1. Консервация тканей животного происхождения по Филатову и по Краузе

Консервация ткани по н. И. Краузе

Ткань берут от только что убитого животного, тщательно отмывают от крови и погружают в банку из темного стекла с притертой пробкой, наполненной свежим 2%-ным раствором хлорацида из расчета 100 грамм ткани на 1 литр раствора. 

Раствор хлорацида по мере дехлорирования заменяют свежим. Обрабатывают ткани 24—48 часов, после чего переносят их в склянки с физиологическим раствором, где и хранят. Перед употреблением ткань погружают на 15—20 минут в свежий раствор хлорацида, затем 15—20 минут промывают в физиологическом растворе. Неиспользованную ткань утилизируют. 

П. Ф. Симбирцев и другие значительно упростили метод и предлагают помещенную в стеклянные банки с хлорацидом ткань выдерживать 7—10 дней. 

Первые 3—4 дня раствор хлорацида менять ежедневно, затем на 7-й или 10-й день. После этого ткань считается готовой к употреблению. Она обеспложена (стерильна), поэтому не требуется автоклавирования. Коллоиды ее становятся набухшими и относительно легко подвергаются протеолизу.  

Хранится ткань в этом растворе 5 месяцев. В случае использования ткани в более поздние сроки за сутки до этого раствор хлорацида следует заменить свежим. Обмывать ткань физиологическим раствором необоснованно, поскольку возможно ее загрязнение. 

Консервация тканей по в. П. Филатову

От здорового животного сразу после убоя ткань берут с соблюдением правил асептики и антисептики и помещают в стерильные стеклянные широкогорлые банки с притертыми пробками или закрывают стерильными марлевыми тампонами и ставят их в рефрижератор с температурой 4 °С или в ледник на дощечку, положенную на поверхность льда, на 6—8 суток. 

При взятии кожи волосы сбривают, кожу протирают спиртом и обрабатывают 1 %-ным спиртовым раствором бриллиантового зеленого. По истечении срока консервации ткань промывают холодной кипяченой водой, режут на куски 4 х 5 см и завертывают в сложенные вчетверо марлевые салфетки, укладывают в бикс, на дно которого настилают вату. 

Бикс помещают в автоклав и выдерживают 1 час при температуре 120 °С. После автоклавирования ткань имплантируют под кожу животному. Неиспользованную ткань утилизируют. 

И. А. Калашник предложил неиспользованные кусочки ткани, завернутые в салфетку, помещать в стеклянные флаконы с притертыми пробками, а затем автоклавировать. После автоклавирования пробки залить парафином. Такая ткань при пониженной температуре хранится в течение 2—3 мес. 

2. Заживление раны по вторичному натяжению

Заживление по вторичному натяжению. Этот вид заживления наблюдается при случайных, операционных инфицированных и огнестрельных ранах. Характерной особенностью такого заживления является двухфазность, нагноение, заполнение раны грануляциями и покрытие их эпителием. В связи с этой особенностью раны заживают более длительно: минимально 3-4 недели, в среднем 1,5-2 месяца и более, что связано со степенью повреждения, топографическим расположением, а также морфо-функциональной особенностью поврежденных тканей и органов. Процесс заживления по вторичному натяжению по существу начинается с момента остановки кровотечения, однако клинико-морфологически регенеративные процессы выявляются лишь в конце первой фазы по мере биологического очищения раны от мертвых тканей, инородных предметов, нейтрализации или подавления микробов.

Клинико-морфологические изменения в фазе гидратации раневого процесса. Через 3-4 ч после ранения в зоне раны постепенно нарастает воспалительный отек, ее полость заполняется сгустками крови и содержит большее или меньшее количество мертвых тканей. У рогатого скота и свиней вместе с этим происходит экссудация фибриногена и превращение его в фибринозный сгусток, заполняющий рану и пронизывающий зону мертвых тканей. По данным В. Б. Борисевича с соавторами, у крупного рогатого скота наряду с фибриногеном отмечается экссудация сиаломукопротеинов, усиливающих барьерную роль фибрина.

К концу вторых суток у рогатого скота и свиней формируется фибринотканевая масса, заполняющая рану, и развивается гнойнодемаркационное воспаление, протеолиз и секвестрация мертвых тканей и фибрина. У лошадей и собак мертвые ткани лизируются, развивается фагоцитоз, в ране появляется гной, повышается общая температура, учащается пульс и дыхание, у крупного рогатого скота общая температура может оставаться в пределах высоких границ нормы; пульс и дыхание учащены. У названных животных наблюдается увеличение сегментоядерных лейкоцитов со сдвигом влево. Чем больше в ране мертвых тканей, тем тяжелее и интенсивнее гнойное воспаление. Нередко оно приобретает гиперергический характер. При этом значительно возрастают общая температура, частота пульса и дыхания, прогрессирует отек и клеточная инфильтрация, припухлость в зоне раны становится плотной, очень болезненной, нарастает угнетение, рана переполняется гноем, развиваются признаки гнойно-резорбтивной лихорадки. Создаются условия для развития раневой инфекции.

При благоприятном течении на  третьи - пятые сутки раневой процесс постепенно переходит в период гранулирования. При этом в местах гнойно-ферментативного освобождения раны от мертвых тканей, а у рогатого скота и свиней между секвестрируемой мертвой и здоровой тканью формируются грануляции. По мере очищения раны от мертвых тканей и формирования грануляций уменьшается нагноение, стихает воспалительная реакция. В местах полного отторжения мертвых тканей рана покрывается раневым секретом. В отличие от гнойного экссудата раневой секрет представляет собой мутноватую жидкость соломенного цвета, тягучей консистенции, содержащую трефоны, некрогормоны и другие физиологически активные и питательные вещества, а также относительно небольшое количество вазогенных, гистиоцитарных клеток и фибробластов. Подсыхая, он превращается в корочки, под которыми протекает процесс гранулирования. Раневой секрет является необходимой средой, обеспечивающей  формирование грануляций. Он стимулирует формирование первичных сосудистых дуг, пролиферацию клеточных элементов и фибробластический процесс. Как и при первичном натяжении (заживлении), первыми регенерируют капилляры. Этому способствует кислая реакция раневой среды, отрицательный электропотенциал раневого секрета, а также стимулирующее влияние трефонов и некрогормонов. Набухание и почкование эндотелия способствуют врастанию его в раневой секрет. Отрастающий эндотелиальный вырост, не встречаясь с таким же выростом противоположной стороны, загибается книзу и, сблизившись с другим эндотелиальным выростом, образует с ним эндотелиальную петлю. Сформированные эндотелиальные петли, канализируясь, превращаются в капиллярные петли, в которых начинает циркулировать кровь. Параллельно с этим вокруг капиллярных петель концентрируются лейкоциты, полибласты, макрофаги, фибробласты, которые превращаются в волокнистую соединительную ткань. Так формируются гранулы, в основе которых залегают капиллярные петли, окутанные волокнистой соединительной тканью. В результате этого поверхность нормальной грануляционной ткани оказывается мелкозернистой.

Сформированная и беспорядочно расположенная в грануляциях сеть капилляров постепенно превращается в параллельно расположенные сосуды, идущие к поверхности грануляций и венулы, направляющиеся от гранулирующей поверхности вглубь.

При благоприятном течении резаные раны, имеющие небольшое количество мертвых тканей, покрываются грануляциями на четвертый-пятый день. Значительно позднее это происходит при ушибленных и огнестрельных ранах с обширной зоной нежизнеспособных тканей. В таких ранах гранулирующие участки перемежаются с некротическими, что задерживает гранулирование всей поверхности раны до полного ферментативного отторжения или расплавления их. Полное освобождение раны от мертвых тканей и сплошное покрытие ее грануляционной тканью указывает на завершение первой фазы раневого процесса и переход во вторую фазу - дегидратации, что при благоприятном течении происходит чаще через цве-три недели.

В фазе дегидратации на первый план выступает процесс гранулирования и заполнения раны грануляциями. Это протекает на фоне ослабления признаков воспаления, постепенного снижения кислой реакции среды и приближения ее к нейтральной (рН 7), а затем слегка щелочной реакции (рН 7,3-7,4). Постепенно происходит формирование, затем созревание и рубцевание грануляционной ткани с частичным разрыхлением формирующегося рубца.

Процесс гранулирования сводится к последовательному напластованию грануляционных слоев. При этом сформировавшийся поверхностный слой грануляций, будучи в состоянии умеренной гидратации, оказывается покрыт гноем, а при полном очищении раны от мертвых тканей раневым секретом - продуктом самих грануляций. В глубжележащих слоях, где последовательно понижается покисление раневой среды, протекают дегидратационные явления, способствующие созреванию грануляций и рубцеванию глубоких слоев.

В процессе созревания грануляций коллагеновые и эластические волокна, теряя часть воды (за счет дегидратационных явлений), уплотняются, становятся тоньше, короче и прочнее. На такие грануляции начинают нарастать эпителий мальпигиева слоя эпидермиса либо слизистых оболочек, а при повреждении полостей - клетки серозного покрова.

В глубоких слоях грануляций дегидратационный процесс протекает более интенсивно, вследствие чего волокнистая структура этих слоев, принимая более правильное расположение, подвергается дальнейшему уплотнению и постепенно превращается в рубцовую ткань, что сопровождается накоплением в ней нейтральных мукополисахаридов. При этом коллагеновые и эластические волокна становятся очень тонкими, прочными и укороченными. В результате этого происходит стягивание (концентрическое рубцевание) раны.

Как только грануляционная ткань заполнит рану до уровня кожных краев, ее рост прекращается. На этом заканчивается период гранулирования и раневой процесс переходит в период эпидермизации и рубцевания. В данном периоде процесс рубцевания постепенно распространяется на более поверхностные слои грануляций. Одновременно с этим в глубоком слое формирующегося рубца протекает процесс разрыхления и частичного рассасывания его, тогда как созревший поверхностный слой грануляций подвергается эпителизации. Нарастание эпителия возможно только на созревшие грануляции. Эпителий не нарастает на гидремичные, воспаленные и на перезревшие - рубцово-перерожденные грануляции. Раннее рубцевание, до заполнения раны грануляциями, затормаживает их формирование и вследствие компрессионного воздействия на кровеносные сосуды и резкого снижения кровоснабжения поверхностных слоев грануляций может приводить к полному прекращению этого процесса и эпителизации. Учитывая изложенное, необходимо систематически следить за состоянием грануляций и управлять процессами гидратации и дегидратации, но для этого нужно уметь отличать нормальные грануляции от патологических.

Нормальные грануляции характеризуются мелкой зернистостью (с просяное зерно или несколько большей величины), они плотные, некровоточивые, розового или ярко-розового цвета, выделяют небольшое количество раневого секрета. Такие грануляции формируются только при нормально протекающем вторичном заживлении ран. Через них не проникают микробы и резко снижается всасывание токсинов и продуктов тканевого распада. Здоровые грануляции, по выражению Б. М. Оливкова, будучи провизорной кожей, заполняя раневой дефект, служат надежным барьером для инфекции, фагируют микробов и стимулируют процесс эпителизации.

Билет 3