Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторний практикум.docx
Скачиваний:
3
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
1.06 Mб
Скачать

2.4. Визначення інгібуючих речовин у молоці

До інгібіторів відносять лікарські препарати (антибіотики, сульфаніламіди), формалін, перекис водню, соду, миючі та дезінфікуючі речовини та інші хімічні речовини стороннього походження.

Методи визначення основані на відновленні індикаторів резазуріну або метиленового голубого при розвитку у молоці чутливого до інгібуючих речовин Streptococcus thermophilus.

2.4.1. Визначення інгібуючих речовин з резазуріном

У чисті пробірки наливають по 10 см3 досліджуваного молока і закривають стерильними гумовими пробками. Одночасно проводять контрольний аналіз: в пробірку наливають 10 см3 відновленого сухого препарату для контролю інбуючих речовин (СКИВ).

Пробірки з досліджуваним молоком і контрольною пробою нагрівають на водяній бані до 85-87 ºС, витримують 10 хв. і охолоджують до 46-48 ºС. Після цього в пробірки вносять робочу тест-культуру.

Вміст пробірок перемішують 3-кратним перевертанням і витримують протягом 1 год. 15 хв. при температурі 43-45 ºС в редуктазнику або на водяній бані. В пробірки з досліджуваним молоком вносять 1 см3 основного розчину резазуріну з температурою 20 ºС, перемішують шляхом 2-кратного перевертання і витримують при температурі 45-47 ºС протягом 10 хв., після чого проводять оцінку.

При відсутності інгібіторів вміст пробірок буде мати рожевий або білий колір. При наявності у молоці інгібіторів забарвлення вмісту пробірок буде синьо-сірим, синьо-фіолетовим або фіолетовим (див. дод. Б).

2.4.2. Визначення інгібуючих речовин з метиленовим синім

Пробірки з 10 см3 досліджуваного молока, не щільно закриті гумовими пробками, нагрівають на водяній бані до температури 85-89 ºС, витримують при цій температурі 10 хв. і охолоджують до 41-45 ºС. Потім в пробірки вносять по 2 см3 приготовленої для проведення аналізу суміші, яка складається з водного розчину пептону, однодобової культури термофільного стрептококу і водного розчину метиленового голубого. Суміш перемішують шляхом 3-кратного перевертання і витримують на водяній бані при температурі 41-42 ºС протягом 2 год. Якщо інгібуючі речовини відсутні в досліджуваному молоці, то вміст пробірок буде мати білий колір, якщо наявні – колір буде голубим. Поява голубого кільця висотою 1 см3 на поверхні молока не враховується.

2.5. Визначення антибіотиків у молоці ведуть

- чашковим методом (з тест-культурою Bac. stearothermophilus);

- тестовим методом з використанням:

ферментативних експрес-тестів Beta-star, Penzym (тривалість аналізу 5-8 хв.)

мікробіальних тестів для визначення широкого спектру антибіотиків і сульфаніламідів Сopan Test, BRT Test та інших (тривалість аналізу 2,0-2,5 год.).

2.5.1. Визначення антибіотиків у молоці чашковим методом з тест-культурою Bac. Stearothermophilus

Метод оснований на здатності антибіотиків, які містяться у молоці, проникати в агарове середовище зі спорами тест-мікроба і перешкоджати його росту. Утворення прозорих зон інгібування на чашці Петрі свідчить про присутність у досліджуваній пробі антибіотиків.

Цей метод достатньо складний і трудомісткий, займає багато часу, тому рідко використовується у промисловості. Йому на зміну прийшли тестові методи, які зручні та прості у використанні і мають високу чутливість.