кислой среде образуются уроновые кислоты, из которых важнейшей является глюкуроновая кислота, входящая в состав основного вещества соединительной ткани.
- •4.Моносахариды могут присоединять аминогруппу (образуются глюкозамины) и ацетилироваться.
- •Производные моносахаридов
- •Олигосахариды
- •Дисахариды
- •Полисахариды
- •Гомополисахариды
- •Гетерополисахариды
- •Использование углеводов
- •Контрольные вопросы
- •Тема: Липиды
- •Функции липидов Резервно-энергетическая функция
- •Структурная функция
- •Сигнальная функция
- •Защитная функция
- •Жирные кислоты
- •Роль жирных кислот
- •Источники
- •Классификация жиров
- •Простые жиры Нейтральный жир
- •Стериды Холестерол
- •Источники
- •Выведение из организма
- •Функции холестерола
- •Сложные жиры Гликолипиды
- •Строение гликолипидов
- •Фосфолипиды
- •Глицерофосфолипиды
- •Сфингофосфолипиды
- •Липопротеиды
- •Контрольные вопросы
- •Тема: Белки
- •Строение белков
- •Физико-химические свойства белков
- •Строение и свойства аминокислот
- •Физические свойства аминокислот
- •Получение аминокислот
- •Химические свойства
- •Классификация аминокислот
- •Тема: Классификация белков
- •Контрольные вопросы
- •Химические формулы всех аминокислот, входящих в состав белков, необходимо запомнить!
- •2.Лабораторный практикум Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории.
- •Тема :Углеводы
- •Фурфурол
- •Задание 5. Реакция Биаля.
- •Задание 6. Реакция с флороглюцином.
- •Задание 7. Реакция на сахарозу.
- •Тема: Жиры Задание 1. Обнаружение жиров
- •Задание 2 . Качественная реакция на лецитин
- •Задание 3. Качественные реакции на холестерин
- •Задание 5. Эмульгирование жиров
- •Физико-химические константы липидов
- •Тема: Белки
- •Цветные реакции на белки. Задание 1. Обнаружение в белках пептидных связей (биуретовая реакция).
- •Задание 2. Выделение казеина из молока.
- •Цветные реакции с белками на обнаружение карбоновых аминокислот
- •Задание 1. Нингидриновая реакция (на l- аминокислоты).
- •Задание 2. Реакция Сакагучи на аргинин.
- •Задание 3. Реакция Фоля на цистин и цестеин.
- •Цветные реакции с белками на обнаружение циклических аминокислот. Задание 1. Ксантопротеиновая реакция.
- •Задание 2. Реакция Вуазене на триптофан.
- •Задание 3. Реакция Паули.
- •Задание 4. Обнаружение хромопротеидов.
- •Задание 5. Обнаружения гликопротеидов
- •Реакции осаждения белков
- •Задание 1. Проба с сульфасалициловой кислотой
- •Задание 2. Проба с кипячением
- •Задание 3. Кольцевая проба Геллера
- •Задание 4. Осаждение этанолом и тху
- •Задание 5. Высаливание белков хлористым натрием
- •Словарь терминов
- •Литература
Задание 5. Эмульгирование жиров
Действию ферментов желудочно – кишечного тракта и тканей доступны жиры, находящиеся в эмульгированном состоянии. В желудочно – кишечном тракте есть условия для превращения жиров в эмульсию, а основным ее стабилизатором (эмульгатором) является соли желчных кислот, белки, фосфолипиды, мыла и гидрокарбонаты щелочных металлов.
Ход работы: Берут 5 пробирок. В первую наливают 1 мл воды, во вторую – 1 мл желчи, в третью 1 мл раствора белка, в четвертую 1 мл раствора мыла, в пятую 1 мл раствора карбоната натрия. В каждую пробирку добавляют по 5 капель подсолнечного масла, энергично встряхивают и оставляют на 5 минут. Во всех пробирках кроме первой, образуется стойкая эмульсия.
Физико-химические константы липидов
Цель: Ознакомиться с физико – химическими константами жира.
О природе и качестве жира можно судить по его физическим и химическим константам или числам. Среди физических констант жира наибольшее значение имеют его температура плавления, застывания и вязкость, среди химических – кислотное число, йодное число, эфирное число и число омыления.
Температура плавления жира – один из показателей, по которому можно, в известной степени, судить об усвояемости жира. Легкоплавкие жиры легче эмульгируются, а следовательно, и легче усваиваются. Природные жиры определенной точки плавления не имеют, поскольку являются не индивидуальными химическими соединением, а смесью различных глицеридов, свободных жирных кислот, пигментов, витаминов и других веществ. Температура плавления жиров зависит от вида животного и колеблется в следующих пределах:
Козы -46-48º С
Овцы - 49-54º С
Свиньи - 37-45º С
Лошади - 28-32º С
Олени - 48-52º С
Верблюды - 36-48º С
Кролики - 22-25º С
Коровы -48-50º С
Задание 1.Определение числа омыления жира
Число омыления – количество мл гидроксида калия, необходимое для нейтрализации всех жирных кислот (свободных и связанных в форме глицеридов), содержащихся в 1г жира. Число омыления некоторых доброкачественных жиров и масел имеет следующие величины:
Говяжий жир -190-200,
Бараний жир -192-198
Свиной жир -193-200
Коровье масло -212-247
Льняное масло -187-195
Ход работы: В одну колбу (опытная проба) помещают 0,5 г жира, в другую (контрольная проба) –0,5 мл воды и в каждую добавляют из бюретки по 15 мл 0,5н спиртового раствора гидроксида калия. К колбам присоединяют обратный холодильник и нагревают смесь при осторожном встряхивании на водяной бане до слабого кипения в течении 30-40 минут.
После омыления в колбы добавляют по 4 капли фенолфталеина и содержимое титруют 0,5н раствором HCl до исчезновения розового окрашивания (до нейтральной реакции).
Число омыления определяют по формуле:
Х=(В-А) × К× 28,05/С
Где Х – число омыления, г
(β-α)- разность результатов титрования контрольного и опытного
образцов раствором соляной кислоты (0,5 моль/л),
К – коэфициент поправки на титр 0,5н раствора HCl,
28,05 – количество мг КОН, соответствующее 1 мл 0,5н раствора
HCl,
С – навеска жира, г
Задание 2. Определение кислотного числа жира
Кислотное число характеризует наличие в жире свободных жирных кислот. Выражают кислотное число количеством мг КОН, необходимым для нейтрализации свободных жирных кислот в 1 г жира. Это число является одним из важнейших показателей, характеризующих качество жира. Кислотное число свежего жира разных сортов обычно не превышает 1,2-3,5. В процессе хранения жира происходит гидролиз глицеридов и накопление свободных жирных кислот. Повышенная кислотность жира указывает на снижение его качества.
Ход работы: В коническую колбу помещают 1 г жира, добавляют 10 мл смеси спирта с эфиром и хорошо перемешивают. После добавления 2-3 капель фенолфталеина раствор быстро титруют 0,1н раствором КОН при встряхивании до появления розовой окраски, не исчезающей в течение 1 минуты.
Кислотное число высчитывают по формуле:
Х=А×5,6×К/С
Где Х – кислотное число, мг
Α – объем 0,1н раствора гидроксида калия,
израсходованного на титрование исследуемой
пробы, мл
5,6- количество мл КОН, содержащееся в 1мл 0,1н.
раствора КОН,
К- коэффициент поправки на 0,1н. Раствора КОН,
С- навеска масла, г
Задание 3. Определение эфирного числа жира
Эфирное число – количество мл гидроксида калия, необходимое для нейтрализации жирных кислот, образующихся при омылении триацилглицеридов, содержащихся в 1 г жира. Оно определяется по разнице между числом омыления жира и его кислотным числом.
Задание 4. Определение йодного числа
Йодным числом называют количество граммов йода, которое может прореагировать со 100г жира. Это число позволяет оценить степень непредельности жира, обусловленную наличием в нем глицеридов, кислоты которых содержат двойные связи, способность его к окислению, восстановлению и другим реакциям. Чем больше в жире ненасыщенных жирных кислот, тем выше его йодное число.
Йодное число некоторых жиров и масел колеблется в следующих пределах:
Говяжий -27-47
Бараний -31-46
Свиной -46-66
Собачий -56-67
Подсолнечное масло - 129-136
Льняное масло до 201
Определение йодного числа основывается на реакции присоединения йода по месту разрыва двойных связей у ненасыщенных жирных кислот
Не прореагировавший йод оттитровывают тиосульфатом натрия.
Ход работы: В первую пробирку помещают навеску жира 0,1-0,2г (исследуемая проба), во вторую – 0,1-0,2мл воды контрольная проба), прибавляют по 10 мл спиртового раствора йода, закрывают пробками, встряхивают и выдерживают в темноте. Через 5 минут пробы титруют при постоянном взбалтывании 0,1н. раствором тиосульфата натрия, сначала до появления желтого окрашивания, а затем, добавив 1 мл 1%-ного раствора крахмала, - до исчезновения синего окрашивания.
Йодное число вычисляют по формуле:
Х=(В-А) ×К×0,01269×100/С
Где Х – йодное число, г
(в-а) – разница результатов титрования контрольного и
опытного образцов гипосульфитом, мл
К- коэффициент поправки на титр 0,1н. Раствора
гипосульфита натрия
0,01269 – количество граммов йода, эквивалентное 1 мл 0,1н.
раствора гипосульфита натрия
100- коэффициент перерасчета на 100г
С- навеска жира, г
