(Унифицированный метод определения реакции мочи с индикатором бромтимоловым синим . ???) Алгоритм действий:

Вариант 1: Качественное определение белка в моче сульфосалициловым методом.

Определяют рН (моча должна быть кислой реакции); мочу с щелочной реакцией подкисляют 2-3 каплями 10 % СН_ЗСООН на 10 мл мочи;

Определяют прозрачность мочи визуально на черном фоне (моча должна быть прозрачной); при необходимости избавляемся от мути: 10 мл исследуемой мочи наливают в центрифужную пробирку и центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин;

Приступаем к определению белка:

Содержимое пробирки делят на две порции по 5 мл;

Первая пробирка служит контролем (реактив в нее не добавляют), во вторую пробирку капают 1-2 капли 20% сульфосалициловой кислоты;

Сравнивают 1 и 2 пробирку на темном фоне;

Ход реакции представлен в таблице

Пробирки	Моча	20% р-р сульфосалициловой кислоты	Результат
1 опыт	2-3 мл	1-2 капли	При наличии белка моча мутнеет
2 контроль	2-3 мл	-	Прозрачная

Оценивают результат:

если жидкость помутнела, значит, в моче есть белок;

если жидкость осталась прозрачной, то белок отсутствует.

Полученные результаты записывают в бланк.

Вариант 2: Качественное определение белка в моче диагностической полоской.

• 10 мл мочи наливают в пробирку;

• в пробирку опускают диагностическую полоску (время контакта с мочой указано в инструкции);

• полоску достают, излишки мочи удаляют, проводя полоской по краю пробирки;

• через указанное в инструкции время оценивают изменение цвета на диагностической зоне, определяющей белок в моче, сравнивая его со шкалой на футляре.

№ 5.

Ситуационная задача.

В лабораторию на исследование доставлена мокрота гнойного характера, обильная (1л), резко неприятного запаха, при стоянии четко определяется двухслойность. Микроскопически обнаружен клеточный детрит, эластические волокна.

Задания:

1. Оценить результат с позиции «норма» - «патология» и аргументировать свою оценку.

2. Перечислить правила приготовления препаратов мокроты для микроскопического исследования.

3. Назвать правила санэпидрежима при работе с мокротой.

4. Провести исследование кала на скрытую кровь.

№ 5.

1. Если при исследовании мокроты: обильной, гнойного характера, с резким неприятным запахом, а при микроскопии будут обнаружены эластические волокна на фоне клеточного детрита, можно предположить, что у больного распад клеточной ткани.

2. При приготовлении препаратов необходим тщательный отбор материала. Из мокроты выбирают поочередно все подозрительные «зернышки», кровяные прожилки, комочки и приготавливают из них препараты. Отобранные части мокроты, не размазывая, накрывают покровным стеклом и слегка надавливают ручкой препаровальной иглы. Для исследования материал нужно брать в таком количестве, чтобы препарат был не слишком толстым, и при надавливании на покровное стекло содержимое не выступало за его края. Если это случится, то рядом с первым покровным стеклом кладут второе, сдвинув первое немного в сторону. Приготовленный препарат исследуют под микроскопом, вначале под малым, а затем под большим увеличением. Полноценность исследования зависит от правильного приготовления и количества просмотренных препаратов. Количество препаратов зависит от разнообразия комочков и включений в исследуемой мокроте. Число препаратов - неограниченное количество (обычно не менее 4-5).

3. Алгоритм № 5.

Работать необходимо в средствах индивидуальной защиты в вытяжном шкафу. Весь металлический инструментарий дезинфицируется обжиганием. Все инструменты и мокрота обеззараживаются хлорсодержащими препаратами в течении часа

Алгоритм № 5. Исследование кала на скрытую кровь.

Бензидиновая проба (метод Грегерсена): Кровь в кале обнаруживают методами, основанными на псевдопероксидазном действии гемоглобина. Гемоглобин отнимает водород от некоторых органических соединений (бензидина, амидопирина, гваяковой смолы, ортотолуидина и др.) и передает его перекиси водорода, при этом образуются красящие соединения.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланк анализа кала, пробирки, стеклянные палочки, исследуемый материал

Реактивы: бензидин основной, 50% уксусная кислота, 3% перекись водорода.

Приготовление рабочего раствора: в 5 мл СН₃СООН всыпают небольшое количество (на кончике скальпеля) бензидина и растворяют (реактив Грегерсена).

Алгоритм действий:

1 На предметное стекло наносят большую каплю каловой эмульсии.

2. Добавляют 2-3 капли реактива Грегерсена.

3. Несколько капель 3% перекиси водорода.

4. Смешивают.

5. Положительная проба: появляется зеленого или сине-зеленого окрашивание сразу или в течение 2-х минут

6. Отрицательная проба: окрашивание не появилось или появилось позже двух минут

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

№ 6.

Ситуационная задача.

В лабораторию доставлено скудное количество слизистой мокроты, в которой обнаружены: плоский эпителий, эозинофилы, спираль Куршмана, кристаллы Шарко-Лейдена.

Задания:

1. Оценить результат с позиции «норма» - «патология» и аргументировать свою оценку.

2. Перечислить правила приготовления препаратов для микроскопического исследования мокроты и их количество.

3. Назвать правила обработки кала.

4. Подготовить препараты кала для микроскопического исследования.

№ 6.

1. У больного, судя по характеру мокроты: скудное количество, слизистая, а также по микроскопической картине: эозинофилы, спираль Куршмана (представляют собой беловато-прозрачные штопорообразно извитые трубчатые образования, сформировавшиеся из муцина в бронхиолах. Тяжи слизи состоят из центральной плотной осевой нити и спиралеобразно окутывающей её мантии, в которую бывают вкраплены лейкоциты, кристаллы Шарко-Лейдена (выглядят как гладкие бесцветные кристаллы в форме октаэдров. Кристаллы Шарко-Лейдена состоят из белка, освобождающего при распаде эозинофилов, поэтому они встречаются в мокроте, содержащей много эозинофилов (аллергические процессы, бронхиальная астма)). - можно предположить бронхиальную астму.

2. Полноценность исследования мокроты зависит от правильного приготовления и количества просмотренных препаратов. Количество препаратов зависит от разнообразия комочков и включений в исследуемой мокроте. Число препаратов: неограниченное количество. При приготовлении препаратов необходим тщательный отбор материала. Из мокроты выбирают поочередно все подозреваемые «зернышки», кровяные прожилки, комочки и приготавливают из них препараты, помещая на предметное стекло. Полноценность исследования зависит от правильного приготовления и качества просмотренных препаратов. Количество препаратов зависит от разнообразия комочков и включений в исследуемой мокроте. Число препаратов - неограниченное количество (обычно не менее

4-5).

3. Алгоритм № 6.

4. Кал собирают в закрытую маркированную емкость с делениями, до отметки - 1 литр, доливают воду и засыпают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, нейтральным гипохлоритом Са из расчета 1:5 на 1 час.

Кал, в котором обнаружены яйца гельминтов, обеззараживают 20% хлорной известью в течение 2-х часов. Лабораторную посуду (склянки, колбы, предметные стекла, стеклянные палочки, т.д.) обеззараживают 10% р-ром хлорной извести в течение 2-х часов, 20% р-ром хлорной извести 60 мин. или кипят в 2% р-ре моющих средств в течение 15 минут с момента закипания.

Алгоритм № 6. Приготовление препаратов кала для микроскопического исследования.

А) Нативный препарат

В этом препарате дифференцируют остатки не переваренной белковой пищи - соединительную ткань, мышечные волокна с исчерченностью и без исчерченности, остатки не переваренной углеводной пищи (переваренную клетчатку), остатки нерасщепленного и расщепленного жира - капли, иглы, глыбки, слизь и заключенные в ней лейкоциты, эритроциты, цилиндрический эпителий, яйца гельминтов, цисты простейших и вегетативные особи.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланк анализа кала, пробирки, предметные стекла, покровные стекла, стеклянные палочки, исследуемый материал

Реактивы: физиологический раствор

Алгоритм действий:

1. Приготовить густую каловую эмульсию (смешать в пробирке 2 капли физ.раствора и небольшой комочек кала)

2. Нанести стеклянной палочкой на предметное стекло 1 каплю каловой эмульсии

3. Накрыть покровным стеклом

4. Микроскопировать

Б) Препарат с Люголем

Этот препарат предназначен для выявления крахмальных зёрен и йодофильной флоры.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланк анализа кала, пробирки, предметные стекла, покровные стекла, стеклянные палочки, исследуемый материал

Реактивы: раствор Люголя

Алгоритм действий:

1. Нанести стеклянной палочкой на предметное стекло 1 каплю каловой эмульсии

2. Добавить 1 каплю раствора Люголя и перемешать с каловой эмульсией

3. Накрыть покровным стеклом

4. Микроскопировать: не переваренный крахмал окрашивается в черный или темно-синий цвет, переваренный крахмал окрашивается в фиолетовый, синий или голубой цвет, йодофильная флора окрашивается в черный или коричневый цвет.

В) Препарат с метиленовым синим

Этот препарат предназначен для дифференцировки капель нейтрального жира от капель жирных кислот.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланк анализа кала, пробирки, предметные стекла, покровные стекла, стеклянные палочки, исследуемый материал

Реактивы: раствор метиленового синего

Алгоритм действий:

1. Нанести стеклянной палочкой на предметное стекло 1 каплю каловой эмульсии

2. Добавить 1 каплю раствора метиленового синего и перемешать с каловой эмульсией

3. Накрыть покровным стеклом

4. Микроскопировать: капли жирных кислот окрашиваются метиленовой синью в интенсивно синий цвет, а капли нейтрального жира остаются бесцветными (судан-3-оранжевый цвет капель жира)

Г) Препарат с 50% раствором глицерина.

Препарат предназначен для выявления яиц гельминтов.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланк анализа кала, пробирки, предметные стекла, покровные стекла, стеклянные палочки, исследуемый материал

Реактивы: 50% раствор глицерина

Алгоритм действий:

1. Нанести стеклянной палочкой на предметное стекло 1 каплю каловой эмульсии

2. Добавить 1 каплю раствора 50% раствора глицерина и перемешать с каловой эмульсией

3. Накрыть покровным стеклом

4. Микроскопировать: глицерин просветляет детрит и предохраняет препарат от высыхания, что способствует лучшему выявлению яиц гельминтов.

========================================================================

№ 7.

Ситуационная задача.

При добавлении к желудочному соку диметиламидоазобензола получили желто-розовое (цвет «семги») окрашивание.

Задания:

1. Оценить результат с позиции «норма» - «патология» и аргументировать свою оценку.

2. Назвать методы титрования желудочного сока, используемые индикаторы.

3. Перечислить правила санэпидрежима при работе с мочей.

4. Подготовить нативный препарат мокроты для микроскопического исследования.

№ 7.

Общая кислотность — сумма всех содержащихся в желудочном соке кислых продуктов: свободной и связанной соляной кислоты, органических кислот, кислых фосфатов и сульфатов.

 Связанная соляная кислота — недиссоциированная соляная кислота белково-солянокислых комплексов в желудочном соке; при гастрите, кровоточащей язве, распаде опухоли количество белков в желудке увеличивается, при этом может нарастать и содержание связанной соляной кислоты.

 Свободная соляная кислота — диссоциированная на ионы Н+ и Cl^-.

 Дебит соляной кислоты — абсолютное количество соляной кислоты, выделившееся за определённое время.

 Кислотный остаток — все кислые компоненты желудочного сока, кроме соляной кислоты, то есть кислые соли и органические кислоты.

Индикатор ализаринсульфоновокислый натр, имеющий вишневую окраску, в кислой среде приобретает желтый цвет, а в зоне рН 4,3–6,3 — фиолетовый. В присутствии этого индикатора оттитровываются свободная соляная кислота и кислотный остаток желудочного содержимого. Под свободной кислотностью, концентрацией ионов водорода [Н+], следует понимать концентрацию свободной, полностью диссоциированной соляной кислоты.

Под связанной кислотностью следует понимать концентрацию ионов водорода, связанных карбоксильными группами белков и пептидов. В состав кислотного остатка входят органические кислоты (масляная, молочная, уксусная) и кислореагирующие фосфаты. Наиболее распространенный способ измерения кислотности желудочного сока — титрование его сильной щелочью (0,1 н раствор NaOH) в присутствии индикаторов, меняющих окраску в зависимости от рН среды.

Для определения общей кислотности желудочного сока применяется индикатор фенолфталеин, который в кислой среде остается бесцветным, а в щелочной, при рН 8,2–10,0, приобретает розовый цвет. Индикатор диметиламиноазобензол оранжевого цвета в присутствии свободной соляной кислоты при рН 2,4–4,0 становится красным, а при отсутствии ее — оранжевым или желтым. Индикатор ализаринсульфоновокислый натр, имеющий вишневую окраску, в кислой среде приобретает желтый цвет, а в зоне рН 4,3–6,3 — фиолетовый. В присутствии этого индикатора оттитровываются свободная соляная кислота и кислотный остаток желудочного содержимого.

Если индикатор диметиламиноазобензол при добавлении к желудочному соку изменяет свой цвет на красный, для титрования применяют метод Михаэлиса. Если диметиламиноазобензол меняет свою окраску на желтую, желудочный сок необходимо титровать по методу Тепфера. Метод Михаэлиса. Реактивы: 1%-й спиртовой раствор фенолфталеина, 0,5%-й спиртовый раствор диметиламиноазобензола, 0,1 н раствор едкого натра. Титруют 0,1 н. раствором едкого натра при постоянном помешивании. Предварительно отмечают уровень 0,1 н раствора едкого натра в бюретке (I уровень). Определяют следующие величины: количество щелочи, израсходованное на титрование желудочного сока от первоначального красного цвета до оранжевого (II уровень); количество щелочи, израсходованное на титрование от оранжевого до лимонно-желтого (III уровень); количество щелочи, затраченное на титрование от красного до стойкого розового цвета (IV уровень). Расчет. Количество щелочи, пошедшей на титрование до первого изменения окраски (разница между II и I уровнем), определяет концентрацию свободной HCl в желудочном соке. Количество щелочи, пошедшей на все титрование, от красной окраски диметиламиноазобензола в резко кислой среде до красной окраски фенолфталеина в щелочной среде, т. е. разница между IV и I уровнем, соответствует общей кислотности. Количество щелочи, пошедшей на титрование до уровня, означающего среднее арифметическое между III и IV уровнем, соответствует концентрации всей HCl (т. е. сумме свободной и связанной), а концентрацию связанной HCl находят по разности между всей HCl и свободной HCl. Разность между общей кислотностью и всей HCl называют кислотным остатком. Таким образом, все кислореагирующие вещества определяют в одной порции. Унифицированное определение кислотности методом Тепфера. Реактивы: 1%-й спиртовый раствор фенолфталеина. Интервал перехода окраски при рН 8,2–10,0. 0,5% спиртовый раствор диметиламиноазобензола. Интервал перехода окраски при рН 2,9–4,0. 1%-й водный раствор ализаринсульфоновокислого натра. Интервал перехода окраски при рН 4,3–6,3. 0,1 н раствор едкого натра.

Ход исследования. В 2 стакана отмеривают по 5 мл профильтрованного желудочного сока. В первую порцию вносят по 2 капли диметиламиноазобензола и фенолфталеина и определяют концентрацию свободной HCl и общую кислотность. Во вторую порцию желудочного сока прибавляют каплю ализаринсульфоновокислого натра и титруют до перехода желтой окраски в слабо-фиолетовую. В зоне перехода этого индикатора нейтрализуются кислореагирующие вещества, кроме связанной HCl, которую находят по разности между объемом щелочи, пошедшей на нейтрализацию всех кислых валентностей желудочного сока (титрование с фенолфталеином), и объемом, пошедшим на титрование с ализаринсульфоновокислым натром. Все полученные величины умножают на 20 для перерасчета на 100 мл желудочного сока.

В тех случаях, когда объем полученного желудочного сока небольшой, применяют микрохимический способ определения кислотности. Оборудование. Микробюретка. Реактивы те же, что и для метода Михаэлиса.

Ход исследования. В стакан для титрования помещают 1 мл профильтрованного сока и 5 мл дистиллированной воды. Титруя из микробюретки, определяют концентрацию свободной HCl и общую кислотность по методу Михаэлиса.

Расчет. Содержание свободной HCl равно количеству щелочи, пошедшей на титрование до желто-оранжевой окраски (цвет семги) диметиламиноазобензола, умноженному на 100. Общей кислотности соответствует количество щелочи, пошедшей на все титрование, уменьшенное на 0,05 (индикаторная поправка) и умноженное на 100. При низкой кислотности индикаторная поправка должна быть равна 0,03.

Способы выражения кислотности. Традиционным способом выражения кислотности желудочного сока являются титрационные единицы (ТЕ) — объем 0,1 н едкого натра, необходимый для нейтрализации кислых валентностей в 100 мл желудочного сока. Последние годы концентрацию HCl в желудочном соке более принято выражать в миллимолях на 1 л желудочного сока.

1. Такой цвет появляется при отсутствии НС1 или дефиците соляной кислоты. В состав желудочного сока входит соляная кислота. Виды кислотности: Свободная соляная кислота 36 ммоль/л, связанная соляная кислота 13 ммоль/л, кислотный остаток 4 ммоль/л, также входит пепсин, слизь, муцин, биологические вещества, щелочный компонен(белково-бикарбонатная система), .

2. Метод Михаэлиса, метод Тепфера

1 % р-р спиртовой фенолфталеина, для определения общей кислотности. 0,5 % спиртовой р-р деметиламидоабензола, для определения концентрации свободной соляной кислоты.

К 5 мл профильтрованного желудочного сока добавляют 1 каплю диметиламидоазобензола (в присутствии соляной кислоты цвет желтый) и титруют до получения цвета «семги» 0,1 N НС1.

3. Алгоритм № 7.

4. Остатки мочи и использованные пробы сливают в промаркированную емкость с делениями и засыпают сухой хлорной известью, нейтральным гипохлоритом кальция из расчета 1:5 на 1 час. После дезинфекции мочу сливают в канализацию.

Дезинфекцию посуды осуществляют погружением в 3% раствор хлорамина, осветленной хлорной извести в течении 30 минут или 1% раствора хлорамина и хлорной извести в течение 60 минут. Лабораторную посуду кипятят в р-ре моющих средств в течение 15 минут, промывают, ополаскивают, высушивают.

Алгоритм № 7. Приготовление препарата мокроты для микроскопического исследования.

1. Мокроту, помещенную в чашку Петри, рассматривают на черном и белом фоне.

2. Узким шпателем и иглой (можно пользоваться деревян­ными лучинами) выбирают различные составные части мокроты (комочки гноя, слизи, крови, тканевые клочки).

3. Отоб­ранный материал помещают на предметное стекло. При этом более плотные по консистенции частицы помещают ближе к центру намечаемого препарата, а менее плотные, так же как и слизисто-гнойные, гнойно-слизистые, кровя­нисто окрашенные образования, — по периферии.

4. Мате­риал накрывают покровным стеклом. Количество материа­ла, взятого для одного препарата, должно быть таково, чтобы мокрота не выходила за пределы покровного стекла.

5. Если мокрота имеет вяз­кую или тягучую консистенцию, то на покровное стекло слегка надав­ливают, чтобы материал распределился равномерно тонким слоем.

Препараты сначала просматривают под малым увеличением (объ­ектив 8, окуляр 7), затем под большим (объектив 40, окуляр 7) увели­чением микроскопа

------------------------------------------------------------------------------------------

№ 8.

Ситуационная задача.

При титровании желоудочного сока по Михаэлису получены следующие результаты базальной секреции:

Общая кислотность – 80 ммоль/л

Свободная кислотность – 60 ммоль/лсвязная кислотность – 15 ммоль/л

Кислотный остаток – 5 ммоль/л

Задания:

1. Оценить результат с позиции «норма» - «патология» и аргументировать свою оценку.

2. Перечислить раздражители желудочной секреции и индикаторы, используемые для определения общей и свободной кислотности.

3. Назвать правила дезинфекции кювет ФЭКа.

4. Провести пробу Зимницкого

№ 8.

1. В норме общая кислотность – 40-60 ммоль/л, свободная кислотность -20-40 ммоль/л, связанная кислотность - 10-15 ммоль/л. Не соответствует в норме общая кислотность и свободная кислотность желудочного сока, что наблюдается при гиперацидном гастрите, язве 12-ти перстной кишки и язве желудка.

2. Для определения общей кислотности пользуется фенолфталеин. В кислой и нейтральной среде он бесцветен, в щелочной приобретает малиновый цвет. Фенолфталеин меняет цвет в конце титрования, когда происходит нейтрализация всех кислых валентностей желудочного сока, это IV уровень титрования.

Для определения свободной кислотности используется индикатор диметиламидоазобензол. В присутствии свободной НС1 индикатор приобретает красный цвет, при ее нейтрализации - цвет «семги», это II уровень титрования.

Базальная секреция - это секреция желудка натощак. Для этого вводится зонд, извлекают все содержимое желудка, затем в течение часа каждые 15 минут извлекают все содержимое желудка в отдельные банки (всего 4 порции).

Существуют энтеральные и парентеральные раздражители желудочной секреции.

Энтеральные - капустный отвар, мясной бульон, кофеиновый и алкогольный завтраки. Эти раздражители вводятся через зонд. Парентеральные - гистамин, пентагастрин. Эти в-ва вводятся подкожно и являются более сильными раздражителями желудочной секреции.

3. Алгоритм № 8.

4. Кюветы от ФЭКа дезинфицируют 6% раствором перекиси водорода в течение часа.

Алгоритм № 8. Проба по Нечипоренко

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланки анализа мочи, пипетки, камеры Горяева, стеклянные палочки, исследуемый материал, центрифуга

Реактивы: спирт 70%

Алгоритм действий:

• Исследуемый материал тщательно перемешать;

• 10 мл перенести в центрифужную пробирку;

• Центрифугировать 10 мин при 1500 об/мин;

• Во время центрифугирования подготовить камеру Горяева:

• Протереть рабочие поверхности спиртом камеры и покровного стекла, высушить;

• Притереть покровное стекло к камере до появления радужных колец с обеих сторон;

• Отобрать 9 мл надосадочной жидкости, оставив 1 мл с осадком;

• Осадок тщательно перемешать стеклянной палочкой;

• Заполняют камеру, поднося стеклянную палочку с каплей жидкости на ней к краю покровного стекла;

• Подсчет в камере начинают через 1-2 минуты после ее заполнения;

• При малом увеличении микроскопа (х8, х10) находят верхний левый угол сетки Горяева;

• Затем объектив микроскопа переводят на увеличение 40 и подсчитывают форменные элементы (эритроциты, лейкоциты) и цилиндры в 100 больших нерасчерченных квадратах;

• Проводят математический расчет: N = Х х 250, где Х – число подсчитанных клеток в 100 больших нерасчерченных квадратах (отдельно по лейкоцитам, эритроцитам и цилиндрам); N – число клеток в 1 мл мочи.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------

№ 9.

Ситуационная задача.

В лабораторию доставили кал цвета белой глины.

Задания:

1. Оценить результат с позиции «норма» - «патология». Изменится ли цвет мочи при данной патологии?

2. Указать исследование, которое необходимо провести в данном случае.

3. Назвать правила утилизации отработанного материала при исследовании кожи, волос, ногтей.

4. Подготовить мочу для исследования осадка по Нечипоренко.

№ 9.

1. Цвет кала указывает на отсутствие стеркобилина. Можно предположить холистаз, в следствии закупорки желчевыводящих путей (паренхиматозные гепатиты, механические желтухи). Моча приобретает зеленовато-желтый цвет («пива»), реакция на билирубин будет резко положительной, уробилиновые тела будут отсутствовать. Увеличение прямого билирубина в крови, он выводится с мочой, придавая ей специфическую окраску цвет «пива».

2. Необходимо провести реакцию на наличие в кале стеркобилина, который придает калу коричневый цвет. Исследование имеет цель установить в кале наличие или отсутствие стеркобилина или неизменного билирубина. Для количественного определения стеркобилина в кале пользуются пробой с сулемой.

Кусочек кала величиной с лесной орех растирают в фарфоровой ступке с 3-4 мл 7,5% р-ра сулемы. Оставляют на сутки при комнатной температуре. При наличии стеркобилина эмульсия приобретает розовое или красное окрашивание; при его отсутствии цвет не изменяется. Если в кале присутствует неизмененный билирубин, то он под влиянием сулемы превращается в биливердин и придает эмульсии зеленую окраску.

Билируби́н— желчный пигмент, один из главных компонентов желчи. Образуется в норме как результат расщепления белков, содержащих гем: гемоглобина, миоглобина и цитохрома. В крови билирубин содержится в небольших количествах в виде двух фракций: свободной и связанной. Распад гемоглобина происходит в мононуклеарных фагоцитах (в селезенке и печени). Образуется пигмент зеленого цвета — вердоглобин, в составе которого сохраняются и железо, и белок. В дальнейшем вердоглобин распадается на составные части: белок, железо и пигмент-биливердин.

Билирубин образуется под действием фермента биливердинредуктазы из биливердина, зеленого пигмента, который также является продуктом распада гема. Будучи оксидирован, билирубин может превращаться обратно в биливердин. Около 96 % билирубина в крови человека представлено неполярным нерастворимым непрямым билирубином, образующим комплексы с альбумином. Оставшиеся 4 % билирубина связываются с различными полярными молекулами, в основном — с глюкуроновой кислотой. При этом образуется прямой билирубин, который растворим в воде, фильтруется почками и выделяется с мочой. Несвязанный (непрямой) билирубин является желчным пигментом, образуемым в момент распада гемоглобина и разрушения эритроцитов. В отличие от связанного (прямого) билирубина этот пигмент не растворяется в воде и достаточно токсичен за счет возможности легко проникать в клетки. Связываясь с альбуминами крови, непрямой билирубин транспортируется в печень.

Прямой (связанный) билирубин  — это малотоксичная и растворимая в воде фракция общего билирубина крови, который образуется в печени. Синтезируясь в печени, большая часть этой фракции билирубина крови поступает далее в тонкую кишку. Под действием фермента глюкуронилтрансферазы в печени билирубин соединяется с глюкуроновой кислотой (образует глюкуронид билирубина), благодаря чему становится водорастворимым. После этого билирубин экскретируется в составе жёлчи и поступает в тонкую кишку. От него отщепляется глюкуроновая кислота, и далее он восстанавливается до уробилиногена. В тонкой кишке часть уробилиногена вместе с другими жёлчными компонентами повторно всасывается и по воротной вене поступает в печень (см. Кишечно-печёночная циркуляция жёлчных кислот). Остальной уробилиноген из тонкой кишки поступает в толстую кишку, где восстанавливается кишечной микрофлорой до стеркобилиногена. В нижних отделах толстой кишки стеркобилиноген окисляется до стеркобилина и выводится с калом.^[8] Стеркобилин придаёт калу характерную коричневую окраску.^[9] Небольшое количество (около 5 %) стеркобилиногена всасывается в кровь и после выводится с мочой.

Биливерди́н — зелёный пигмент желчи.Биливердин является промежуточным продуктом распада гемоглобина, который происходит в клетках системы макрофагов печени, костного мозга и селезёнки. При его распаде также высвобождается белок глобин и железо. Под действием ферментов биливердин восстанавливается до билирубина.Биливердин также образуется в кишечнике в результате ферментативного окисления билирубина.

Стеркобилиноген (фекальный уробилиноген) это вещество, создаваемое бактериями в кишечнике.

Билирубин крепко связывается с белками плазмы (в основном альбумином) в кровотоке и далее транспортируется в печень, где он соединяется с одной или двумя молекулами глукуроновой кислоты, потом секретируется вместе с желчью в тонкую кишку. Там преобразуется обратно в билирубин при помощи бактериальных ферментов в подвздошной кишке. Билирубин далее превращается в бесцветный уробилиноген. Весь уробилиноген оставшийся в толстой кишке становится стеркобилиногеном и наконец окисляется до стеркобилина, придающего человеческим фекалиям коричневый цвет. При обструктивной желтухе, билирубин не достигает тонкой кишки, а значит стеркобилиноген не формируется. В результате не получается и стеркобилина. Недостаток стеркобилина и других желчных пигментов приводит к тому, что кал становится глинистого цвета

И еще раз:Билирубин выводится с желчью в двенадцатиперстную кишку, а затем разлагается микроорганизмами толстой кишки до уробилиногена, который реабсорбируется в кровоток, где превращается в уробилин и в конце концов выводится почками. При желтухе выведение билирубина с желчью уменьшается, так что основная его часть остаётся в крови, а далее выводится с мочой, что делает её тёмного цвета, но с необычно низким содержанием уробилина и полным отсутствием уробилиногена. Эти симптомы обычно сопровождаются слабо окрашенными фекалиями.

К клеткам РЭС относятся: ретикулярные и эндотелиальные клетки лимфатических узлов, селезенки, печени, костного мозга; клетки наружной оболочки (адвентиции) кровеносных и крупных лимфатических сосудов; купферовские клетки печени; гистиоциты рыхлой соединительной ткани — макрофаги.

3. Алгоритм № 9.

4. После исследования материал из кожи, ногтей и волос, а также бумага, в которую был упакован материал, сжигают.

Алгоритм № 9. Проба Зимницкого.

Оснащение: дезраствор, одноразовые перчатки, бланки пробы по Зимницкому, цилиндры, урометры, исследуемый материал

Алгоритм действий:

• Полученные от пациента емкости расположить по порядку;

• Измерить объем каждой порции с помощью мерного цилиндра:

• мочу наливают в мерный цилиндр и по нижнему мениску, исходя из цены деления, считываем показания объема

• Рассчитать дневной, ночной и суточный диурез;

• Измерить относительную плотность каждой порции с помощью урометра:

• наливают в мерный цилиндр 50 мл мочи, не допуская образования пены, и в нее опускают урометр, следя, чтобы он не опустился на дно и не прилипал к стенкам; снимают показания со шкалы урометра по нижнему мениску.

• Результаты занести в бланк анализа

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

№ 10.

Ситуационная задача.

В лабораторию доставлена моча грудного младенца на общий анализ в количестве 30 мл. Молодая неопытная лаборантка провела все исследования за исключением относительной плотности.