Дифференциация внутри триба proteae

------------------+-----------------------------------------------

¦ Тесты ¦ Proteus ¦

¦ +--------+---------+-------+--------+----------+

¦ ¦vulgaris¦mirabilis¦morgani¦rettgeri¦inconstans¦

+-----------------+--------+---------+-------+--------+----------+

¦Индол ¦+ ¦- ¦+ ¦+ ¦+ ¦

¦H S ¦+ ¦+ ¦- ¦- ¦- ¦

¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦

¦Цитрат Симмонса ¦Х ¦+/(+) ¦- ¦+ ¦+ ¦

¦Желатина ¦+ ¦+ ¦- ¦- ¦- ¦

¦Орнитин ¦- ¦+ ¦+ ¦- ¦- ¦

¦Адонит ¦- ¦- ¦- ¦+ ¦+/- ¦

¦Инозит ¦- ¦- ¦- ¦+ ¦-/+ ¦

¦Глюкоза (газ) ¦+/- ¦+ ¦+ ¦-/+ ¦+/- ¦

¦Маннит ¦- ¦- ¦- ¦+ ¦- ¦

¦Мочевина ¦+ ¦+ ¦+ ¦+ ¦- ¦

------------------+--------+---------+-------+--------+-----------

Примечание: Х - различные реакции.

Для серологической идентификации бактерий рода Proteus Московский НИИВС им. И.И. Мечникова выпускает поливалентные и типовые к O- и H-антигенам адсорбированные сыворотки. Разработаны также поливалентные и типовые адсорбированные сыворотки для идентификации бактерий рода Providencia (Proteus inconstans).

Для идентификации энтеробактерий в практических лабораториях приемлема схема дифференциации с использованием минимального набора тестов, предложенная Всесоюзным центром по эшерихиям и модифицированная в микробиологической лаборатории МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского. Методика заключается в следующем. Через 18 - 20 часов после посева исходного материала на питательные среды отбирают колонии и засевают их на модифицированную среду Олькеницкого для первичной дифференциации по основным тестам: ферментация глюкозы с наличием или отсутствием газообразования, ферментация лактозы, образование сероводорода и наличие уреазы.

На следующий день на основании результатов роста культур, выделенных на данной среде, и с учетом полученных вариантов проводят вторичную биохимическую дифференциацию по дополнительным тестам.

Приводим возможные варианты первичной дифференциации.

Вариант 1: глюкоза кг/к, лактоза -, H S -, мочевина -. Образование

2

кислоты или кислоты с газообразованием на глюкозе учитывают по посинению

столбика среды с газо- или без газообразования. Этот вариант реакции

характерен для Shigella, Eschenchia, Hafnia, Serratia, Proteus inconstans.

Для дифференциации этих микроорганизмов рекомендуется изучение усвоения

цитрата, индолообразование, определение подвижности, декарбоксилирование

фенилаланина и лизина, ферментация рамнозы и сорбита (табл. 10).

Таблица 10 

СХЕМА ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ENTEROBACTERIACEAE

(ВАРИАНТ 1: ГЛЮКОЗА КГ/К; ЛАКТОЗА -; МОЧЕВИНА -; H2S -)

-----------------+-----------+--------+------+--------+-----------

¦ Тесты ¦Escherichia¦Shigella¦Hafnia¦Sirratia¦ Proteus ¦

¦ ¦ ¦ ¦ ¦ ¦inconstans¦

+----------------+-----------+--------+------+--------+----------+

¦Цитрат Симмонса ¦- ¦- ¦Х ¦+ ¦+ ¦

¦Индол ¦+/- ¦-/+ ¦- ¦- ¦+ ¦

¦Подвижность ¦+/- ¦- ¦Х ¦+ ¦Х ¦

¦Фенилаланин ¦- ¦- ¦- ¦- ¦+ ¦

¦Лизин ¦+/- ¦- ¦+ ¦+ ¦- ¦

¦Рамноза ¦+/Х ¦Х ¦+ ¦- ¦- ¦

¦Сорбит ¦+/Х ¦Х ¦- ¦+ ¦Х ¦

-----------------+-----------+--------+------+--------+-----------

Вариант 2: глюкоза кг, лактоза -, H S +, мочевина -. Эти свойства

2

учитывают по изменению столбика среды в серовато-зеленоватый цвет с

газообразованием и почернением. Этот вариант характерен для Citrobacter,

Salmonella, Edwardsiella. Для дифференциации этих видов рекомендуется

постановка тестов: рост на среде Симмонса, индолообразование,

декарбоксилирование лизина (табл. 11). Некоторые лактозопозитивные варианты

Citrobacter дают изменение косяка в синий цвет.

Таблица 11 

СХЕМА ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ENTEROBACTERIACEAE

(ВАРИАНТ 2: ГЛЮКОЗА КГ; ЛАКТОЗА -; МОЧЕВИНА -; H S +)

2

-----------------------------+-----------+----------+-------------

¦ Тесты ¦Citrobacter¦Salmonella¦Edwardsiella¦

+----------------------------+-----------+----------+------------+

¦Цитрат Симмонса ¦+ ¦+/- ¦- ¦

¦Индол ¦-/+ ¦- ¦+ ¦

¦Лизин ¦- ¦+ ¦+ ¦

-----------------------------+-----------+----------+-------------

Вариант 3: глюкоза кг/к, лактоза +, H S -, мочевина -. Эти свойства

2

проявляются посинением столбика среды с газообразованием и посинением

косяка. Изменения среды характерны для Escherichia, Enterobacter aerogenes,

Serratia, Hafnia. Дифференциацию между этими видами проводят по росту на

среде Симмонса, индолообразованию и декарбоксилированию лизина, разложению

сорбита и рамнозы (табл. 12).

Таблица 12 

СХЕМА ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ENTEROBACTERIACEAE

(ВАРИАНТ 3: ГЛЮКОЗА КГ/К; ЛАКТОЗА +; МОЧЕВИНА -; H S -)

2

------------------------+------+--------+------------+------------

¦ Тесты ¦Hafnia¦Serratia¦Enterobacter¦Escherichia¦

¦ ¦ ¦ ¦ aerogenes ¦ ¦

+-----------------------+------+--------+------------+-----------+

¦Цитрат Симмонса ¦Х ¦+ ¦+ ¦- ¦

¦Индол ¦- ¦- ¦- ¦+/- ¦

¦Сорбит ¦- ¦+ ¦+ ¦+ ¦

¦Лизин ¦+ ¦+ ¦+ ¦+/- ¦

¦Рамноза ¦+ ¦- ¦+ ¦+/Х ¦

------------------------+------+--------+------------+------------

Вариант 4: глюкоза -, лактоза -, H S +/-, мочевина +. Усвоение мочевины

2

проявляется окрашиванием всей среды в оранжевый цвет. Образование H S

2

характерно для Proteus vulgaris и Proteus mirabilis. Оно проявляется

почернением столбика среды. Дифференциацию между Pr. vulgaris и Pr.

mirabilis проводят по тестам индолообразования и разложения мальтозы, между

Pr. morgani и Pr. rettgeri - по росту на среде Симмонса и ферментации

инозита (табл. 13).

Таблица 13 

СХЕМА ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ENTEROBACTERIACEAE

(ВАРИАНТ 4: ГЛЮКОЗА -; ЛАКТОЗА -; МОЧЕВИНА +; H2S +/-)

-----------------------------+-------+--------+--------+----------

¦ Тесты ¦Proteus¦Proteus ¦Proteus ¦ Proteus ¦

¦ ¦morgani¦rettgeri¦vulgaris¦mirabilis¦

+----------------------------+-------+--------+--------+---------+

¦Цитрат Симмонса ¦- ¦+ ¦Х ¦+ (+) ¦

¦Индол ¦+ ¦+ ¦+ ¦- ¦

¦Мальтоза ¦- ¦- ¦+ ¦- ¦

¦Фенилаланин ¦+ ¦+ ¦+ ¦+ ¦

¦Инозит ¦- ¦+ ¦- ¦- ¦

¦H S ¦- ¦- ¦+ ¦+ ¦

¦ 2 ¦ ¦ ¦ ¦ ¦

-----------------------------+-------+--------+--------+----------

Вариант 5: глюкоза кг/к, лактоза -, H S -, мочевина (+) - замедленная

2

реакция. Эти свойства проявляются в первые сутки посинением столбика среды

с газообразованием на слабо-оранжевом фоне, на вторые сутки вся среда

приобретает оранжевый цвет. Дифференциация проводится между Klebsiella и

Enterobacter по определению подвижности, декарбоксилированию лизина и

ферментации инозита. Для уточнения разложения мочевины следует делать

дополнительный посев на среду Преуса. В данном варианте разложение лактозы

Klebsiella не проявляется (табл. 14).

Таблица 14 

СХЕМА ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ENTEROBACTERIACEAE

(ВАРИАНТ 5: ГЛЮКОЗА КГ/К; ЛАКТОЗА -;

МОЧЕВИНА -/(+); H2S -)

----------------------------------+----------+--------------------

¦ Тесты ¦Klebsiella¦Enterobacter clocae¦

+---------------------------------+----------+-------------------+

¦Инозит ¦+ ¦- ¦

¦Подвижность ¦- ¦+ ¦

¦Лизин ¦+ ¦- ¦

----------------------------------+----------+--------------------

Заключительным этапом всех отдифференцированных по биохимическим свойствам видов является серологическая идентификация с соответствующими агглютинирующими сыворотками.

Для определения ферментативных свойств с целью межродовой дифференциации и внутривидовой идентификации энтеробактерий Горьковский НИИЭМ выпускает стабильные бумажные системы - "СИБ" набор N 2 (малый) - 9 тестов и набор N 2 "В" (расширенный) - 23 теста.