2.5.2. Визначення антибіотиків і сульфаніламідів у молоці за допомогою copan test

Принцип дії Copan Test полягає у затримці росту в агаровому середовищі (при наявності залишків антимікробних речовин у зразку) чутливого до багатьох антибіотиків і сульфаніламідів штаму спороутворюючої бактерії, природного комерсалу Bacillus stearothermophilus.

Після внесення до тестової ампули (мікропластини) одноразовою піпеткою-дозатором 0,1 мл молока проводять інкубацію при температурі 64 ± 1 ˚С протягом 3 годин ±15 хв., після чого оцінюють результати тестування шляхом візуального огляду тестових ампул. Для інтерпретації позитивності або негативності результатів тестування використовують кольорову діаграму, що додається до тест-набору (див. рис. 4 і дод. Д).

Рис.4. Кольорова діаграма для інтерпретації результатів аналізу

2.5.3. Визначення антибіотиків бета-лактамної групи у молоці за допомогою тесту charm rosa mrl

C HARM ROSA MRL – це рецепторний бліц-тест, який дозволяє виявити вміст антибіотиків бета-лактамної групи в молоці на рівні гранично допустимих концентрацій згідно EU/Codex, а також законодавства США, Австралії та інших країн.

Тест випускається у вигляді одноразових тестових смужок в комплектах по 25 і 100 штук (див. фото). Смужка призначена для одного аналізу. Для кожного аналізу необхідно використовувати одноразову піпетку, яка гарантує додавання точної кількості (0,3 мл) молока.

Комплект тестових смужок

Для інкубації тестів (витримки при температурі 56±1ºС) використовуються спеціальні ROSA інкубатори. Для прискорення обробки даних аналізів можна використовувати ROSA-зчитувач або ROSA- аналізатор LUM-T від наукового об’єднання charm.

Найважливішою перевагою charm rosa mrl є швидкість проведення дослідження – для проведення аналізу необхідно лише 8 хвилин.

Суть даного методу полягає у зміні кольору ліній на тестовій смужці, обробленій бактеріальним рецептором, який має здатність зв'язуватися з антибіотиками бета-лактамного ряду. Бактеріальна культура, яка є основою рецептора при температурі 56 ±1 ⁰С розмножується з виділенням кислоти, що приводить до зміни рН. Відповідно, на тестовій смужці з'являються різної інтенсивності забарвлення лінії, насиченість кольору яких залежить від присутності чи відсутності у пробі молока інгібіторів бета-лактамної природи.

Оцінку результатів тестування проводять візуально, порівнюючи тестову лінію Т з контрольною лінією С. Проба вважається негативною, якщо лінія Т є або темнішою за лінію С, або однаковою з нею за інтенсивністю забарвлення (антибіотики відсутні, або присутні в концентраціях, нижчих за мінімальний рівень визначення даного тесту). Проба вважається ймовірно позитивною (±), якщо лінія Т є або помітно світлішою порівняно з лінію С, або нерівною чи частково проявленою (антибіотики присутні в концентраціях, рівних мінімальному рівню визначення даного тесту). Проба вважається позитивною (+), якщо лінія Т є відсутньою (антибіотики присутні в концентраціях, вищих за мінімальний рівень визначення).

2.6. Визначення кількості соматичних клітин (наявності анормального молока у збірному коров’ячому молоці)

Анормальним вважається молоко з домішками молозива, а також отримане протягом останніх 7 діб лактації (стародійне), від корів з субклінічною формою маститу та іншими порушеннями стану організму, при яких збільшується кількість соматичних клітин в молоці.

Збірне коров’яче молоко, отримане від здорових корів, містить в 1 см³ до 500 тис. соматичних клітин, молоко з домішкою анормального молока – більше 500 тис. соматичних клітин.

Методи визначення:

• візуальний метод з використанням препарату «Мастоприм»;

• метод з використанням віскозиметра;

• метод з використанням лічильника соматичних клітин