- •Врач-стоматолог должен знать:
- •Основные этапы развития микробиологии и имунологии.
- •Различают гифальные и дрожжевые формы грибов.
- •Идентификация бактерий по ферментативной активности.
- •Физические методы
- •Методы выделения чистых культур бактерий.
- •Требования, предъявляемые к питательным средам.
- •Классификация вирусов
- •Куриные эмбрионы.
- •Методы дезинфекции
- •В зависимости от механизма действия различают пять групп антибиотиков:
- •В зависимости от источника получения различают шесть групп антибиотиков:
- •Источники антибиотиков.
- •Способы получения.
- •Побочное воздействие на микроорганизмы.
- •Методы микробиологической диагностики :
- •Микроскопическое исследование
- •Микробиологическая диагностика стрептококковых инфекций.
- •Клебсиеллы
- •См. Вопрос 70!!!
- •Бактерии, образующие споры (клостридии) 2) неспорообразующие или так называемые неклостридиальные анаэробы.
- •Актиномикоз
- •Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами.
- •Микробиологическая диагностика
- •Микробиологическая диагностика
- •1. Препараты - индукторы эндогенного интерферона.
- •Вирус гепатита в.
- •Вирус гепатита с.
- •Вирус гепатита d (hdv) ( дельта ).
- •Прионные заболевания человека
№ 1 Место микробиологии и иммунологии в современной медицине.
Микробиология — наука, изучающая строение, жизнедеятельность микроорганизмов — бактерии, грибы, простейшие, вирусы. Является биологической фундаментальной наукой , подразделяется на общую и частную. Общая микробиология изучает закономерности строения и жизнедеятельности микроорганизмов на всех уровнях — молекулярном, клеточном, генетику и взаимоотношения их с окружающей средой. Частная микробиология изучает отдельных представителей микромира.
Многочисленные открытия в области микробиологии во второй половине XIX в. способствовали началу бурного развития иммунологии. Вначале иммунология рассматривалась как наука о невосприимчивости организма к инфекционным болезням. В настоящее время она стала общемедицинской и общебиологической наукой. Доказано, что иммунная система служит для защиты организма не только от микробных агентов, но и от любых генетически чужеродных организму веществ с целью сохранения постоянства внутренней среды организма, т.е. гомеостаза.
Иммунология является основой для разработки лабораторных методов диагностики, профилактики и лечения болезней, а также разработки иммунобиологических препаратов (вакцин, иммуноглобулинов, иммуномодуляторов, аллергенов, диагностических препаратов).
№ 2 Задачи и значение микробиологии в деятельности врача-стоматолога.
Микробиология - наука, предметом изучения которой являются микроорганизмы, их признаки.
Знание основ микробиологии позволит врачу стоматологу:
- Своевременно диагностировать патологический процесс/заболевание,
- провести грамотное обследование пациента,
- назначить терапию
Врач-стоматолог должен знать:
- этиологию, патогенез и характер клинического проявления микробных поражений в полости рта; проблемы санитарной и экологической микробиологии;
- использовать иммунобиологические и противомикробные препараты в профилактической и лечебной работе.
Глубокое знание характера микробных поражений необходимо врачу-стоматологу, чтобы своевременно принять меры биологической безопасности.
При оказании стоматологической помощи неквалифицированный врач, , может заразить пациента и себя самого инфекционным заболеванием (сифилис, туберкулез, вирусный гепатит, ВИЧ-инфекция, герпес и пр.
№ 3 Основные этапы развития микробиологии и иммунологии.
Основные этапы развития микробиологии и имунологии.
Историю развития микробиологии можно разделить на пять этапов: эвристический, морфологический, физиологический, иммунологический и молекулярно-генетический.
Пастер сделал ряд выдающихся открытий. За короткий период с 1857 по 1885 г. он доказал, что брожение (молочнокислое, спиртовое, уксуснокислое) не является химическим процессом, а его вызывают микроорганизмы; опроверг теорию самозарождения; открыл возможность жизни микроорганизмов в отсутствие кислорода; заложил основы дезинфекции, асептики и антисептики; открыл способ предохранения от инфекционных болезней с помощью вакцинации.
Путем прогревания (пастеризации) были побеждены болезни пива и вина, молочнокислых продуктов, вызываемые микроорганизмами; для предупреждения гнойных осложнений ран введена антисептика. Однако значение трудов Л. Пастера выходит далеко за рамки только этих практических достижений.
Работы Л. Пастера по вакцинации - новый этап в развитии микробиологии, по праву получивший название иммунологического.
Принцип ослабления микроорганизмов через восприимчивое животное или при высушивании позволил Л. Пастеру получить вакцины против бешенства, сибирской язвы, куриной холеры; этот принцип до настоящего времени используется при приготовлении вакцин.
Физиологический период в развитии микробиологии связан также с именем немецкого ученого Роберта Коха, которому принадлежит разработка методов получения чистых культур бактерий, окраски бактерий при микроскопии, микрофотографии. Известна также сформулированная им триада Коха, которой до сих пор пользуются при установлении возбудителя болезни.
№ 4 История развития вирусологии. Роль отечественных ученых в развитии вирусологии.
в 1885 г. Э. Шамберлан, Э. Ру и Л. Пастёр разработали вакцину против вируса бешенства, а Джённер в конце XVIII века получил первую противовирусную (противооспенную) вакцину; первооткрывателем вирусов и основоположником вирусологии считают Д.И. Ивановского, он доказал существование вируса в 1892 г. В результате наблюдений высказал предположение, что болезнь табака (мозаичная болезнь), представляет собой не одно, а два совершенно различных заболевания одного и того же растения: одно из них - рябуха, возбудителем которого является грибок, а другое неизвестного происхождения. Своими исследованиями он заложил основы ряда научных направлений вирусологии: изучение природы вируса, цитопаталогических вирусных инфекций, фильтрующихся форм микроорганизмов, хронического и латентного вирусоносительства. Д. И. Ивановский открыл вирус растений. Ф. Леффлер и П. Фрош от-крыли вирус, поражающий животных. Наконец, в 1917 г. Ф. дЭррель открыл бактериофаг вирус, поражающий бактерии.Смородинцев, российский вирусолог и иммунолог. Труды по этиологии и профилактике гриппа, энцефалитов и др. вирусных инфекций. Совместно с М. П. Чумаковым разработал и внедрил вакцину против полиомиелита. Жданов, российский вирусолог. Труды по вирусным инфекциям, молекулярной биологии и классификации вирусов, эволюции инфекционных болезней.
№ 5 Работы Л. Пастера, Р. Коха, Д. И. Ивановского, И. И. Мечникова и их значение для развития микробиологии, вирусологии и иммунологии.
В 1856 г. Л. Пастер решает очень важную проблему болезней вина и пива.
Он предложил прогревать указанные продукты при 50—60 "С, что приводило к гибели вегетативных форм микробов. Этот метод получил название пастеризации. С целью уничтожения спор микробов Л. Пастер предложил стерилизацию жидкостей при 120 °С, а твердых предметов при 140 "С. С 1880 по 1885 г. Пастер создает метод приготовления вакцин для профилактики заразных болезней. Получив вакцины против куриной холеры, сибирской язвы и бешенства, он делает очень важный вывод, что ослабленные микробы, введенные в организм, создают в нем иммунитет против последующих заражений вирулентными микробами. В 1885 г. Л. Пастер создал вакцину против бешенства (антирабич.вакцина). Роберт Кох культивировал и описал возбудителя сибирской язвы (1876), стафилококка (1878), возбудителей раневых инфекций и столбняка (1889),возбудителя туберкулеза (палочка Коха) и туберкулина, которыйнашел применение в диагностике этой инфекции, холерного вибриона и пути его передачи (1883—1884 гг.), открыл возбудителей возвратного тифа. Р. Кох создал многие важнейшие методы исследования: ввел в практику анилиновые красители, предложил использовать в микроскопии иммерсионные системы и конденсор, разработал метод культивирования микроорганизмов на биологических жидкостях и плотных питательных средах, ввел в практику метод дробных посевов. Д.И.Ивановский (1864— 1920) открыл вирусы — представителей царства Vira. Один из основоположников вирусологии. Впервые открыл проходящий через бактериологические фильтры возбудитель табачной мозаики, названный впоследствии вирусом. Труды по фитопатологии и физиологии растений. И.И.МЕЧНИКОВ- создатель фагоцитарной, или клеточной, теории иммунитета. К числу важнейших работ в области микробиологии относятся его исследования патогенеза холеры человека, сифилиса, туберкулеза, возвратного тифа. Он является основоположником учения о микробном антагонизме, ставшем основой для развития науки об антибиотикотерапии.
№ 6 Роль отечественных ученых (И. Ф. Гамалея, П. Ф. Здродовский, А. А. Смородинцев, М. П. Чумаков, 3. В. Ермольева, В. М. Жданов и др.) для развития микробиологии, вирусологии и вирусологии.
Большой вклад в изучение инфекционного процесса и борьбу с эпидемиями внесли многие отечественные микробиологи.Н.Ф. Гамалею (1859—1949) принадлежат заслуги в области ликвидации оспы в нашей стране. Он был автором многочисленных научных исследований, в том числе посвященных бешенству, холере,чуме и другим серьезным проблемам. П Ф. Здродовского (1890— 1976) — по исследованию риккетсиозов, вирусно-генетическая теория канцерогенеза А.А. Зильбера(1894-1966), М.П. Чумакова и А.А. Смородинцева (1901-1986) -по исследованию вирусных энцефалитов и созданию отечественной вакцины против полиомиелита, П.Н. Кашкина (1902—1992) —по исследованию грибов и созданию отечественной медицинской микологии. Ермольева, российский микробиолог. Получила первые отечественные образцы антибиотиков - пенициллина, стрептомицина; интерферона.
№ 7 Основные принципы классификации микробов.
Этим занимается специальная наука — систематика микроорганизмов, включает три части: классификацию, таксономию и идентификацию.
Таксономические категории: царство, подцарство, отдел, класс, порядок, семейство, род, вид, подвид и др.
Микроорганизмы представлены доклеточными формами (вирусы )и клеточными формами (бактерии, грибы и простейшие). Различают 3 домена (или «империи»): «Bacteria», «Archaea» и «Eukarya»:
- домен «Bacteria» — прокариоты, представленные настоящими бактериями (эубактериями);
- домен «Archaea» — прокариоты, представленные архебактериями;
- домен «Eukarya» — эукариоты, клетки которых имеют ядро с ядерной оболочкой и ядрышком, а цитоплазма состоит из высокоорганизованных органелл — митохондрий, аппарата Гольджи и др. Домены включают царства, типы, классы, порядки, семейства, роды, виды.
Бактерии — прокариотические, преимущественно одноклеточные микроорганизмы, которые могут также образовывать ассоциации (группы) сходных клеток, характеризующиеся клеточными, но не организменными сходствами.
Критерии, позволяющие отнести штаммы бактерий к той или иной группе:
• морфология микробных клеток (кокки, палочки, извитые); • отношение к окраске по Граму — тинкториальные свойства (грамположительные и грамотрицательные); • тип биологического окисления — аэробы, факультативные анаэробы, облигатные анаэробы; • способность к спорообразованию.
Дальнейшая классификация групп на семейства, рода и виды - проводится на основании изучения биохимических свойств.
Для патогенных бактерий определение «вид» дополняется способностью вызывать определенные нозологические формы заболеваний.
Существует внутривидовая классификация бактерий на варианты:
• по биологическим свойствам — биовары или биотипы; • биохимической активности— ферментовары; • антигенному строению — серовары или серотжы; • чувствительности к бактериофагам — фаговары или фаготипы; • устойчивости к антибиотикам — резистентовары.
№ 8 Строение и химический состав бактериальной клетки, отличия от эукариотической клетки. Функции структурных элементов.
Обязательными органоидами бактериальной ( прокариотической) клетки являются: ядерный аппарат, цитоплазма, цитоплазматическая мембрана.
Необязательными элементами являются: клеточная стенка, капсула, споры, пили, жгутики.
1. В центре бактериальной клетки находится нуклеоид - ядерное образование, представленное чаще всего одной хромосомой кольцевидной формы. Состоит из двухцепочечной нити ДНК. Нуклеоид не отделен от цитоплазмы ядерной мембраной.
2. Цитоплазма- сложная коллоидная система, содержащая различные включения метаболического происхождения (зерна волютина, гликогена, гранулезы и др.), рибосомы и другие элементы белоксинтезирующей системы, плазмиды (вненуклеоидное ДНК), мезосомы (образуются в результате инвагинации цитоплазматической мембраны в цитоплазму, участвуют в энергетическом обмене, спорообразовании, формировании межклеточной перегородки при делении).
3. Цитоплазматическая мембрана ограничивает с наружной стороны цитоплазму, имеет трехслойное строение и выполняет ряд важнейших функций- барьерную (создает и поддерживает осмотическое давление), энергетическую (содержит многие ферментные системы- дыхательные, окислительно- восстановительные, осуществляет перенос электронов), транспортную (перенос различных веществ в клетку и из клетки).
4. Клеточная стенка- присуща большинству бактерий (кроме микоплазм, ахолеплазм и некоторых других не имеющих истинной клеточной стенки микроорганизмов). Она обладает рядом функций, прежде всего обеспечивает механическую защиту и постоянную форму клеток, с ее наличием в значительной степени связаны антигенные свойства бактерий. В составе - два основных слоя, из которых наружный- более пластичный, внутренний- ригидный.
Основное химическое соединение клеточной стенки, которое специфично только для бактерий-пептидогликан (муреиновые кислоты). От структуры и химического состава клеточной стенки бактерий зависит важный для систематики признак бактерий- отношение к окраске по Граму
Типичная эукариотическая клетка состоит из трех компонентов: оболочки, цитоплазмы и ядра.
Основные различия между прокариотической и эукариотической клетками. Бактериальная (прокариотическая) клетка окружена клеточной стенкой . Цитоплазма обильно насыщена рибосомами . Молекула ДНК обычно расположена в центре клетки.
Цитоплазма эукариотической клетки окружена цитоплазматической мембраной , включает митохондрии , вакуоли , шероховатую эндоплазматическую сеть с рибосомами , гладкую эндоплазмати-ческую сеть , запасные гранулы и ядро .
№ 9 Принципы классификации бактерий. Строение клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий.
От структуры и химического состава клеточной стенки бактерий зависит важный для систематики признак бактерий- отношение к окраске по Граму. В соответствии с ним выделяют две большие группы- грамположительные (“грам+”) и грамотрицательные (“грам - “) бактерии. Стенка грамположительных бактерий после окраски по Граму сохраняет комплекс йода с генциановым фиолетовым (окрашены в сине- фиолетовый цвет), грамотрицательные бактерии теряют этот комплекс и соответствующий цвет после обработки и окрашены в розовый цвет за счет докрашивания фуксином.
Особенности клеточной стенки грамположительных бактерий. Мощная, толстая, несложно организованная клеточная стенка, в составе которой преобладают пептидогликан и тейхоевые кислоты, нет липополисахаридов (ЛПС), часто нет диаминопимелиновой кислоты.
Особенности клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Клеточная стенка значительно тоньше, чем у грамположительных бактерий, содержит ЛПС, липопротеины, фосфолипиды, диаминопимелиновую кислоту. Устроена более сложно- имеется внешняя мембрана, поэтому клеточная стенка трехслойная.
№ 10 Тинкториальные свойства бактерий. Простые и сложные методы окраски Окраска по Граму.
Тинкториальные свойства - свойства бактерий, характеризующие их способность вступать в реакцию с красителями и окрашиваться определенным образом. Для бактерий характерны четыре основные формы: сферическая (шаровидная), цилиндрическая (палочковидная), извитая и нитевидная. Бактерии шаровидной формы — кокки —подразделяются на микрококки (отдельно лежащие кокки), диплококки (парные кокки), стрептококки (цепочки кокков), стафилококки (имеющие вид виноградных гроздьев), тетракокки (образования из четырех кокков) и сарцины (пакеты из 8 или 16 кокков). Палочковидные бактерии располагаются в виде одиночных клеток, дипло- или стрептобактерий. Извитые формы бактерий — вибрионы и спириллы, а также спирохеты. Вибрионы имеют вид слегка изогнутых палочек, спириллы — извитую форму с несколькими спиральными завитками.
Методы окраски. Окраску мазка производят простыми или сложными методами. Простые заключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю — Нильсену и др.) включают последовательное использование нескольких красителей и имеют дифференциально-диагностическое значение. Отношение микроорганизмов к красителям расценивают как тинкториальные свойства.
Окраска по Граму используется для определения типа строения клеточной стенки. Это основной метод в бактериологии. В зависимости от окраски по Грамму все бактерии подразделяются на грампо-ложительные и грамотрицательные. Генциан-виолет с йодом образует соединение нерастворимое в воде, плохо растворимое в спирте. При окраске клетки грамположительные бактерии удерживают соединение и остаются окрашенными после воздействия спиртом,грамотрицательные – обесцвечиваются и их можно окрасить контрасным веществом (напримур, фуксином, тогда клетки выглядят красными).
№ 11 Морфология грибов
Грибы относятся к царству Fungi (Mycetes, Mycota). Это многоклеточные или одноклеточные нефотосинтезирующие (бесхлорофильные) эукариотические микроорганизмы с клеточной стенкой.
Грибы имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, цитоплазматическую мембрану и многослойную, ригидную клеточную стенку, состоящую из нескольких типов полисахаридов, а также белка, липидов и др. Некоторые грибы образуют капсулу. Цитоплазматическая мембрана содержит гликопротеины, фосфолипиды и эргостеролы. Грибы являются грамположительными микробами, вегетативные клетки — некислотоустойчивые.
