Робота 3 вивчення стану продихів методом відбитків (за Полаччі)

Загальні відомості. Метод заснований на одержанні тонкої прозорої плівки з відбитками (репліками) продихів. Розглядаючи їх під мікроскопом, можна визначити число продихів на одиниці листової поверхні та їхній розмір. Для виготовлення реплік застосовують речовини, що утворюють плівку при випаровуванні розчиннику або в результаті полімеризації. Дія самих органічних розчинників і охолодження листа в результаті їхнього випару можуть впливати на апертуру продихів. Використання полімерів знижує артефакти.

Мета роботи. Виявити стан продихів листя соняшника в різні часи доби та розрахувати площу продихів до загальної площі листя.

Матеріали й устаткування. П'ятнадцятиденні рослини соняшника, розчин коллодію або силіцій-органічний каучук і каталізатор, безбарвний лак для нігтів для виготовлення плівки. Мікроскопи, окуляр-мікрометр, об'єкт-мікрометр, предметні й покривні скло, пінцети, пензлики.

Порядок виконання роботи.

На нижню поверхню листа скляною паличкою наносять тонкий шар розчину силіконового каучуку, змішаного з каталізатором, і залишають на 2-3 хв. для полімеризації. «Негатив» знімають із листа пінцетом, покриваючи безбарвним лаком і дають висохнути. У такий спосіб на лаковій плівці, що легко знімається зі зліпка, одержують позитивне зображення листа. Плівку поміщають у краплю води на предметне скло, накривають покривним і розглядають під мікроскопом об'єктивом х40. Визначають середнє число продихів у поле зору мікроскопа, дослідивши кілька полів зору в різних ділянках препарату.

Потім за допомогою окуляра-мікрометра знаходять середню площу продихової щілини й площа поля зору мікроскопу. Для цього вимірюють ширину й довжину продихової щілини не менш чим в 20 продихів і встановлюють середню величину. Площа продихової щілини обчислюють за формулою

S = ab,

де а й b — мала й більша півосі еліпсу, тобто половина ширини й довжини продихової щілини.

За числом продихів і середньої площі продихової щілини розраховують загальну площу продихових отворів у поле зору мікроскопу. Вимірюють діаметр поля зору, обчислюють радіус і визначають площу поля за формулою S=r². Розраховують площу, займану всіма продиховими отворами, у відсотках загальної поверхні листа.

Методом відбитків досліджують листи різних ярусів тієї самої рослини, а потім роблять висновок про вплив ярусності на розміри поверхні листа, що випаровує. Результати досліду записують у таблицю.

Таблиця 7 - Визначення стану продихів у соняшника

Ярус листя	Кількість продихів у полі зору мікроскопу	Ціна поділу окуляру-мікрометру, мкм	Розміри продихових отворів					Заг. лощачи продихових отворів, мкм 2	площа поля зору, мкм2	Площа продихових отворів, % до загальної площі поверхні листа
			у поділах окуляру-мікрометру		у мікрометрах
			ширина	довжина	ширина	довжина	площа