- •Методические указания для самостоятельной внеаудиторной работы
- •Специальность: 31.02.03 «Лабораторная диагностика»
- •2) Построить контрольную карту; 3) нанести на контрольную карту значения, полученные при обработке контрольного материала в 14-ти аналитических сериях:
- •«Проведение биохимических исследований в кдл» Методическое пособие для самоподготовки студентов. / Башарина о.Б. - сПб гбпоу «мк № 3». – 2015 г.
- •Часть 1. Материал для биохимических исследований
- •Спинномозговая жидкость (смж) (цереброспинальная жидкость, ликвор).
- •Часть 2. Факторы, влияющие на надежность (правильность и точность) результатов лабораторного исследования
- •Часть 3. Методы количественного анализа.
- •Абсорбционный фотометрический анализ
- •Фотометрические методы биохимического анализа
- •Часть 4. Внутрилабораторный контроль качества. Построение контрольной карты.
Спинномозговая жидкость (смж) (цереброспинальная жидкость, ликвор).
Внутренний резервуар цереброспинальной жидкости состоит из желудочков головного мозга и центрального спинномозгового канала. Физиологическая роль ликвора: защитная, регуляторная, транспортная, респираторная. В среднем колебания общего количества ликвора составляют 100-150 мл. В норме СМЖ бесцветная, прозрачная, без запаха, стерильная.
Правила взятия биологического материала. Для получения СМЖ проводят люмбальную пункцию. Без вреда для больного можно извлечь 8-10 мл ликвора. Первые 2-3 капли СМЖ отбрасывают, собирают 3 порции ликвора асептически в стерильные пробирки, плотно их закрывают и оформляют соответствующее направление в КДЛ.
Правила хранения и транспортировки. СМЖ должна быть доставлена в лабораторию и исследована немедленно после ее взятия. Для пересылки материала используют изотермальные контейнеры с температурой около 37оС. При продолжительном хранении ликвора при комнатной температуре происходит разрушение форменных элементов. При охлаждении менингококки и другие возбудители инфекционных заболеваний могут погибнуть. В лаборатории тотчас производят бактериоскопические, биохимические и серологические исследования.
Подготовительная работа. В норме ликвор бесцветный и прозрачный. Сероватый, серо-зеленый, зеленоватый цвет СМЖ обусловлен большим содержанием в ней лейкоцитов. Красный цвет (эритрохромия) обусловлен примесью крови. Желтый цвет (ксантохромия) может быть связан с присутствием продуктов превращения гемоглобина (билирубин, биливердин). Мутность ликвора обусловлена присутствием в нем эритроцитов, лейкоцитов и микроорганизмов. В зависимости от степени помутнения различают слабую, умеренную и большую мутность:
а) СМЖ – прозрачная или слегка мутная – определяют белок, глюкозу, хлориды, рН, проводят электрофоретическое исследование, реакцию Фридмана для ранней диагностики менингита; параллельно определяют белок и глюкозу в крови; направляют на микробиологическое исследование.
б) СМЖ – ксантохромная (желтый цвет). Проводят определение белка, глюкозы, билирубина. Нужно помнить, что иногда ксантохромия может быть результатом примеси эритроцитов при производстве пункции. Для решения этого вопроса жидкость центрифугируют; если ксантохромия обусловлена примесью эритроцитов, после центрифугирования жидкость становится бесцветной, а эритроциты выпадают в осадок.
в) СМЖ – эритрохромная (примесь крови) в 3-х последовательно взятых пробах может быть следствием кровоизлияниях в головной мозг, инсульта, травмы мозга. Ликвор с большой примесью крови для биохимического исследования непригоден.
г) СМЖ – очень мутная – биохимические исследования не проводятся. Отправляется на микробиологическое исследование.
Часть 2. Факторы, влияющие на надежность (правильность и точность) результатов лабораторного исследования
Ошибки преаналитического этапа работы с венозной кровью могут составлять от 46 до 68% всех лабораторных погрешностей, а 12,5% из них приводят к ошибочному медицинскому заключению. Надежность результатов лабораторного исследования зависит от ряда факторов:
Забор адекватной пробы крови: - в период, когда предшествующие процедуры не будут влиять на получаемые результаты; - из соответствующей вены; - в условиях, исключающих венозный застой; - с предосторожностями для предотвращения гемолиза.
Внесение пробы в адекватный контейнер. В настоящее время используются одноразовые безопасные закрытые системы для взятия крови, которые состоят из стерильной одноразовой вакуумной пробирки с различными наполнителями, с крышкой, защищенной пластиковым колпачком с цветовым кодом, соответствующим типу содержащегося реагента (антикоагулянта) по международной цветовой кодировке ISO 6710.
Точная маркировка пробы (Ф.И.О., дата рождения, история болезни, отделение, палата). Тщательное составление направления на анализы с изложением необходимых клинических сведений и данных об использовании лекарственных средств.
Своевременная доставка проб в лабораторию и своевременное отделение плазмы/сыворотки от эритроцитов/сгустка (до начала хранения).
Тщательный и аккуратный сбор материала (например, суточной мочи).
Мытье посуды: а) замочить на ночь в растворе трилон-Б + 3% раствор хлорамина, мыть в перчатках, сушить при t=160оС; б) для исследования свертывающей системы крови ТГ кипятят с 1% трифосфатом натрия.
Факторы, приводящие к получению ложных результатов биохимических исследований
№ п/п |
Причина ошибки |
Возможные последствия |
1. |
Длительный венозный застой (стаз) при венопункции. |
Увеличение общего кальция, общего белка и белковых фракций, липидов, тироксина (Т4). |
2. |
Гемолиз крови (в условиях венозного застоя, сильного встряхивания, при длительном хранении крови и др.) |
Выход в плазму крови различных веществ из эритроцитов. Увеличение натрия, калия, общего белка, неорганического фосфата, активности кислой и щелочной фосфатазы, АЛТ (аланинаминотрансферазы), ЛДГ (лактатдегидрогеназы ) и др. |
3. |
Хранение цельной крови в течение ночи до отправки в лабораторию. |
Увеличение в плазме калия, неорганического фосфора, активности кислой фосфатазы, ЛДГ, АЛТ. |
4. |
Внесение крови в неправильный сосуд или переливание из него в пробирку. |
Уменьшение кальция и увеличение натрия и калия. Уменьшение концентрации антикоагулянта - ЭДТА или оксалата. |
5. |
В кровь для определения глюкозы не добавлен фторид натрия. |
Низкое содержание глюкозы (фторид ингибирует гликолиз – процесс окисления глюкозы). |
6. |
Использован неправильный антикоагулянт. |
Например, оксалаты снижают активность ЛДГ, щелочной фосфатазы, α–амилазы. |
7. |
Пальпация простаты при ректальном обследовании, катеризация, клизма. |
Увеличение активности кислой фосфатазы. |
8. |
Неточный сбор мочи за определенное время. |
Ошибочные и ложные результаты о почечном клиренсе (показатель скорости клубочковой фильтрации), неверные показатели в суточной моче. |
9. |
Потери фекалий при сборе материала для анализа. |
Ложные данные о показателях фекалий. |
10. |
Влияние лекарственных препаратов. |
Например, ацетилсалициловая кислота, этанол, антигистаминные препараты приводят к снижению концентрации глюкозы в крови; сульфаниламиды – к увеличению активности ЛДГ. |
*Нельзя использовать сыворотку для исследования компонентов, уровень которых быстро уравнивается между форменными элементами и жидкой частью крови или подвергаются быстрому обмену в клетках. Например, при определении содержания калия или неорганического фосфора.
