«ИНСТИТУТ ПИЩЕВЫХ ТЕХНОЛОГИЙ И ДИЗАЙНА» - филиал

Государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Нижегородский государственный инженерно-экономический университет»

г. Нижний Новгород

технологический факультет

ПРАКТИЧЕСКИЕ РАБОТЫ

по дисциплине «микробиология»

для сПЕЦИальности: 19.03.04 «Технология продукции и организация общественного питания»

ВЫПОЛНИЛ (А):	студент (ка) гр. ОВ-15 ФИО
Проверила:	Галкина Е.Н., к.п.н., старший преподаватель кафедры естественнонаучных дисциплин

Н.Новгород

2015-2016 уч.год

Практическая работа № 1. Изучение морфологии бактерий.

Цель: Изучение морфологии микроорганизмов.

Материально-техническое оснащение:

Приборы и посуда: микроскоп, спиртовка, бактериологическая петля, препарировальная игла, пипетка, предметное и покровное стекла, капельница с водой, фильтровальная бумага, черная тушь, фуксин, стерильные палочки.

Теоретические сведения

Среди прокариот различают бактерии и археи. Основанием для выделения этих групп, рассматриваемых некоторыми исследователями как отдельные царства или даже империи, послужили результаты сравнения нуклеотидных последовательностей рибосомных РНК, а также выявления различий в составах клеточных стенок, липидов и ряда других особенностей.

К концу XIX в. было описано много разнообразных по форме микроорганизмов.

В 1896 г. К. Леман и Р. Нейман предложили объединить микроорганизмы по форме в три группы: шаровидные, палочковидные и извитые.

Шаровидные (кокковые) бактерии по форме напоминают шар диаметром от 0,7 до 1,5 мкм (рис. 2; 1—5). В зависимости от расположения клеток после деления в одной, двух или трех взаимно перепендикулярных плоскостях различают:

• микрококки — клетки располагаются поодиночно;

• диплококки — после деления в одной плоскости клетки не разъединяются, а остаются соединенными попарно;

• стрептококки — клетки делятся в одной плоскости, но после деления не разъединяются и образуют цепочки разной длины;

• тетракокки — клетки делятся в двух взаимно перпендикулярных плоскостях, образуя тетрады кокков;

• сарцины — клетки делятся в трех взаимно перпендикулярных плоскостях с образованием пакетов кубической формы из восьми кокков;

• стафилококки — клетки делятся беспорядочно в нескольких плоскостях, образуя скопления кокков, напоминающие гроздья винограда.

Палочковидные бактерии различаются по размерам, форме концов клетки, взаимному расположению клеток. Длина клеток палочковидных бактерий варьирует от 1 до 10 мкм, толщина — от 0,3 до 2,0 мкм. Наиболее мелкими палочковидными бактериями являются риккетсии. Другие мелкие палочки, у которых разница между длиной и толщиной невелика, по внешнему виду напоминают кокки, в связи с чем их называют коккобактериями (возбудитель бруцеллеза). Концы палочек могут быть округлыми, обрубленными, заостренными или утолщенными, похожими на булаву. Большинство палочковидных бактерий расходятся после деления и располагаются беспорядочно. Для определенных бактерий характерно соединение палочковидных клеток в цепочки. Среди палочковидных форм различают спорообразующие и неспорообразующие виды. Палочки, образующие споры, называют бациллами или клостридиями. У бацилл споры располагаются в центре клетки и диаметр их, как правило, не превышает диаметра вегетативной клетки. У клостридий спора смещена от центра и толще диаметра клетки. Такие формы имеют вид веретена, теннисной ракетки, барабанной палочки, лимона. Бациллы хорошо растут в присутствии кислорода воздуха, их называют аэробами. Клострии — анаэробы и растут только в отсутствие кислорода.

Извитые формы микробов включают изогнутые или спиралевидно извитые клетки. Их различают по количеству завитков: вибрионы — слегка изогнутые палочки, напоминающие по форме запятую; спириллы — клетки имеют 3—5 крупных завитков; спирохеты — тонкие, длинные, спиралевидной формы бактерии, характеризующиеся подвижностью, обусловленной колебательными движениями клетки. Все описанные выше виды бактерий представлены на рис. 1.

б

в

г

а

Рис. 1 Формы бактерий

1 — микрококки; 2 — стрептококки; 3 — сарцина; 4 — гонококки; 5 — пневмококки;

б — капсула пневмококков; 7 — коринебактерии дифтерии; 8 — клостридии;

9 — бациллы; 10 — вибрионы; 11— спириллы; 12 — трепонемы; 13 — боррелии;

14 — лептоспиры; 15 — актиномицеты; 16 — расположение жгутиков:

а — монотрихи; б — лофотрихи; в — амфитрихи; г — перитрихи

Приготовление препаратов бактерий чаще всего рассматривают с помощью метода «раздавленная капля». На предметное стекло наносят каплю водопроводной воды и помещают в нее небольшое количество клеток изучаемых микроорганизмов, размешивают и накрывают покровным стеклом. Микроорганизмы, выращенные на плотной питательной среде, переносят в каплю воды бактериологической петлей, выращенные в жидкой среде - стерильной пипеткой. В этом случае каплю воды на предметное стекло можно не наносить. Капля исследуемого материала должна быть настолько мала, чтобы после прижимания ее покровным стеклом не было избытка жидкости, выступающего из-под него. В противном случае избыток жид кости необходимо удалить фильтровальной бумагой.

Порядок выполнения работы:

1. Приготовьте препарат «раздавленная капля», изучить его под микроскопом и зарисовать увиденное.

2. Приготовьте мазок из зубного налета, взятого стерильной палочкой. Нанесите на сухой мазок раствор негативного красителя (жидкая тушь или фуксин), высушите. Зарисуйте: на темном фоне туши видны неокрашенные большая и малая зубные спирохеты - Spirochaeta macrodenta и Spirochaeta microdenta.

3. Сделайте вывод о проделанной работе.

Контрольные вопросы:

1. На какие две группы и по какому признаку делят прокариотов?

2. Перечислите какие виды бактерий относятся к группе шаровидных?

3. Какова характеристика коккобактерий?

4. Как называются палочки, образующие споры?

5. Какова характеристика извитых форм бактерий? Перечислите виды извитых бактерий?

6. Каким образом готовится препарат для микроскопирования методом «раздавленная капля»?

Практическая работа №2 Изучение морфологии плесневых грибов и дрожжей.

Цель: Изучение морфологии плесневых грибов и дрожжей.

Материально-техническое оснащение:

Приборы и посуда: микроскоп, спиртовка, бактериологическая петля, препарировальная игла, пипетки, предметные и покровные стекла, капельницы с водой, фильтровальная бумага.

Препараты: препарат грибницы плесневых грибов, прессованные дрожжи.

Теоретические сведения

Грибы (Fungi, Mycetes) - разнородная группа эукариотических микроорганизмов. Грибы имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, цитоплазматическую мембрану (которая содержит фосфолипиды и стеролы) и мощную клеточную стенку из глюкана, целлюлозы, хитина, белка, липидов и др. Грибы состоят из длинных тонких нитей (гиф), сплетающихся в грибницу, или мицелий. Гифы низших грибов - фикомицетов - не имеют перегородок. У высших грибов - эумицетов - гифы разделены перегородками; их мицелий многоклеточный. Эумицеты представлены аскомицетами и базидиомицетами (совершенные грибы), а также дейтеромицетами (несовершенные грибы).

К аскомицетам относятся представители родов Aspergillus, Penicil-lium и др. Представителями аскомицетов являются и дрожжи - одноклеточные грибы, утратившие способность к образованию истинного мицелия. Дрожжи имеют овальную форму клеток, диаметр которых 3-15 мкм. Они размножаются почкованием, бинарным делением (делятся на две равные клетки) или половым путем с образованием аскоспор.

Дрожжи – это тоже грибы, только они представляют собой отдельные округлые клетки, которые после деления легко расходятся. Они могут быть различной формы: эллиптической, овальной, шаровидной и палочковидной (рис.2). Длина клеток колеблется от 5 до 12 мкм, ширина - от 3 до 8 мкм. 

Форма и размеры дрожжевых клеток непостоянны и зависят от рода и вида, а также от условий культивирования, состава питательной среды и других факторов. Более стабильны молодые клетки, поэтому для характеристики дрожжей используют молодые культуры.