- •1.1. Определение и характеристика
- •1.2. Состав микрофлоры основных биотопов человека
- •2. Факторы патогенности анаэробных микроорганизмов
- •2.1. Роль анаэробной эндогенной микрофлоры в патологии человека
- •3. Основные формы анаэробной инфекции
- •3.1. Плевролегочная инфекция
- •3.2. Диабетическая инфекция стопы
- •3.3. Бактериемия и сепсис
- •3.4. Столбняк
- •3.5. Диарея
- •3.6. Хирургическая анаэробная инфекция ран и мягких тканей
- •3.7. Газообразующая инфекция мягких тканей
- •3.8. Клостридиальный мионекроз
- •3.9. Медленно развивающаяся некротическая раневая инфекция
- •3.10. Внутрибрюшинная инфекция
- •3.11. Характеристика экспериментальных анаэробных абсцессов
- •3.12. Псевдомембранозный колит
- •3.13. Акушсрско-гинеколошческие инфекции
- •3.14. Анаэробная инфекция у онкологических больных
- •4. Лабораторная диагностика
- •4.1. Исследуемый материал
- •4.2. Этапы исследования материала в лаборатории
- •4.3. Прямое исследование материала
- •4.4. Способы и системы для создания анаэробных условий
- •4.5. Питательные среды и культивирование
- •Т а б л и ц а 7. Среды рекомендуемые для первичного выделения анаэробных микроорганизмов
- •Т а б л и ц а 8. Селективные агенты для облигатных анаэробов
- •5. Антибактериальная терапия анаэробной инфекции
- •5.1. Характеристика основных антимикробных препаратов, используемых при лечении анаэробной инфекции
- •5.2. Комбинации бэта-лактамных препаратов и ингибиторов бэта-лактамазы
- •5.3. Клиническое значение определения чувствительности анаэробных микроорганизмов к антимикробным препаратам
- •6. Коррекция микрофлоры кишечника
- •7. Заключение
Т а б л и ц а 7. Среды рекомендуемые для первичного выделения анаэробных микроорганизмов
Среда
|
Назначение
|
Кровяной агар для бруцелл (CDC анаэробный кровяной агар, кровяной агар Шэдлера) (BRU agar)
|
Неселективная, для выделения анаэробов, присутствующих в материале
|
Желчно-эскулиновый агар для бактероидов (ВВЕ agar)
|
Селективная и дифференциальная; для выделения бактерий группы Bacteroides fragilis
|
Канамицин-ванкомицин кровяной агар (KVLB)
|
Селективная для большинства неспорообразующих грамотрицательных бактерий
|
Фенил-этиловый агар (PEA)
|
Ингибирует рост протея и других энтеробактерий; стимулирует рост грамположительных и грамотрицательных анаэробов
|
Тиогликолевый бульон (THIO)
|
Для специальных ситуаций
|
Желточный агар (EYA)
|
Для выделения клостридий
|
Циклосерин-цефокситин-фруктозный агар (CCFA) или циклосеринманнитовый агар (СМА) или циклосеринманнитовый кровяной агар (СМВА)
|
Селективная для С. difficile
|
Кристалл-виолет-эритромици-новый агар (СVЕВ)
|
Для выделения Fusobacterium nucleatum и Leptotrichia buccalis
|
Бактероид гингивалис агар (BGA)
|
Для выделения Porphyromonas gingivalis
|
Т а б л и ц а 8. Селективные агенты для облигатных анаэробов
Организмы
|
Селективные агенты
|
Облигатные анаэробы из клинического материала
|
неомицин (70мг/л) налидиксовая кислота (10 мг/л)
|
Actinomyces spp.
|
метронидазол (5 мг/л)
|
Bacteroides spp. Fusobacterium spp.
|
налидиксовая кислота ( 10 мг/ л) + ванкомицин (2.5 мг/л)
|
Bacteroides urealytica
|
налидиксовая кислота (10 мг/ л) тейкопланин (20 мг/ л)
|
Clostridium difficile
|
циклосерин (250 мг/ л) цефокситин (8 мг/ л)
|
Fusobacterium
|
рифампицин (50 мг/л) неомицин (100 мг/ л) ванкомицин (5мг/ л)
|
Учет результатов осуществляют путем описания культуральных свойств выросших микроорганизмов, пигментации колоний, флуоресценции, гемолиза. Затем из колоний готовят мазок, окрашивают по Граму и таким образом выявляют грамотрицательные и грамположительные бактерии, микроскопируют и описывают морфологические свойства. В дальнейшем микроорганизмы каждого типа колоний пересевают и культивируют в тиогликолсевом бульоне с добавлением гемина и витамина К. Морфология колоний, присутствие пигмента, гемолитические свойства и характеристика бактерий при окраске по Граму позволяют предварительно определить и дифференцировать анаэробы. В результате чего все анаэробные микроорганизмы можно разделить на 4 группы: 1) Гр+ кокки; 2) Гр+ бациллы или коккобациллы: 3) Гр- кокки; 4) Гр- бациллы или коккобациллы (20, 22, 32).
Таблица 9. Длительность инкубации и частота исследования
посевов анаэробных бактерий
Тип культур
|
Время инкубации*
|
Частота исследования
|
Кровь
|
4
|
Ежедневно до 7-го и после 14-го
|
Жидкости
|
7
|
Ежедневно
|
Абсцессы, раны
|
7
|
Ежедневно
|
Дыхательные пути Горло Мокрота Транстрахеальный аспират Отделяемое бронхов
|
2 1 7 7
|
Ежедневно Однократно Ежедневно Ежедневно
|
Урогенитальный тракт Влагалище, матка Простата Уретра Моча
|
2 2 2 1
|
Ежедневно Ежедневно Ежедневно Однократно
|
Фекалии
|
1
|
Ежедневно
|
Анаэробы Бруцеллы Актиномицеты
|
7 30 21
|
Ежедневно 3 раза в неделю 1 раз в неделю
|
*до получения отрицательного результата
На третьем этапе исследований проводят более длительную идентификацию. Конечная идентификация основывается на определении биохимических свойств, физиологических и генетических характеристик, факторов патогенности в тесте нейтрализации токсинов. Хотя полнота идентификации анаэробов может существенно варьировать, некоторые простые тесты с высокой вероятностью позволяют идентифицировать чистые культуры анаэробных бактерий - окраска по Граму, подвижность, определение чувствительности к некоторым антибиотикам методом бумажных дисков и биохимические свойства.