Задание 2 . Качественная реакция на лецитин

Лецитин является одним из представителей фосфатидов, входящих в состав биологических мембран.

Лецитины входят в состав клеток животного и растительного организмов. Особенно богаты ими мозг, нервная ткань, печень, почки, желток яйца, сперма, кровь. Фосфатиды различаются способностью растворяться в органических растворителях. Большинство фосфатидов плохо растворимо в ацетоне, что используется при выделении их из биологических объектов.

СН2─О─СО─С17Н35

│

СН─О─СО─С17Н33 СН3

│ │

СН2─О──Р─О─СН2─СН2─N─СН3

/ \

НО СН3

Ход работы:В пробирку помещают 50-100 мг яичного желтка, добавляют 3-5 мл кипящего спирта. Содержимое пробирки тщательно перемешивают стеклянной палочкой в течении 5-10 минут. После этого жидкость фильтруют в сухую пробирку. В другую пробирку наливают 2-3 мл ацетона и каплями добавляют фильтрат. Наблюдают появление мути, а затем выпадение осадка лецитина. К оставшемуся фильтрату добавляют каплями дистилированную воду и наблюдают образование стойкой эмульсии.

Задание 3. Качественные реакции на холестерин

Холестерин относится к стеринам, представляет собой вторичный циклический спирт.

Много холестерола содержится в нервной ткани, в желчи, сперме, ланолине. Это важнейший структурный компонент клеток, он служит исходным веществом при биосинтезе стероидных гормонов, витаминов группы Д, желчных кислот и других важных соединений. Холестерол и его эфиры не растворимы в воде, но хорошо растворимы в органических растворителях: хлороформе, эфире, горячем спирте и других.

Ход работы: В ступке растирают около 3 г измельченного мозга с 6-10г гипса до гомогенной массы. Полученную густую массу с помощью шпателя наносят тонким слоем на стеклянную пластину и высушивают в сушильном шкафу (60ºС). Высушенную массу очищают скальпелем в сухую ступку и растирают в порошок. К сухому порошку в пробирке добавляют 6 мл хлороформа, тщательно взбалтывают в течении 5 минут и фильтруют. Фильтрат разливают в 3 пробирки и используют для проведения цветных реакций.

а) Реакция Сальковского

К фильтрату добавляют такой же объем серной кислоты и осторожно встряхивают. После расслоения фаз наблюдают за изменением окраски: верхний слой, содержащий холестерин в хлороформе, окрашивается в пурпурно – красный цвет, а нижний слой серной кислоты – в темно – красный цвет с зеленой флуоресценцией. Раствор холестерола в хлороформе сливают в сухую пробирку. Окраска раствора со временем переходит в фиолетовую, затем в зеленую и, наконец, в желтую.

б) Реакция Либермана – Бурхарда

В сухую пробирку с фильтратом добавляют 10 капель уксусного ангидрина и 2 капли концентрированной серной кислоты. Содержимое пробирки тщательно встряхивают и наблюдают образование красной окраски, которая переходит в красно – фиолетовую, фиолетовую, синию и зеленую. При незначительном содержании холестерина в растворе образуется сразу зеленая окраска.

в) Реакция Виндауза

В пробирку к раствору холестерола в хлороформе осторожно прибавляют каплями несколько мл 5%-го раствора брома в ледяной уксусной кислоте до появления бурого окрашивания, которое не исчезает в течении нескольких минут. Образующийся в ходе реакции дибромхолестерол выделяется в виде кристалликов игольчатой формы.